童銣烯 陳金水 吳天敏 陳金雄 范柳芳 薛文娟

摘要：目的 觀察益氣活血中藥對(duì)糖尿病心肌病致射血分?jǐn)?shù)保留心衰大鼠心功能的影響。方法 選取SPF級(jí)雄性 SD 大鼠，隨機(jī)分為空白對(duì)照組、模型組及益氣活血中藥組，每組15只?？瞻讓?duì)照組大鼠繼續(xù)以普通飼料喂養(yǎng)，單次腹腔注射生理鹽水;模型組及中藥組大鼠以高糖高脂飼料喂養(yǎng)，以鏈脲佐菌素腹腔注射制作大鼠糖尿病心肌病模型，造模成功后8周空白對(duì)照組單次腹腔注射生理鹽水，模型組單次腹腔注射鏈脲佐菌素，益氣活血中藥組單次腹腔注射鏈脲佐菌素，隨后應(yīng)用中藥生藥灌胃，連續(xù)處理10d。采用頸動(dòng)脈心室內(nèi)插管法評(píng)估各組大鼠心臟血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)。結(jié)果 各組大鼠心率比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。與正常對(duì)照組比較，模型組左室舒張末壓（LVEDP）水平顯著升高（P<0.01），左室壓力最大上升速率（LV+dp/dt max）、左室壓力最大下降速率（LV-dp/dt max）水平顯著下降（P<0.01）;與模型組比較，益氣活血中藥組LVEDP顯著下降（P<0.01），LV+dp/dt max水平明顯升高（P<0.05），LV-dp/dt max絕對(duì)值顯著升高（P<0.01）。結(jié)論 益氣活血中藥對(duì)糖尿病大鼠心臟舒張功能具有一定改善作用。

關(guān)鍵詞：益氣活血中藥;糖尿病心肌病;射血分?jǐn)?shù);動(dòng)物實(shí)驗(yàn);大鼠

中圖分類號(hào)：R285.5?? 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A?? 文章編號(hào)：1007-2349（2022）01-0076-03

糖尿病心肌病（Diabetic Cardiomyopathy，DCM）是指由糖尿病發(fā)展導(dǎo)致的心肌壞死，不同于高血壓、冠心病和其他心臟瓣膜疾病等引起的心肌病變，屬于特殊心肌病，疾病發(fā)展進(jìn)程可分為2個(gè)階段，早期表現(xiàn)為心肌舒張功能障礙，晚期表現(xiàn)為心肌纖維化逐步加重，舒張功能和收縮功能障礙，定義為射血分?jǐn)?shù)保留的心力衰竭（Heart failure with preserved ejection fraction，HFPEF）。HFPEF是DCM的主要臨床特征，其病理改變?yōu)樾募〕衫w維細(xì)胞過度增殖。王好[1]通過基礎(chǔ)研究證實(shí)高血糖可引起心肌細(xì)胞過分表達(dá)，促進(jìn)心肌纖維化，導(dǎo)致DCM的形成和發(fā)展，糖尿病患者糖代謝紊亂可進(jìn)一步促進(jìn)HFPEF進(jìn)展。近年來國內(nèi)關(guān)于中醫(yī)藥治療糖尿病的研究不斷深入，基礎(chǔ)研究和臨床試驗(yàn)均證實(shí)益氣活血方可通過調(diào)節(jié)糖代謝改善血糖水平[2]。HFPEF缺乏有效的治療手段，為了改善此現(xiàn)狀，本研究通過前瞻性研究觀察益氣活血中藥對(duì)HFPEF大鼠心功能的影響，啟動(dòng)早期治療，為制定規(guī)范化治療方案提供思路。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 45只SPF級(jí)6～8周齡雄性SD大鼠，體質(zhì)量為（200±20）g，購置于上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限責(zé)任公司，許可證編號(hào)SCXK（滬）2017-0005。

1.1.2 藥物 黨參10 g，黃芪30 g，丹參15 g，當(dāng)歸8 g，白術(shù)10 g，桃仁15 g，紅花10 g，茯苓10 g，川芎10 g，甘草5 g，白芍15 g，上述飲片購置于福建中醫(yī)藥大學(xué)附屬第三人民醫(yī)院，經(jīng)常規(guī)方法煎煮后制成含5 g/mL生藥的藥液放4℃ 冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

1.1.3 主要試劑和儀器 鏈脲佐菌素（streptozotocin，STZ，購自Sigma-Aldrich，貨號(hào)：S0130-500mg）、戊巴比妥鈉（sigma公司，貨號(hào)：P3761，產(chǎn)品CAS：57-33-0）、powerlab多道生理記錄儀由埃德儀器國際貿(mào)易（上海）有限公司提供，穏豪微量血糖測定儀及配套血糖試紙購自美國強(qiáng)生。

1.2 方法

1.2.1 造模 45只隨機(jī)分為空白對(duì)照組、模型組及益氣活血中藥組（簡稱中藥組），每組15只。所有大鼠搬到實(shí)驗(yàn)動(dòng)物房后以普通飼料喂養(yǎng)1周，密切觀察大鼠毛發(fā)及排泄物。適應(yīng)性喂養(yǎng)后禁食12h開始實(shí)驗(yàn)。模型組及益氣活血中藥組以高糖高脂飼料喂養(yǎng)，以STZ（10 mmol/L，60 mg/kg）單次腹腔注射制作大鼠糖尿病心肌病模型，尾靜脈血漿葡萄糖濃度>16.7mmoL/L 可認(rèn)為糖尿病心肌病模型造模成功?？瞻讓?duì)照組繼續(xù)以普通飼料喂養(yǎng)，以同體積生理鹽水單次腹腔注射。

1.2.2 給藥 造模成功后繼續(xù)普通飼料喂養(yǎng)8周，符合要求的大鼠進(jìn)一步進(jìn)行實(shí)驗(yàn)?？瞻讓?duì)照組單次腹腔注射生理鹽水，模型組單次腹腔注射STZ，益氣活血中藥組單次腹腔注射STZ，隨后應(yīng)用中藥生藥灌胃，劑量為100 g/（kg·d），灌胃液體積2 mL/100 g，共連續(xù)處理10 d。每日稱重，根據(jù)體重調(diào)整藥物劑量。

1.3 對(duì)比指標(biāo)

1.3.1 大鼠一般情況 實(shí)驗(yàn)期間嚴(yán)密觀察大鼠攝食、飲水、排尿及精神狀態(tài)，監(jiān)測大鼠體重及血糖。

1.3.2 血流動(dòng)力學(xué)檢測 采用頸動(dòng)脈心室內(nèi)插管法評(píng)估各組大鼠心臟血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)。3%戊巴比妥鈉0.1～0.15 mL/100 g腹腔注射麻醉，暴露右側(cè)頸外動(dòng)脈，插管后連接多道生理記錄儀壓力換能器，采集生物信號(hào)，記錄左室收縮末壓（LVESP）、左室舒張末壓（LVEDP）以及左室壓力最大上升或下降速率（LV+dp/dtmax/LV-dp/dtmax）。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 本次研究所有數(shù)據(jù)使用SPSS22.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料采用（x±s）表示，組間采用單因素方差分析（ANOVA），組間涼涼比較采用LSD-t檢驗(yàn)，P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P<0.01為差異顯著。

2 結(jié)果

2.1 造模結(jié)果 模型組及造模成功大鼠共計(jì)30只，取材前模型組大鼠死亡3只，益氣活血中藥組大鼠死亡2只，原因?yàn)檠沁^高引起感染。

2.2 各組大鼠一般情況 空白對(duì)照組大鼠無多飲、多食、小便增多、體重減輕情況，精神狀態(tài)好，活動(dòng)自如;模型組大鼠有多飲、多食、小便增多、體重減輕情況，精神狀態(tài)差;益氣活血中藥組灌胃期間癥狀有所改善。各組大鼠體重及血糖情況見表1。

2.3 各組大鼠血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)比較 各組大鼠心率比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。與正常對(duì)照組比較，模型組（LVEDP）水平顯著升高（P<0.01），（LV+dp/dt max）、（LV-dp/dt max）水平顯著下降（P<0.01）;與模型組比較，中藥組（LVEDP）顯著下降（P<0.01），LV+dp/dt max水平明顯升高（P<0.05），LV-dp/dt max絕對(duì)值顯著升高（P<0.01），見表2。

3 討論

中醫(yī)古籍中無糖尿病心肌病這一病名，《傷寒論》中提到“消渴，氣上撞心，心中痛熱”，認(rèn)為其具有“消渴”+“心病”的癥狀，命名為“消渴病心病”，陰虛是該病發(fā)病的根本，且貫穿始終，痰濁、瘀血是疾病發(fā)展的產(chǎn)物，分期辯證早期以氣陰兩虛，心脈不和為主，治療上以補(bǔ)氣陰為主，中期發(fā)展為痰瘀互結(jié)，注重祛痰化瘀，進(jìn)一步發(fā)展終致氣血陰陽俱虛，以滋陰溫陽為主[5]。西醫(yī)認(rèn)為DCM是獨(dú)立與高血壓病、冠脈微血管功能障礙、心房顫動(dòng)之外的糖尿病心臟損害，通常以舒張性心力衰竭（Diastolic Heart Failure，DHF）為早期表現(xiàn)，即心肌松弛性減低和僵硬度增大，隨著研究不斷深入，學(xué)者發(fā)現(xiàn)該類患者后期同時(shí)伴隨收縮功能不全，因此重新定義為HFPEF[6-7]。該病目前尚無有效藥物，亦缺乏有效的治療手段，且再住院率很高，高達(dá)1/3的患者因心衰再住院，為了改善這一限制，在明確其發(fā)病機(jī)制的同時(shí)，應(yīng)啟動(dòng)早期診治。

多數(shù)中醫(yī)學(xué)者在中醫(yī)辨證論治思想的指導(dǎo)下，對(duì)HFPEF的治療準(zhǔn)則進(jìn)行探索，認(rèn)為益氣活血是基本治則[8-11]。本次研究中建立了DCM大鼠模型，給予益氣活血中藥灌胃干預(yù)后發(fā)現(xiàn)，模型組大鼠出現(xiàn)LVEDP顯著上升，LV+dp/dt max水平及LV-dp/dt max絕對(duì)值明顯降低。中藥組上述指標(biāo)較模型組有所改善，各項(xiàng)心功能指標(biāo)有所恢復(fù)，提示益氣活血中藥可改善糖尿病致射血分?jǐn)?shù)保留心力衰竭大鼠心功能，有效延緩心衰的發(fā)展進(jìn)程，甚至抑制心衰的發(fā)生，是治療HFPEF的挑戰(zhàn)與機(jī)遇，有待于進(jìn)一步完善研究，證實(shí)益氣活血中藥對(duì)糖尿病心肌病致射血分?jǐn)?shù)保留心衰大鼠心功能的影響。

近年來，雖然不少研究表明，口服中藥聯(lián)合西醫(yī)常規(guī)治療在改善DHF患者舒張功能指標(biāo)、癥狀體征、運(yùn)動(dòng)耐力以及提高患者生活質(zhì)量等方面優(yōu)于單用西醫(yī)治療，并且口服中藥安全性較好[12]，但受納入試驗(yàn)數(shù)量和質(zhì)量限制，尚不能對(duì)口服中藥治療DHF的效果和安全性做出最終的結(jié)論。目前針對(duì)糖尿病心肌病的組方研究仍較少。本研究觀察到益氣活血中藥對(duì)糖尿病心肌病大鼠舒張功能有一定改善作用，為探索中藥早期干預(yù)糖尿病導(dǎo)致心功能不全提供一定理論基礎(chǔ)和臨床思路。未來應(yīng)繼續(xù)開展口服中藥治療糖尿病射血分?jǐn)?shù)保留心力衰竭機(jī)制的隨機(jī)對(duì)照臨床試驗(yàn)，優(yōu)化方案。

參考文獻(xiàn)：

[1]王好.心肌細(xì)胞促進(jìn)成纖維細(xì)胞膠原蛋白表達(dá)在糖尿病心肌病發(fā)生中的作用及分子機(jī)制[D].鎮(zhèn)江：江蘇大學(xué)，2016.

[2]張捷平，陳雪花，余文珍，等.滋陰益氣活血泄?jié)岱▽?duì)db/db小鼠糖代謝的影響[J].海峽藥學(xué)，2016，28（9）：22-25.

[3]徐紅格，冷玉萍.益氣養(yǎng)陰活血法對(duì)2型糖尿病合并急性腦梗死患者糖代謝指標(biāo)，血管內(nèi)皮功能及神經(jīng)功能缺損的影響[J].現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志，2016，25（15）：1637-1639.

[4]張燕，盧東杰，亓法英.益氣養(yǎng)陰活血法對(duì)2型糖尿病腦梗死患者糖代謝指標(biāo)、血管內(nèi)皮功能及預(yù)后的影響[J].中國地方病防治雜志，2017，32（2）：200-202.

[5]董麗，楊思進(jìn)，白雪，等.芻議“消渴病心病”認(rèn)識(shí)糖尿病心肌病[J].天津中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2020，39（1）：122-125.

[6]Statsenko ME，Turkina SV，Shalaeva SS，et al.Impaired cardiac structural and functional parameters in patients with chronic heart failure and diabetic cardiac autonomic neuropathy[J].Ter Arkh，2013，85（10）：23-31.

[7]Rose-Jones LJ，Rommel JJ，Chang PP.Heart Failure with Preserved Ejection Fraction：An Ongoing Enigma[J].Cardiology Clinics，2014，32（1）：151-161.

[8]鄒海東，何英，李勇，等.參麥注射液輔助治療老年舒張性心力衰竭的臨床觀察[J].中國實(shí)用醫(yī)藥，2014，9（10）：131-132.

[9]張穎莉，朱雪梅.益心舒膠囊治療舒張性心力衰竭的臨床觀察[J].中西醫(yī)結(jié)合心腦血管病雜志，2011，9（3）：287-289.

[10]常晟，宮麗鴻.中西醫(yī)結(jié)合治療舒張性心力衰竭臨床療效觀察[J].實(shí)用中西醫(yī)結(jié)合臨床，2014，14（1）：37-38.

[11]楊萍，李華，章永南，等.參附注射液治療舒張性心力衰竭的臨床療效及機(jī)制研究[J].中藥藥理與臨床，2014，30（4）：116-119.

[12]周鹍，逯金金，夏蕓，等.口服中藥對(duì)治療舒張性心力衰竭隨機(jī)對(duì)照試驗(yàn)的系統(tǒng)評(píng)價(jià)[J].中國醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2015，12（28）：67-71.

（收稿日期：2021-04-07）