張辰，李斌，鄭沙盟

變應(yīng)性鼻炎是目前我國人群中較為高發(fā)的呼吸系統(tǒng)疾病[1-3]。變應(yīng)性鼻炎是人體接觸特定的變應(yīng)原之后，由體內(nèi)IgE所介導(dǎo)的鼻黏膜非感染性疾病，若干種類的免疫活性細(xì)胞和細(xì)胞因子均參與發(fā)病過程[4-6]。在變應(yīng)性鼻炎患者的發(fā)病早期，及時識別患者的病變嚴(yán)重程度，并采取積極的治療措施，控制癥狀，被認(rèn)為是變應(yīng)性鼻炎的疾病控制準(zhǔn)則[7-8]。近年研究結(jié)果顯示，Th17 和Treg細(xì)胞免疫失衡是導(dǎo)致病變出現(xiàn)的主要原因之一，變應(yīng)性鼻炎患者體內(nèi)出現(xiàn)了Th17 細(xì)胞的過度激活和Treg 細(xì)胞表達(dá)水平的降低或者缺失[9]。本研究探討變應(yīng)性鼻炎患者Th17/Treg 細(xì)胞比例與病情嚴(yán)重程度的相關(guān)性，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 病例納入標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）確診為變應(yīng)性鼻炎，診斷標(biāo)準(zhǔn)參照文獻(xiàn)[10]；（2）年齡＞18 歲，采集標(biāo)本前未接受對結(jié)果可能產(chǎn)生影響的治療；（3）自愿接受本研究方案，簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）有鼻腔外科手術(shù)史；（2）就診7d內(nèi)有呼吸道感染或處于其他急性感染期；（3）合并惡性腫瘤等嚴(yán)重疾病；（4）合并自身免疫性疾病。

1.2 一般資料 收集2017 年1 月至2020 年3 月浙江省中醫(yī)院收治的符合上述標(biāo)準(zhǔn)的變應(yīng)性鼻炎患者177 例為觀察組，另外收集同期進(jìn)行健康體檢者180例為對照組。兩組一般資料差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），見表1。本研究已通過醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會審批。

表1 兩組一般資料比較

1.3 方法

1.3.1 Th17/Treg 細(xì)胞比例檢測 在患者就診后，未接受任何有效干預(yù)前抽取患者晨起空腹肘部外周靜脈血5 ml，采用流式熒光法檢測Th17 及Treg，計算Th17/Treg 細(xì)胞比例。使用Attune NxT流式細(xì)胞儀（上海沫錦醫(yī)療器械有限公司），試劑盒均購自上海邦景實(shí)業(yè)醫(yī)療科技有限公司。

1.3.2 鼻通氣功能檢查 在患者就診后，未接受任何有效干預(yù)前采用NV1 鼻聲反射儀[英國吉姆（GM）公司]進(jìn)行檢測，要求患者在安靜環(huán)境中穩(wěn)定10 min后開始檢測，將探頭放置在患者的鼻孔前，雙側(cè)鼻孔分別測試3 次，取平均值。記錄鼻腔容積、鼻腔最小橫截面積、最小橫截面積與前鼻孔距離及鼻阻力。

1.3.3 血清炎性因子檢測 在患者就診后，未接受任何有效干預(yù)前抽取患者晨起空腹肘部外周靜脈血5 ml，采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測白細(xì)胞介素-4（IL-4）、白細(xì)胞介素-6（IL-6）、白細(xì)胞介素-12（IL-12）及白細(xì)胞介素-31（IL-31）。試劑盒均購自上海邦奕生物科技有限公司。

1.4 統(tǒng)計方法 采用SPSS 24.0 統(tǒng)計軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，采用t 檢驗(yàn)；計數(shù)資料采用檢驗(yàn)；相關(guān)性分析采用Pearson 相關(guān)分析。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組Th17/Treg 細(xì)胞比例水平比較觀察組Th17、Th17/Treg均高于對照組，Treg 低于對照組（均P＜0.05），見表2。

表2 兩組Th17/Treg 細(xì)胞比例水平比較

2.2 兩組鼻通氣功能指標(biāo)比較 觀察組鼻腔容積、鼻腔最小橫截面積、最小橫截面積與前鼻孔距離均低于對照組，鼻阻力高于對照組（均P＜0.05），見表3。

表3 兩組鼻通氣功能指標(biāo)比較

2.3 兩組血清炎性因子水平比較 觀察組IL-4、IL-6、IL-12、IL-31 均高于對照組（均P＜0.05），見表4。

表4 兩組血清炎性因子水平比較

2.4 相關(guān)性分析 Th17、Th17/Treg 與鼻腔容積、鼻腔最小橫截面積及最小橫截面積與前鼻孔距離均呈負(fù)相關(guān)，Treg與鼻阻力、IL-4、IL-6、IL-12 及IL-31 均呈負(fù)相關(guān)（P＜0.05）；Th17、Th17/Treg與鼻阻力、IL-4、IL-6、IL-12、IL-31 均呈正相關(guān)，Treg與鼻腔容積、鼻腔最小橫截面積及最小橫截面積與前鼻孔距離均呈正相關(guān)（均P＜0.05）。見表5。

表5 Th17/Treg 細(xì)胞比例與鼻通氣功能指標(biāo)、血清炎性因子的相關(guān)性分析

3 討論

以往有研究證明Th1/Th2 細(xì)胞的失衡是導(dǎo)致人體發(fā)生變應(yīng)性鼻炎的主要原因之一[11]。而隨著近年研究的持續(xù)深入，部分學(xué)者發(fā)現(xiàn)較為經(jīng)典的Th1/Th2 細(xì)胞失衡學(xué)說沒有辦法將變應(yīng)性鼻炎的發(fā)病機(jī)制完全解釋清楚，而本研究重點(diǎn)分析的Th17/Treg 細(xì)胞可能在變應(yīng)性鼻炎的發(fā)病過程中扮演的角色。Treg 細(xì)胞隸屬于CD4+T 淋巴細(xì)胞群，能夠通過T 細(xì)胞受體所介導(dǎo)的細(xì)胞間作用，對抑制效應(yīng)性T 細(xì)胞的增殖和功能實(shí)現(xiàn)。人體若發(fā)生Treg 細(xì)胞的功能缺陷，可以導(dǎo)致多種疾病的發(fā)生，較為高發(fā)的如惡性腫瘤、變態(tài)反應(yīng)性疾病及自身免疫性疾病等[12]。Th17 細(xì)胞也屬于CD4+T 淋巴細(xì)胞的亞群，其區(qū)別于常見的Th1、Th2 及Treg等，Th17 細(xì)胞所分泌出的細(xì)胞因子IL-17具有強(qiáng)大的中性粒細(xì)胞趨化能力[13]。以往的變應(yīng)性鼻炎動物模型研究結(jié)果顯示，小鼠血清中的IL-17 含量明顯增高[14]。

本研究結(jié)果顯示觀察組Th17 及Th17/Treg比例均高于對照組，而觀察組Treg 低于對照組；這提示變應(yīng)性鼻炎患者Th17 細(xì)胞異常激活，同時Treg 細(xì)胞降低，這說明Th17/Treg細(xì)胞的失衡與變應(yīng)性鼻炎的發(fā)病具有一定的關(guān)聯(lián)。隨著患者病情的進(jìn)展，變應(yīng)性鼻炎患者會逐漸出現(xiàn)鼻部的通氣功能障礙。鼻聲反射技術(shù)是對鼻腔功能進(jìn)行檢測的常用手段之一，借助聲波反射的原理對人體的鼻腔以及鼻咽腔所反射的聲波信號進(jìn)行捕捉，經(jīng)過數(shù)據(jù)回傳及計算處理后，得到鼻腔的橫截面面積及鼻腔體積等參數(shù)[15]。變應(yīng)性鼻炎患者鼻腔黏膜的敏感性明顯增加，經(jīng)過激發(fā)試驗(yàn)之后，能夠使鼻腔容積和橫截面積迅速降低。本研究結(jié)果顯示變應(yīng)性鼻炎患者的各類鼻通氣功能指標(biāo)與健康對照組差異均有統(tǒng)計學(xué)意義，這進(jìn)一步說明變應(yīng)性鼻炎患者的鼻黏膜敏感性顯著提升。相關(guān)分析結(jié)果顯示各類鼻通氣指標(biāo)與Th17、Treg 及Th17/Treg 比例均有相關(guān)性。

變應(yīng)性鼻炎的發(fā)病過程涉及多種炎性細(xì)胞及相應(yīng)的細(xì)胞因子，IL-4 及IL-6是較為典型的人體促炎性反應(yīng)因子，由單核巨噬細(xì)胞分泌，可以誘導(dǎo)中性粒細(xì)胞趨化到鼻黏膜的局部，加重鼻腔內(nèi)的炎性反應(yīng)及臨床癥狀。變應(yīng)性鼻炎患者IL-12表達(dá)水平顯著上升，其能夠誘導(dǎo)CD4+Th細(xì)胞向Th1 細(xì)胞的分化過程。IL-31 是由人體已經(jīng)活化的Th2 細(xì)胞分泌，也是介導(dǎo)患者皮膚瘙癢癥狀及變應(yīng)性鼻炎T細(xì)胞之間的細(xì)胞因子。本研究結(jié)果顯示變應(yīng)性鼻炎患者各類炎性反應(yīng)因子的水平均高于健康體檢者，這說明變應(yīng)性鼻炎患者存在較為明顯的炎性反應(yīng)。而且相關(guān)性分析結(jié)果顯示各類炎性細(xì)胞反應(yīng)因子同Th17、Treg 及Th17/Treg 比例均有相關(guān)性，這提示Th17/Treg 細(xì)胞比例失衡也可能是患者全身或局部炎性反應(yīng)的重要影響因素，也是變應(yīng)性鼻炎患者病情惡化的病理機(jī)制之一。

綜上所述，變應(yīng)性鼻炎患者外周血中Th17/Treg 細(xì)胞免疫紊亂，同時也是變應(yīng)性鼻炎患者出現(xiàn)鼻通氣功能障礙和全身炎癥反應(yīng)的主要原因之一，對于Th17/Treg 細(xì)胞免疫紊亂的研究可能成為治療變應(yīng)性鼻炎新的用藥靶點(diǎn)。