姜惠心，祁子泰，高修歌,2，郭大偉,2，季輝,2，彭麟,2，江善祥,2*

(1. 南京農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院，江蘇 南京 210095 2. 南京農(nóng)業(yè)大學(xué)獸藥研究評(píng)價(jià)中心，江蘇 南京 210095)

犬乳腺腫瘤(canine mammary tumor，CMT)為寵物臨床中最常見的腫瘤疾病之一，約占雌性犬腫瘤疾病的25%～42%[1]。受年齡、遺傳、環(huán)境污染及飼養(yǎng)習(xí)慣等因素的影響，犬乳腺腫瘤呈現(xiàn)出年輕態(tài)、復(fù)雜化、惡性率高等特征。目前犬乳腺腫瘤的臨床治療以手術(shù)為主，結(jié)合化學(xué)治療可有效降低其復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移率。罹患乳腺腫瘤的多為老齡犬只，手術(shù)風(fēng)險(xiǎn)高且不易完全切除，而化學(xué)治療在犬乳腺腫瘤早期及術(shù)后化療均展示出良好的前景。國(guó)外已批準(zhǔn)馬賽替尼、磷酸托格拉尼等化學(xué)小分子藥物作為寵物臨床的腫瘤藥物，而我國(guó)尚未有寵物專用抗癌藥物的批準(zhǔn)上市，在寵物臨床面臨無(wú)合法合規(guī)抗乳腺腫瘤藥物使用的境地。為加快推進(jìn)寵物臨床急需用藥的研發(fā)進(jìn)程，利用我國(guó)現(xiàn)有醫(yī)藥資源進(jìn)行技術(shù)開發(fā)，更好滿足寵物臨床治療藥物的需求，我國(guó)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部第330號(hào)公告發(fā)布了《人用化學(xué)藥品轉(zhuǎn)寵物用化學(xué)藥品注冊(cè)資料要求》，進(jìn)一步推進(jìn)現(xiàn)有藥物轉(zhuǎn)為寵物用藥的研發(fā)進(jìn)程。加快創(chuàng)制犬用抗乳腺腫瘤藥物，將為滿足寵物臨床抗癌用藥需求，提高患犬生活質(zhì)量和福利，并為促進(jìn)寵物經(jīng)濟(jì)快速發(fā)展提供支撐。

如今，我國(guó)寵物診療已進(jìn)入高質(zhì)量發(fā)展時(shí)期，創(chuàng)新性藥物是寵物產(chǎn)業(yè)健康發(fā)展的急需品和必需品，如何開發(fā)出具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的寵物腫瘤藥物，還應(yīng)重視寵物腫瘤發(fā)病機(jī)制的研究，開發(fā)寵物專用藥物的篩選工具，建立寵物腫瘤疾病研究模型，制訂寵物腫瘤藥物臨床評(píng)價(jià)指南，以及完善寵物腫瘤藥物新藥注冊(cè)與評(píng)審機(jī)制。寵物腫瘤藥物的開發(fā)與應(yīng)用具有廣闊前景，為提高寵物生存質(zhì)量和促進(jìn)寵物經(jīng)濟(jì)發(fā)展提供物質(zhì)基礎(chǔ)，也將為患犬及寵主帶來(lái)新的希望。本文對(duì)國(guó)內(nèi)外報(bào)道的潛在有效抗犬乳腺癌小分子藥物的研究進(jìn)展進(jìn)行綜述，以期為國(guó)內(nèi)抗犬乳腺腫瘤藥物的研發(fā)提供理論參考。

1 犬乳腺腫瘤

1.1 流行病學(xué)

犬為乳腺腫瘤發(fā)病率最高的哺乳動(dòng)物，未絕育雌性犬CMT發(fā)病率為71%，惡性腫瘤占比更是高達(dá)50%[1]，年齡、品種、絕育、飲食以及飼養(yǎng)環(huán)境等多種因素均會(huì)對(duì)其發(fā)病造成影響。CMT多發(fā)于中老年雌犬，其發(fā)病及惡變風(fēng)險(xiǎn)隨年齡增長(zhǎng)呈持續(xù)升高趨勢(shì)。該病高發(fā)于小型犬，貴賓犬、博美犬、蝴蝶犬以及我國(guó)本土的西施犬、京巴等品種發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)均較為突出[2]。絕育情況對(duì)CMT發(fā)病率具有巨大影響，首次發(fā)情前進(jìn)行絕育可將發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)降低至0.5%[3]。

我國(guó)寵物犬CMT發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)較大，主要與我國(guó)犬只年齡分布、品種偏好及絕育普及度相關(guān)。據(jù)2019寵物白皮書統(tǒng)計(jì)，我國(guó)5歲以上寵物犬占比達(dá)40%，老齡犬?dāng)?shù)量呈增長(zhǎng)趨勢(shì)，限于早年寵物保健意識(shí)普及度較低，老齡犬多未進(jìn)行早期絕育。同時(shí)，受法律、風(fēng)俗、居住環(huán)境等因素影響，50%的寵物主選擇飼養(yǎng)小型犬，貴賓犬更是作為最受歡迎的犬種總飼養(yǎng)量占比22.6%。據(jù)常宏建等[4]臨床調(diào)研，我國(guó)部分地區(qū)CMT發(fā)病率可達(dá)40.8%，惡性腫瘤占比接近50%，遠(yuǎn)高于絕育普及率高的發(fā)達(dá)國(guó)家。

目前獸醫(yī)臨床將外科手術(shù)作為CMT的主要治療方式。由于單純的手術(shù)療法難以根除病灶，腫瘤常發(fā)生轉(zhuǎn)移、擴(kuò)散，造成CMT術(shù)后生存期較短，復(fù)發(fā)率高達(dá)58%[5]。同時(shí)，CMT發(fā)病以老年犬為主，大量病例限于臟器機(jī)能難以進(jìn)行手術(shù)。推廣化學(xué)療法可實(shí)現(xiàn)對(duì)外科療法應(yīng)用局限性的有效補(bǔ)充，提高臨床治療的有效性與應(yīng)用性。

1.2 化學(xué)治療

化學(xué)療法(chemotherapy)簡(jiǎn)稱化療，即對(duì)機(jī)體組織內(nèi)病原體所致疾病及腫瘤的化學(xué)藥物治療。腫瘤細(xì)胞增殖能力較強(qiáng)，利用化學(xué)藥物可以通過(guò)多種途徑干擾腫瘤細(xì)胞DNA的復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、翻譯過(guò)程，從而誘導(dǎo)有絲分裂活躍的細(xì)胞凋亡，達(dá)到殺傷腫瘤的目的。臨床上可根據(jù)治療目的進(jìn)行根治性化療(radical chemotherapy, RC)、姑息性化療(palliative chemotherapy, PC)、輔助化療(adjuvant chemotherapy，AC)、節(jié)拍化療(metronomic chemotherapy，MC)等多種治療方案，以緩解癥狀、改善預(yù)后、預(yù)防復(fù)發(fā)以及增強(qiáng)其他療法的治療效果。

臨床治療中通常對(duì)具有復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移風(fēng)險(xiǎn)或體況難以支持手術(shù)的CMT患犬采取化學(xué)療法，常用的化療藥物主要包括烷化劑、鉑類化合物、抗微管蛋白類、抗腫瘤抗生素、抗代謝類藥物、靶向治療藥物及其他藥物。目前研究顯示，寵物腫瘤最常用的烷化劑和鉑類藥物對(duì)CMT療效欠佳[6]，臨床前試驗(yàn)和臨床試驗(yàn)研究已經(jīng)發(fā)掘了諸多具有殺傷犬乳腺腫瘤細(xì)胞藥理學(xué)作用的化合物，為CMT專用藥物的開發(fā)提供了方向。

2 CMT藥物研究進(jìn)展

2.1 常規(guī)藥物

2.1.1 長(zhǎng)春瑞濱

2.1.1.1 藥理性質(zhì)

長(zhǎng)春瑞濱(vinorelbine)為抗微管蛋白類藥物，具有細(xì)胞周期特異性。該類藥物可進(jìn)入腫瘤細(xì)胞內(nèi)與微管蛋白結(jié)合，抑制其聚合為微管，并促使微管解聚，導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞周期停滯于M期，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡。相關(guān)研究表明，長(zhǎng)春瑞濱可通過(guò)抑制腫瘤細(xì)胞遷移、侵襲以及上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)換過(guò)程(epithelial-mesenchymal transition，EMT)以降低其移動(dòng)性，抑制癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移。在人類醫(yī)學(xué)的初步臨床研究中，長(zhǎng)春瑞濱比長(zhǎng)春新堿具有更廣泛的抗腫瘤作用，這可能由于細(xì)胞內(nèi)藥物蓄積量更大和細(xì)胞內(nèi)藥物濃度峰值較高所致[7]。該藥缺乏對(duì)腫瘤組織的選擇性而具有較嚴(yán)重的劑量相關(guān)毒性，臨床常見骨髓抑制和胃腸道反應(yīng)，以中性粒細(xì)胞減少癥、嘔吐等為主要表現(xiàn)。

2.1.1.2 臨床應(yīng)用

長(zhǎng)春瑞濱是目前治療轉(zhuǎn)移性及復(fù)發(fā)性乳腺癌最有效的藥物之一，臨床研究數(shù)據(jù)證實(shí)長(zhǎng)春瑞濱單藥治療乳腺癌的療效為30%～45%，其聯(lián)合用藥方案用于對(duì)蒽環(huán)類藥物耐藥的人晚期乳腺癌的治療有效率可達(dá)40%～70%[8]。在臨床治療中CMT轉(zhuǎn)移率與復(fù)發(fā)率較高，因而該藥在CMT治療中具有巨大潛力。目前，長(zhǎng)春瑞濱已進(jìn)行犬的Ⅰ期與Ⅱ期臨床試驗(yàn)，建議以15 mg/m2的長(zhǎng)春瑞濱作為治療犬乳腺腫瘤的起始劑量，中性粒細(xì)胞減少癥被確定為劑量限制的毒性作用[9]。一項(xiàng)長(zhǎng)達(dá)12年的臨床研究顯示，長(zhǎng)春瑞濱可作為安全且可耐受的化療藥物應(yīng)用，且對(duì)犬肺癌、組織細(xì)胞肉瘤、淋巴瘤、乳腺腫瘤和尿囊過(guò)渡細(xì)胞癌等具有抗腫瘤活性，其獸醫(yī)臨床價(jià)值尚未完全發(fā)揮，在CMT治療中具有廣闊應(yīng)用前景[10]。

2.1.2 紫杉醇

2.1.2.1 藥理性質(zhì)

紫杉醇(paclitaxel)為二萜類生物堿，屬于抗微管蛋白類藥物。該藥可誘導(dǎo)和促進(jìn)微管蛋白聚合，抑制其解聚，穩(wěn)定微管，使腫瘤細(xì)胞有絲分裂周期長(zhǎng)期阻滯于G2/M期而誘導(dǎo)其裂解。該藥最早于1967年由美國(guó)科學(xué)家Wani和Wall從短葉紫杉(taxus brevifolia)中提取，并于1994年被FDA批準(zhǔn)用于治療人轉(zhuǎn)移性乳腺癌。一項(xiàng)體外研究表明，紫杉醇可通過(guò)抑制PI3K/AKT信號(hào)通路和激活MAPK信號(hào)通路，增加犬乳腺癌細(xì)胞內(nèi)固有凋亡，從而抑制腫瘤細(xì)胞增殖[11]。

2.1.2.2 臨床應(yīng)用

由于紫杉醇助溶劑乙醇和聚乙氧基化蓖麻油(cremophor-EL)會(huì)導(dǎo)致犬嚴(yán)重的急性過(guò)敏反應(yīng)，該藥臨床應(yīng)用受到限制。然而，經(jīng)過(guò)劑型改良，美國(guó)食品與藥品管理局(FDA)獸藥中心于2014年批準(zhǔn)了注射用紫杉醇納米制劑(paccal vet?CA-1)用于可切除和不可切除的鱗狀細(xì)胞癌和不可切除的Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ期犬乳腺癌，已在獸醫(yī)臨床治療CMT中廣泛應(yīng)用[12]。根據(jù)紫杉醇在其他物種中的安全性及其不含聚乙二醇化合物的改良配方，紫杉醇納米藥物CA-1已投入研發(fā)并進(jìn)行了Ⅰ/Ⅱ期臨床試驗(yàn)研究，其在犬體內(nèi)的最高耐受量可達(dá)150 mg/m2，快速分布于全身組織，消除半衰期為3 h。歐洲在此試驗(yàn)基礎(chǔ)上開展了單組臨床試驗(yàn)和開放性試驗(yàn)，為期14周，針對(duì)不可切除的二級(jí)或三級(jí)犬乳腺腫瘤的臨床研究表明，試驗(yàn)結(jié)束后，紫杉醇納米藥物最終有效率(7%，P值0.048)和可觀察到的生物學(xué)有效率(23%，P值0.012)均高于洛莫司汀[13]，且毒副作用為一過(guò)性的或臨床可控的反應(yīng)，證實(shí)紫杉醇納米膠束制劑可安全有效治療犬乳腺腫瘤。

2.1.3 多柔比星

2.1.3.1 藥理性質(zhì)

多柔比星(doxorubicin, DOX)，又稱阿霉素(adriamycin, ADM)，屬于蒽環(huán)類抗生素。DOX可插入細(xì)胞DNA雙鏈、抑制DNA解超螺旋拓?fù)洚悩?gòu)酶II，通過(guò)產(chǎn)生超氧基自由基和破壞細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)等機(jī)制起到殺滅腫瘤細(xì)胞的作用。DOX是人類醫(yī)學(xué)臨床中最為有效和常用的化療藥物之一，被視為治療乳腺癌的一線藥物。袁榕[14]證明DOX可通過(guò)激活caspase家族，改變凋亡因子表達(dá)等途徑誘導(dǎo)犬乳腺細(xì)胞凋亡，揭示了DOX在犬乳腺腫瘤治療中的應(yīng)用前景。該藥副作用相對(duì)較多，存在中度的胃腸道和骨髓抑制，并對(duì)犬具有心臟毒性，尤其對(duì)羅威納、大丹、杜賓和拳師有品種傾向性，臨床應(yīng)用中還需注意給予抗過(guò)敏藥物以降低急性過(guò)敏反應(yīng)風(fēng)險(xiǎn)[15]。

2.1.3.2 臨床應(yīng)用

DOX是目前獸醫(yī)臨床應(yīng)用較多的化療藥物之一，可單獨(dú)使用或聯(lián)合其他藥物用于淋巴瘤、白血病、甲狀腺癌、肉瘤等多種犬貓腫瘤的臨床治療。由Kuntz等[16]1998年對(duì)14只犬的臨床研究，DOX與順鉑聯(lián)用治療CMT可顯著改善患犬預(yù)后情況，未接受治療的患病犬死亡率為接受化療的3.62倍。Nagamatsu等[17]利用siRNA下調(diào)犬Bcl-2基因的表達(dá)，促進(jìn)犬乳腺癌細(xì)胞凋亡而增加其對(duì)的DOX敏感性，為提高該藥臨床應(yīng)用提供了新的思路。DOX療效卓越，治療方案選擇多樣，在人乳腺腫瘤治療中應(yīng)用廣泛，在CMT治療中也同樣具有較大的推廣價(jià)值。

2.1.4 5-氟尿嘧啶

2.1.4.1 藥理性質(zhì)

5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil，5-FU)于1957年被首次合成，為5號(hào)位氫被氟取代的尿嘧啶類衍生物，在臨床中作為實(shí)體腫瘤首選藥物而廣為應(yīng)用。該藥為胸苷酸合成酶抑制劑，在體內(nèi)代謝后可同胸苷酸合成酶結(jié)合，使腫瘤細(xì)胞因胸苷酸缺陷致死，也可通過(guò)與DNA、RNA結(jié)合干擾合成代謝抑制腫瘤細(xì)胞活性。5-氟尿嘧啶有骨髓、胃腸道和神經(jīng)毒性，臨床可見其誘發(fā)犬貓癲癇，因其口服生物利用率低，通常采用靜脈給藥。

2.1.4.2 臨床應(yīng)用

Karayannopoulou等[18]以5-氟尿嘧啶和環(huán)磷酰胺聯(lián)用對(duì)8只Ⅲ期乳腺腫瘤患犬進(jìn)行術(shù)后輔助化療，其無(wú)病間期和存活時(shí)間相較于單純手術(shù)治療組有顯著提升，表明5-氟尿嘧啶在CMT治療中也具有進(jìn)一步探索的空間。

2.1.5 吡羅昔康

2.1.5.1 藥理性質(zhì)

吡羅昔康屬于非甾體類抗炎藥物(NSAID)，為非選擇性環(huán)氧合酶抑制劑(cyclooxygenase，COX)，最初用于風(fēng)濕及類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的治療。在早期流行病學(xué)研究發(fā)現(xiàn)長(zhǎng)期服用NSAID可預(yù)防實(shí)體腫瘤的發(fā)生，在腫瘤患者的檢測(cè)中也發(fā)現(xiàn)NSAID的作用靶點(diǎn)環(huán)氧合酶-2 (cyclooxygenase-2，COX-2) 在結(jié)腸癌、前列腺癌、肺癌以及乳腺癌等多種腫瘤中均有穩(wěn)定表達(dá), 但在大多數(shù)正常組織中并不存在[19]。吡羅昔康抗癌活性的確切分子機(jī)制尚不明確，目前研究顯示其抗癌途徑主要在于抑制腫瘤血管的生成和腫瘤細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移，以及誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡[20]。該藥口服吸收良好，不良反應(yīng)主要包括胃腸道反應(yīng)、骨髓抑制及肝毒性，一般而言毒性較小。

2.1.5.2 臨床應(yīng)用

Souza等[21]曾對(duì)傳統(tǒng)化療和吡羅昔康的犬炎性乳腺癌(canine inflammatory mammary carcinoma，CIMC)治療效果進(jìn)行比較，在此研究中所有接受吡羅昔康的患犬的臨床狀況和疾病穩(wěn)定性均得到改善，其無(wú)進(jìn)展生存期也顯著高于接受DOX治療的犬只。CIMC在臨床中較為罕見，該腫瘤局部侵襲性高，對(duì)治療反應(yīng)差，推廣吡羅昔康在CIMC中的臨床應(yīng)用可以有效改善患犬預(yù)后及生存質(zhì)量。

2.1.6 去氨加壓素

2.1.6.1 藥理性質(zhì)

去氨加壓素(desmopressin acetate，DDAVP)是一種具止血特性的加壓素肽類似物，于1966年首次合成。因其與血管加壓素化學(xué)結(jié)構(gòu)相近，能夠競(jìng)爭(zhēng)性阻滯加壓素受體，具有降低血壓、減輕心臟負(fù)擔(dān)的作用，還可增加凝血因子Ⅷ的活性，加強(qiáng)凝血效應(yīng)。目前認(rèn)為該藥主要通過(guò)增強(qiáng)止血以及促進(jìn)腫瘤殘留組織的快速包膜而防止乳腺癌細(xì)胞聚集，并避免其在手術(shù)過(guò)程中進(jìn)入脈管系統(tǒng)而實(shí)現(xiàn)抗腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移[22]。

2.1.6.2 臨床應(yīng)用

Hermo等[23]研究表明，圍手術(shù)期給予DDAVP可最小化殘留乳腺癌細(xì)胞的擴(kuò)散和存活，尤其在二級(jí)或三級(jí)癌癥治療中可顯著延長(zhǎng)母犬的無(wú)病生存期和總生存期。DDAVP有極大的潛力成為CMT手術(shù)輔助治療候選藥物，在手術(shù)治療作為CMT首選療法而術(shù)后轉(zhuǎn)移率居高不下的臨床背景下具有極大的應(yīng)用價(jià)值。

2.1.7 鹽霉素

鹽霉素(salinomycin)為聚醚類離子載體抗生素，可改變細(xì)胞滲透壓，使細(xì)胞獲得去極化而發(fā)生崩解。該藥于1968年首次合成，在獸醫(yī)臨床中廣泛用于雞球蟲病防治。近年研究發(fā)現(xiàn)，鹽霉素可殺滅多種耐藥腫瘤細(xì)胞以及多種腫瘤干細(xì)胞，亦可通過(guò)誘導(dǎo)腫瘤自噬抑制乳腺腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移[24]。杜宏超[25]對(duì)犬乳腺癌細(xì)胞進(jìn)行鹽霉素體內(nèi)體外試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)其可阻礙犬乳腺癌細(xì)胞的增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移，對(duì)犬乳腺癌干細(xì)胞的癌干細(xì)胞特性亦具有抑制作用，其抗癌活性可能與細(xì)胞周期阻滯、細(xì)胞凋亡及Wnt-catenin信號(hào)通路下調(diào)相關(guān)。鹽霉素作為成熟應(yīng)用于家禽養(yǎng)殖業(yè)的抗生素，價(jià)格低廉，副作用較少，投入CMT治療具有重大優(yōu)勢(shì)。

2.2 靶向治療藥物

近年來(lái)酪氨酸激酶抑制劑(tyrosine kinase inhibitors，TKI) 因在惡性腫瘤靶向治療中成效卓越、耐受性良好而受到人醫(yī)臨床研究的廣泛關(guān)注，獸醫(yī)領(lǐng)域也開始酪氨酸激酶靶向療法也被用于犬貓惡性腫瘤治療。該類藥物在細(xì)胞水平上與致癌位點(diǎn)特異性結(jié)合，抑制酪氨酸激酶受體家族，可避免損傷正常組織細(xì)胞，具有療效顯著，復(fù)發(fā)率低，副作用小等諸多優(yōu)勢(shì)。

2.2.1 磷酸妥拉尼布

磷酸妥拉尼布(toceranib phosphate)為受體酪氨酸激酶抑制劑(receptor tyrosine kinases inhibitor, RTKI)，商品名為帕拉丁，是目前獸醫(yī)臨床中應(yīng)用最廣泛的TKI藥物。該藥可作用于細(xì)胞表面的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體(vascular endothelial growth factor, VEGFR)、血小板衍生生長(zhǎng)因子受體 (platelet-derived growth factor receptors, PDGFR)、干細(xì)胞因子受體(stem cell factor receptor, SCFR)、集落刺激因子-1(colony stimulating factor-1 receptor, CSF-1)、FMS樣酪氨酸激酶3(FMS like tyrosinekinase 3, Flt-3)等一系列酪氨酸激酶，通過(guò)殺滅腫瘤細(xì)胞及切斷腫瘤血液供應(yīng)實(shí)現(xiàn)抗腫瘤活性[26]。磷酸妥拉尼布的安全性與有效性經(jīng)過(guò)了臨床驗(yàn)證，在接受觀察的16只癌癥患犬的總有效率達(dá)到28%。后續(xù)試驗(yàn)中該藥相較于安慰劑極大縮短了腫瘤進(jìn)展時(shí)間(time to tumor progression，TTP)，其副作用主要包括腹瀉、食欲減退、跛行、體重減輕及便血[27]。磷酸妥拉尼布口服制劑(palladia?; Zoetis, Madison, NJ)于2009年被FDA批準(zhǔn)用于治療復(fù)發(fā)性、不可重復(fù)的二級(jí)和三級(jí)犬肥大細(xì)胞瘤(canine mast cell tumor，CMCT)，成為世界上第一種專門用于治療犬類癌癥的藥物。該藥的療效與耐受性經(jīng)長(zhǎng)期臨床使用得到驗(yàn)證，在犬乳脈癌治療中具有潛在的應(yīng)用價(jià)值。

2.2.2 伊馬替尼

伊馬替尼(imatinib)為目前獸醫(yī)臨床應(yīng)用最為成功的TKI藥物，其作用靶點(diǎn)包括Kit、Abl和PDGFR。最初該藥被設(shè)計(jì)用于阻斷慢性髓系白血病患者體內(nèi)的酪氨酸激酶BCR-ABL融合基因，臨床實(shí)驗(yàn)中對(duì)慢性髓系白血病患者緩解率接近95%[28]。在一項(xiàng)21只MCT患犬的臨床試驗(yàn)中，48%的患犬(10只)在接受兩周治療后出現(xiàn)了完全緩解(completeresponse, CR)或部分緩解(partialresponse, PR)，使用該藥可能誘發(fā)部分犬的肝毒性。甲磺酸伊馬替尼口服制劑Gleevec(imatinib mesylate, Novartis, Basel, Switzerland)已被批準(zhǔn)用于犬貓肥大細(xì)胞瘤(MCT)及肉瘤的治療，在犬貓腫瘤化療中得到廣泛應(yīng)用。張?jiān)翻嚨萚29]將多烯紫杉醇與甲磺酸伊馬替尼聯(lián)合應(yīng)用人乳腺癌細(xì)胞株MCF-7裸鼠皮下移植瘤模型，提高了多烯紫杉醇抑瘤活性。表明其有潛力作為乳腺癌輔助治療藥物，在CMT治療中具有潛在價(jià)值。

2.2.3 馬賽替尼

馬賽替尼(masitinib)可影響肥大細(xì)胞的增殖、分化和脫顆粒以及其相關(guān)介質(zhì)的釋放，并通過(guò)抑制MCs c-KitR抗血管生成途徑而抑制腫瘤生長(zhǎng)。獸用馬賽替尼(masivet?)是首個(gè)獲歐盟批準(zhǔn)用于治療無(wú)法切除的CMCT的抗癌藥物，Hahn等[30]曾對(duì)肥大細(xì)胞瘤患犬進(jìn)行馬賽替尼臨床Ⅲ期試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)該藥可顯著提高患犬生存率，且具有可靠安全性。馬賽替尼曾被證明可作為化學(xué)增敏劑增強(qiáng)吉西他濱在人胰腺癌中的抗增殖作用[31]。Thamm[32]對(duì)犬乳腺癌細(xì)胞系進(jìn)行馬賽替尼與其他化療藥物的聯(lián)合試驗(yàn)，亦發(fā)現(xiàn)該藥可誘導(dǎo)長(zhǎng)春堿和吉西他濱產(chǎn)生強(qiáng)致敏作用，增強(qiáng)其抑制犬乳腺癌細(xì)胞的能力。馬賽替尼還可同其他化療藥物產(chǎn)生協(xié)同作用，以減弱不良反應(yīng)，增強(qiáng)藥效，極其適用于犬乳腺癌治療。馬賽替尼在犬乳腺癌中的推廣可有效促進(jìn)寵物腫瘤靶向治療的發(fā)展。

2.2.4 CDK4/6抑制劑

細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶4和6(cyclin-dependent kinase 4/6，CDK4/6)抑制劑是目前最受關(guān)注的針對(duì)人激素受體陽(yáng)性(HR+)轉(zhuǎn)移性乳腺癌的藥物。CDK4/6抑制劑為細(xì)胞周期機(jī)制以及細(xì)胞增殖的關(guān)鍵調(diào)節(jié)劑，由于細(xì)胞周期失調(diào)導(dǎo)致的細(xì)胞增殖失控是癌癥的標(biāo)志， CDK抑制劑被測(cè)試為潛在的治療劑。CDK4/6抑制劑可通過(guò)選擇性抑制CDK4/6，恢復(fù)細(xì)胞周期控制，阻斷腫瘤細(xì)胞增殖[33]。在人醫(yī)臨床中CDK4/6抑制劑palbociclib、ribociclib和abemaciclib被作為突破性的乳腺癌治療藥物投入了臨床試驗(yàn)，結(jié)果顯示其可顯著改善HR+轉(zhuǎn)移性乳腺癌的無(wú)進(jìn)展生存期。目前已有palbociclib(PD0332991，ibrance)、ribociclib(LEE011，KISQALI)以及abemaciclib(LY2835219，Verzenio)3個(gè)CDK4/6抑制劑獲得FDA批準(zhǔn)先后上市，中國(guó)FDA也已批準(zhǔn)了abemaciclib聯(lián)合芳香化酶抑制劑用于絕經(jīng)后HR+/HER2-局部晚期或轉(zhuǎn)移性乳腺癌患者的一線治療。但CDK4/6抑制劑在研究中存在腫瘤耐藥問題，其耐藥機(jī)制復(fù)雜多樣，主要包括細(xì)胞周期特異性機(jī)制及細(xì)胞周期非特異性機(jī)制[34]。

不論組織類型或等級(jí)，在CMT細(xì)胞中均可檢測(cè)到CDK6，提示CDK4/6抑制劑具有潛在CMT治療價(jià)值。Schoos等[35]采用palbociclib處理具有內(nèi)源性CDK4/6共表達(dá)的兩種CMT細(xì)胞系P114和CF41細(xì)胞，可誘導(dǎo)細(xì)胞周期停滯，并抑制細(xì)胞遷移活性，進(jìn)一步揭示了該類藥物在CMT治療中的應(yīng)用前景。針對(duì)CDK4/6抑制劑的臨床試驗(yàn)有待開展，如體內(nèi)試驗(yàn)取得良好結(jié)果，該藥將為CMT靶向療法開辟新的方向。

對(duì)以上抗犬乳腺腫瘤藥物進(jìn)行歸納，詳見表1。

表1 潛在抗犬乳腺腫瘤藥物

2.3 其他藥物

目前在常規(guī)化療藥物之外，仍有大量其他類型藥物有望用于CMT的輔助治療。卵巢激素的暴露為CMT發(fā)病的重要風(fēng)險(xiǎn)因素之一，孕激素誘導(dǎo)犬乳腺合成生長(zhǎng)激素(GH)與生長(zhǎng)激素受體(GHR)表達(dá)的過(guò)程可能會(huì)促使CMT發(fā)生，利用激素調(diào)控類藥物可降低雌性激素對(duì)犬乳腺癌細(xì)胞的刺激，有助于增強(qiáng)其他藥物的治療效果。他莫昔芬(tamoxifen，TAM)為雌二醇受體拮抗劑，可同乳腺細(xì)胞雌激素受體(ER)競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合，作為最常用的選擇性ER調(diào)節(jié)劑用于人類乳腺癌患者內(nèi)分泌治療，目前已投入CMT臨床前試驗(yàn)，同類藥物的研發(fā)為今后犬乳腺腫瘤的激素輔助治療開拓了更多可能[36]。血糖調(diào)節(jié)藥物二甲雙胍[37]和解熱鎮(zhèn)痛藥物阿司匹林[38]在體外增殖試驗(yàn)中對(duì)犬乳腺癌細(xì)胞有一定抑制作用，亦為CMT的治療提供了新的方向。

3 展望

相較于美國(guó)等發(fā)達(dá)國(guó)家，我國(guó)犬只絕育率較低導(dǎo)致我國(guó)犬乳腺腫瘤發(fā)病率較高，當(dāng)前國(guó)內(nèi)寵物的老齡化趨向也促使發(fā)病率、惡變率呈上升態(tài)勢(shì)。臨床數(shù)據(jù)顯示，歐美國(guó)家成年犬的首要死亡原因?yàn)槟[瘤疾病[39]。因此，寵物犬的腫瘤疾病的防治是當(dāng)今寵物臨床醫(yī)學(xué)發(fā)展中的重要方向之一，發(fā)掘潛在抗腫瘤化合物并將其開發(fā)為臨床有效的抗腫瘤藥物是當(dāng)下寵物藥物研發(fā)的熱點(diǎn)和難點(diǎn)。隨著我國(guó)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部相繼出臺(tái)諸多促進(jìn)寵物經(jīng)濟(jì)發(fā)展的利好政策，加之寵物臨床醫(yī)學(xué)的快速高質(zhì)量發(fā)展，開發(fā)出寵物專用抗腫瘤藥物是解決寵物臨床診療藥物短缺的重要途徑。

為解決寵物乳腺腫瘤藥物研發(fā)中的難點(diǎn)，需注意以下幾個(gè)方面。首先，利用現(xiàn)有人類抗乳腺腫瘤藥物資源，篩選具有潛在抗犬乳腺腫瘤活性的小分子化合物，利用化學(xué)結(jié)構(gòu)改造、劑型改良等技術(shù)手段加快其獸醫(yī)臨床轉(zhuǎn)化；第二，基于犬乳腺腫瘤發(fā)病機(jī)制，設(shè)計(jì)篩選新型抗腫瘤活性分子，進(jìn)而推動(dòng)犬乳腺腫瘤專用靶向藥物的研發(fā)；第三，免疫治療在人類腫瘤疾病中顯示出較大優(yōu)勢(shì)，基于腫瘤免疫學(xué)研究進(jìn)展，開發(fā)犬乳腺腫瘤的免疫治療藥物，可提升治療效果降低毒副作用；第四，犬乳腺腫瘤的治療仍需要開發(fā)輔助藥物，如免疫增強(qiáng)劑、激素調(diào)控劑等有助于患犬快速康復(fù)的藥物同樣值得研發(fā)機(jī)構(gòu)重視。