羅靖 顧國龍 馮玉青 劉卓 羅歡

（1.廣西中醫(yī)藥大學(xué)附屬瑞康醫(yī)院檢驗(yàn)科 廣西南寧 530001；2.廣西中醫(yī)藥大學(xué)附屬瑞康醫(yī)院）

1 前言

凝血實(shí)驗(yàn)的檢測主要包括凝血酶時間（TT）、凝血酶原時間（PT）、活化部分凝血活酶時間（APTT）、纖維蛋白原（FIB）這4項(xiàng)水平的檢測[1]。因凝血因子可控制機(jī)體內(nèi)的凝血功能，而機(jī)體的凝血功能由體內(nèi)的抗凝物質(zhì)及纖溶系統(tǒng)進(jìn)行操控，止血功能由機(jī)體內(nèi)的血管及血小板控制。當(dāng)機(jī)體功能不存在異常情況發(fā)生時，凝血、抗凝血及止血功能均呈一種動態(tài)平衡的狀態(tài)；當(dāng)患者有腦梗死、肺栓塞等疾病的發(fā)生時，則提示機(jī)體內(nèi)可能有血栓的形成。因此，TT、PT、APTT、FIB的水平變化在臨床上具有重要的研究意義，可根據(jù)其水平變化判斷患者是否存在凝血功能障礙、止血困難等癥狀，以便在后續(xù)治療中可做好應(yīng)急措施，避免發(fā)生大出血等[2]。

PT是指在血漿中加入鈣離子與組織因子后，凝血酶原轉(zhuǎn)化為凝血酶，導(dǎo)致血漿凝固所需的時間；APTT是在標(biāo)準(zhǔn)時間內(nèi)通過體外接觸因子激活物激活凝血因子XII，以部分凝血活酶替代類脂質(zhì)因子，加入鈣離子后觀察血漿凝固整個過程所需的時間。臨床上可通過檢測PT與APTT對內(nèi)源性凝血因子缺陷進(jìn)行篩檢，對彌散性血管內(nèi)凝血作出診斷等。FIB是在肝臟中合成的一種具有凝血功能的蛋白質(zhì)，在凝血酶的作用下可轉(zhuǎn)變?yōu)槔w維蛋白，進(jìn)而使血液凝固[3]。本文旨在探討凝血實(shí)驗(yàn)檢測結(jié)果的影響因素。

2 資料與方法

2.1 一般資料

回顧性選取2019年6月—2020年6月我院住院部及門診患者50例作為研究對象，男性患者20例，女性患者30例；年齡范圍25～48歲，平均年齡（37.08±4.07）歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：經(jīng)檢查凝血功能均正常者；無任何意識障礙表現(xiàn)者；患者及家屬知情同意并簽署證明文件。排除標(biāo)準(zhǔn)：嚴(yán)重器官功能障礙者；患精神疾病者；中途退出治療或依從性較差者。本研究已經(jīng)醫(yī)學(xué)倫理委員會核準(zhǔn)。

2.2 方法

50例標(biāo)本中，采集量正常40例，異常10例。選取30例采集量正常的凝血標(biāo)本，將其同時處于室溫22℃的環(huán)境下，分別保存1、2、4 h，并于時間到達(dá)后檢測TT、PT、APTT、FIB水平變化。將30例采集量正常標(biāo)本分為2份，1份于3 000 r/min離心15 min；1份于4 000 r/min離心5 min，均于離心后檢測。選取30例采集量正常中溶血（離心后顏色為淺紅色）的凝血標(biāo)本，并重新采集相應(yīng)患者的外周血2 mL（離心后顏色為淺黃色），分別進(jìn)行檢測。

2.3 觀察指標(biāo)

不同保存時間下標(biāo)本凝血實(shí)驗(yàn)的檢測結(jié)果：分別比較1、2、4 h下標(biāo)本的TT、PT、APTT與FIB水平；不同離心時間與速度下標(biāo)本凝血實(shí)驗(yàn)的檢測結(jié)果：分別比較3 000 r/min離心15 min與4 000 r/min離心5 min條件下，標(biāo)本的TT、PT、APTT、FIB水平；溶血與未溶血條件下，標(biāo)本凝血實(shí)驗(yàn)的檢測結(jié)果。

2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)的計(jì)算、統(tǒng)計(jì)與分析，本文所有數(shù)據(jù)均為計(jì)量資料，且計(jì)量資料以（±s）表示，檢驗(yàn)方式則采用t檢驗(yàn)。統(tǒng)計(jì)學(xué)計(jì)算結(jié)果為P＜0.05時表示數(shù)據(jù)存在差異，在統(tǒng)計(jì)學(xué)中有研究意義。

3 結(jié)果

3.1 不同保存時間下標(biāo)本凝血實(shí)驗(yàn)的檢測結(jié)果

即刻與1、2、4 h條件下的PT、FIB水平相比，均無明顯差異（P＞0.05）；與2 h相比，4 h下的TT明顯縮短，APTT明顯延長（P＜0.05），詳見表1。

表1 不同保存時間下標(biāo)本凝血實(shí)驗(yàn)的檢測結(jié)果比較（±s）

表1 不同保存時間下標(biāo)本凝血實(shí)驗(yàn)的檢測結(jié)果比較（±s）

注：與即刻相比，1）P＜0.05；與1 h比，2）P＜0.05；與2 h比，3）P＜0.05。

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3.2 不同離心時間與速度下標(biāo)本凝血實(shí)驗(yàn)的檢測結(jié)果

與3 000 r/min離心15 min相比，4 000 r/min離心5 min條件下的TT、PT、APTT、FIB水平均無明顯差異（P＞0.05），詳見表2。

表2 不同離心時間與速度下標(biāo)本凝血實(shí)驗(yàn)的檢測結(jié)果比較（±s）

表2 不同離心時間與速度下標(biāo)本凝血實(shí)驗(yàn)的檢測結(jié)果比較（±s）

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3.3 溶血與未溶血下標(biāo)本凝血實(shí)驗(yàn)的檢測結(jié)果

與未溶血比，溶血條件下的TT明顯延長，而PT、APTT均明顯縮短（P＜0.05），而兩者的FIB、TT水平均無明顯差異（P＞0.05），詳見表3。

表3 溶血與未溶血下標(biāo)本凝血實(shí)驗(yàn)的檢測結(jié)果比較（±s）

表3 溶血與未溶血下標(biāo)本凝血實(shí)驗(yàn)的檢測結(jié)果比較（±s）

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4 討論

凝血實(shí)驗(yàn)檢測是一種臨床上常見的檢測方式，可用于對各種出血性、血小板等疾病作出輔助性診斷。PT可用于檢測外源性與共同凝血途徑凝血因子的缺乏，包括凝血因子Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ；還可檢測彌散性血管內(nèi)凝血狀況及肝臟的蛋白質(zhì)合成能力；同時也是口服華法林患者首選的監(jiān)測指標(biāo)。APTT可對內(nèi)源性、共同凝血途徑的包括凝血因子Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ、Ⅷ、Ⅸ、Ⅹ、Ⅺ、Ⅻ在內(nèi)的缺乏進(jìn)行檢測，可對凝血因子抑制物進(jìn)行檢測，如狼瘡抗凝物，并且還可用于監(jiān)測肝素抗凝治療、用于身患血友病患者的凝血因子的代替治療等。FIB減少的指標(biāo)可在TT檢測結(jié)果中表示，如患者患有低蛋白血癥、異常纖維蛋白血癥時，TT會延長；纖維蛋白原降解產(chǎn)物的增高也可通過其檢測結(jié)果進(jìn)行反映；也可用于監(jiān)測經(jīng)普通肝素治療時，患者肝素是否增多、類肝素樣抗凝物質(zhì)是否存在，如患腎病、肝病，TT也可出現(xiàn)延長。FIB可用于機(jī)體彌散性血管內(nèi)凝血、原發(fā)性纖溶癥、纖維蛋白原血癥及重癥肝炎等疾病的檢測，當(dāng)機(jī)體患有上述疾病時，F(xiàn)IB含量會明顯減少，另當(dāng)機(jī)體出現(xiàn)糖尿病、心肌梗塞急性發(fā)作、風(fēng)濕性疾病、腎部疾病或經(jīng)放射治療后，F(xiàn)IB含量均可持續(xù)升高[4-5]。

在臨床中，雖有部分患者凝血實(shí)驗(yàn)檢測結(jié)果出現(xiàn)異常，但無出血傾向，故在排除由自身疾病原因?qū)е陆Y(jié)果異常后，應(yīng)首先考慮血液標(biāo)本是否不符合標(biāo)準(zhǔn)而導(dǎo)致檢測結(jié)果出現(xiàn)錯誤。其所涉及的TT、PT、APTT、FIB水平變化易受多種因素的影響，如患者的服藥史、疾病史、精神狀態(tài)、采血檢查前是否為空腹?fàn)顟B(tài)、是否飲酒等，還可因血液標(biāo)本采集時間的不同、運(yùn)輸過程出現(xiàn)的異常狀況、儲存溫度、抗凝劑濃度、采血體積與抗凝劑的比例等因素產(chǎn)生變化，其準(zhǔn)確性會對疾病診斷造成一定影響[6]。對凝血指標(biāo)變化產(chǎn)生影響的因素進(jìn)行分析，在術(shù)前預(yù)測、病情診斷、療效評估等方面均有重要意義[7]。

通過凝血實(shí)驗(yàn)檢測結(jié)果的判斷，可及時了解患者內(nèi)源性凝血系統(tǒng)的具體情況，進(jìn)而可對其機(jī)體的抗凝狀況進(jìn)行監(jiān)測，可反映出抗凝藥物的使用是否發(fā)揮作用。不同的標(biāo)本保存時間對凝血實(shí)驗(yàn)檢測結(jié)果可產(chǎn)生不同程度的影響，在室溫下保存時間過長，會導(dǎo)致部分易發(fā)生變化的凝血因子產(chǎn)生不穩(wěn)定性，逐漸缺乏凝血活性，進(jìn)而對凝固的時間造成影響[8-9]。

溶血是一種紅細(xì)胞膜遭到破壞，使血紅蛋白逸出的現(xiàn)象，可由多種因素導(dǎo)致，在檢驗(yàn)前操作不當(dāng)?shù)葯C(jī)械性外源因素均可影響檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性[10]。本文研究發(fā)現(xiàn)，與2 h相比，4 h條件下的TT明顯縮短，APTT明顯延長；與未溶血相比，溶血下的TT明顯延長，而PT、APTT均明顯縮短，提示不同的保存時間與溶血均可影響凝血試驗(yàn)結(jié)果，與王百茹[11]的研究結(jié)果相符。臨床上可選擇不同的離心時間和速度對標(biāo)本進(jìn)行檢測，不同的離心速度與時間對標(biāo)本的凝血實(shí)驗(yàn)檢測結(jié)果未造成明顯影響，提示在檢測過程中可選擇合適的離心速度并縮短對標(biāo)本的處理時間，進(jìn)而較快取得結(jié)果，與葉琳等[12]的研究結(jié)果基本一致。

綜上所述，室溫下保存時間過長和標(biāo)本溶血均為凝血實(shí)驗(yàn)檢測結(jié)果的影響因素，臨床上可選擇適當(dāng)?shù)臉?biāo)本保存時間、離心速度與時間，并做到操作規(guī)范，以提高凝血實(shí)驗(yàn)檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。