楊春光 劉海紅 王鳳東 劉軍

新生兒敗血癥是新生兒期真菌或細(xì)菌侵入血液中生長(zhǎng)繁殖，生成毒素導(dǎo)致全身感染，為新生兒常見(jiàn)感染性疾病。新生兒免疫系統(tǒng)尚未發(fā)育成熟，病情呈爆發(fā)性進(jìn)展，明顯增加多臟器功能障礙及死亡率［1］。新生兒敗血癥早期癥狀較為隱匿，血培養(yǎng)為診斷金標(biāo)準(zhǔn)，但所需時(shí)間較長(zhǎng)，且血培養(yǎng)也會(huì)受到抗生素影響，影響臨床治療及預(yù)后［2］。降鈣素原（procalcitonin，PCT）是嚴(yán)重細(xì)菌感染的重要指標(biāo)，亦為敗血癥的診斷標(biāo)志物，臨床常根據(jù)PCT指標(biāo)變化情況指導(dǎo)疾病診斷、用藥［3］。高遷移率族蛋白1（high mobility group box，HMGB1）為存在于上皮細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞及免疫細(xì)胞中的DNA 結(jié)合蛋白，參與基因轉(zhuǎn)錄、復(fù)制，在燒傷、創(chuàng)傷、感染刺激下，HMGB1 會(huì)發(fā)生乙?；D(zhuǎn)移至細(xì)胞漿，促進(jìn)炎癥因子釋放，加重病情［4］。粒細(xì)胞/淋巴細(xì)胞（Neutrophil To Lymphocyte Ratio，NLR）與免疫性疾病活動(dòng)性有關(guān)［5］。當(dāng)前已有研究提出PCT、HMGB1在新生兒敗血癥早期診斷中具有一定價(jià)值［6］，但較少研究分析PCT、HMGB1、NLR 對(duì)新生兒敗血癥預(yù)后的預(yù)測(cè)價(jià)值。本研究探討PCT、HMGB1、NLR 對(duì)其預(yù)后的預(yù)測(cè)價(jià)值，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集承德市婦幼保健院2016年9月至2021年3月收治的281 例新生兒敗血癥一般臨床資料（敗血癥組）。 納入標(biāo)準(zhǔn)：符合新生兒敗血癥診斷標(biāo)準(zhǔn)［7］，具有臨床表現(xiàn)且具備以下任一條：非特異性檢查（白細(xì)胞計(jì)數(shù)、不成熟中性粒細(xì)胞、血小板計(jì)數(shù)、C 反應(yīng)蛋白、降鈣素原）在2 條以上顯示陽(yáng)性；血標(biāo)本病原菌抗原或者DNA 檢測(cè)呈陽(yáng)性；腦脊液檢查顯示為化膿性腦膜炎改變。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并先天性代謝遺異常者；②嚴(yán)重先天畸形；③圍產(chǎn)期應(yīng)用抗菌藥物治療者。另選取103 例體同期住院的非敗血癥的一般感染患兒納入對(duì)照組，兩組一般資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性，見(jiàn)表1。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)通過(guò)，受試者監(jiān)護(hù)人均簽署知情同意書。

表1 兩組一般資料比較［n（%），（±s）］Table 1 Comparison of general data between the two groups［n（%），（±s）］

表1 兩組一般資料比較［n（%），（±s）］Table 1 Comparison of general data between the two groups［n（%），（±s）］

組別敗血癥組對(duì)照組χ2/t 值P 值n 281 103性別男149（53.02）55（53.40）0.004 0.948女132（46.98）48（46.60）年齡（h）35.49±3.21 35.48±3.26 0.017 0.986早產(chǎn)兒42（14.95）16（15.53）0.020 0.887足月兒239（85.05）87（84.47）

1.2 治療方法

敗血癥組患兒給予注射用美羅培南（山東羅欣藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn)，國(guó)藥準(zhǔn)字H20163391，0.25 g）+靜注人免疫球蛋白［中科生物制藥股份有限公司生產(chǎn)，國(guó)藥準(zhǔn)字S20023043，（pH4）2.5 g/瓶（5%，50 mL）］，美羅培南20 mg/（kg·次），3 次/天，治療5 天。免疫球蛋白500 mg/（kg·次）共1 次。

1.3 檢測(cè)方法

抽取受試者靜脈血5 mL 于抗凝管中，3 000 r/min 下離心，半徑為19 cm，15 min 離心，采用日本Sysmex 公司提供的血細(xì)胞分析儀（型號(hào)：sysmex XN9000）計(jì)算NLR，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）法檢測(cè)HMGB1、PCT 水平。試劑盒均由上海穎心實(shí)驗(yàn)室設(shè)備有限公司提供，嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書操作。

1.4 預(yù)后

預(yù)后良好：好轉(zhuǎn)且無(wú)后遺癥遺留；預(yù)后不良：死亡、腦積水、視網(wǎng)膜病變、支氣管肺發(fā)育不良。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 20.0 統(tǒng)計(jì)軟件處理數(shù)據(jù)，計(jì)量資料以（）表示，行t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以n（%）表示，行χ2檢驗(yàn)；多因素分析采用Logistic 回歸分析，繪制受試者工作曲線（ROC）得到曲線下面積（AUC），以評(píng)價(jià)NLR、HMGB1、PCT 在新生兒敗血癥預(yù)后中的預(yù)測(cè)價(jià)值，以P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組NLR、HMGB1、PCT 水平比較

敗血癥組患兒NLR、HMGB1、PCT 水平高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表2。

表2 兩組NLR、HMGB1、PCT 水平比較（±s）Table 2 Comparison of NLR，HMGB1 and PCT levels between the two groups（±s）

表2 兩組NLR、HMGB1、PCT 水平比較（±s）Table 2 Comparison of NLR，HMGB1 and PCT levels between the two groups（±s）

組別敗血癥組對(duì)照組t 值P 值n 281 103 NLR 2.65±0.31 1.25±0.13 44.396＜0.001 HMGB1（ng/mL）7.52±1.17 3.53±0.46 33.647＜0.001 PCT（μg/L）12.56±1.57 0.65±0.09 89.790＜0.001

2.2 不同預(yù)后敗血癥患兒基線資料比較

281 例新生兒敗血癥根據(jù)不同預(yù)后結(jié)果分為預(yù)后良好組245 例及預(yù)后不良組36 例。兩組性別、體重、胎齡、發(fā)病日期比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），但兩組抗生素使用時(shí)間、呼吸機(jī)使用率、NLR、HMGB1、PCT、WBC、CRP 比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表3。

表3 不同預(yù)后敗血癥患兒基線資料及治療前相關(guān)血清指標(biāo)比較［n（%），（±s）］Table 3 Comparison of baseline data and related serum indexes before treatment between sepsis neonates with different prognosis［n（%），（±s）］

表3 不同預(yù)后敗血癥患兒基線資料及治療前相關(guān)血清指標(biāo)比較［n（%），（±s）］Table 3 Comparison of baseline data and related serum indexes before treatment between sepsis neonates with different prognosis［n（%），（±s）］

組別性別（男/女）體重（g）胎齡（周）發(fā)病日期（d）抗生素使用時(shí)間（d）呼吸機(jī)使用率（%）NLR HMGB1（ng/mL）PCT（μg/L）WBC（×109/L）CRP（mg/L）預(yù)后不良組（n=36）17/19 3256±341 38.51±1.19 1.02±0.08 4.06±1.03 12（33.33）4.15±0.41 10.31±1.17 16.17±1.22 14.69±1.56 35.26±4.59預(yù)后良好組（n=245）115/130 3265±354 38.53±1.21 1.03±0.07 9.33±1.01 36（14.69）2.43±0.25 7.11±1.09 12.03±1.33 8.25±2.11 12.52±5.37 χ2/t 值0.001 0.143 0.093 0.785 29.160 7.699 35.013 16.293 17.615 17.608 24.136 P 值0.975 0.886 0.926 0.433＜0.001 0.006＜0.001＜0.001＜0.001＜0.001＜0.001

2.3 影響敗血癥患兒預(yù)后的相關(guān)因素分析

NLR、HMGB1、PCT 是影響敗血癥患兒預(yù)后的獨(dú)立危險(xiǎn)因素（P＜0.05）。見(jiàn)表4。

表4 影響敗血癥患兒預(yù)后的相關(guān)因素分析Table 4 Analysis of related prognostic factors of neonatal sepsis

2.4 治療前NLR、HMGB1、PCT 水平對(duì)預(yù)后預(yù)測(cè)價(jià)值

聯(lián)合NLR、HMGB1、PCT 預(yù)測(cè)敗血癥患兒不良預(yù)后AUC 為0.921，顯著高于單一指標(biāo)預(yù)測(cè)價(jià)值（P＜0.05）。見(jiàn)表5、圖1。

表5 治療前NLR、HMGB1、PCT 水平對(duì)預(yù)后預(yù)測(cè)價(jià)值Table 5 Prognostic value of NLR，HMGB1 and PCT levels before treatment

圖1 NLR、HMGB1、PCT 水平對(duì)預(yù)后預(yù)測(cè)價(jià)值Figure 1 Prognostic value of NLR，HMGB1 and PCT levels

3 討論

新生兒敗血癥臨床表現(xiàn)復(fù)雜，超低體重及極低體重患兒早期癥狀并不明顯，極易導(dǎo)致漏診、誤診，增加臨床治療難度［8］。傳統(tǒng)血培養(yǎng)技術(shù)存在諸多不足，因此尋找科學(xué)有效的手段實(shí)現(xiàn)早期病情確診及預(yù)后評(píng)估是臨床研究重點(diǎn)。為評(píng)估敗血癥患兒預(yù)后，需選擇簡(jiǎn)單有效的預(yù)測(cè)指標(biāo)［9］。NLR為早期炎性感染測(cè)定指標(biāo)，在部分腫瘤預(yù)后預(yù)測(cè)中具有一定應(yīng)用價(jià)值；HMGB1 參與敗血癥的病理進(jìn)展；PCT 為常規(guī)感染指標(biāo)。本研究探討此三項(xiàng)指標(biāo)對(duì)敗血癥患兒預(yù)后的預(yù)測(cè)價(jià)值，旨在為改善預(yù)后提供客觀依據(jù)。

本研究發(fā)現(xiàn)敗血癥組患兒NLR、HMGB1、PCT水平均顯著高于對(duì)照組，提示以上指標(biāo)可為新生兒敗血癥早期鑒別診斷提供有效依據(jù)。NLR 為中性粒細(xì)胞與淋巴細(xì)胞比值，中性粒細(xì)胞在機(jī)體早期感染中發(fā)揮重要作用［10］。NLR 是監(jiān)測(cè)機(jī)體感染病原體的敏感性指標(biāo)，在機(jī)體感染后呈升高趨勢(shì)，且與疾病嚴(yán)重程度相關(guān)［11］。HMGB1 定位于細(xì)胞質(zhì)及細(xì)胞核中，通過(guò)與RAGE 及TLR4 受體結(jié)合，參與免疫反應(yīng)、炎癥反應(yīng)及細(xì)胞生物學(xué)行為多種病理過(guò)程［12］。PCT 為免疫調(diào)節(jié)蛋白，在正常情況下含量較低，而內(nèi)毒素及炎癥因子誘導(dǎo)細(xì)菌感染后，機(jī)體中PCT 則在2～6 h 快速升高，在12～48 h 內(nèi)出現(xiàn)峰值，較常規(guī)炎癥指標(biāo)更能早期反映機(jī)體炎癥水平，且隨著疾病的發(fā)展，PCT 濃度呈升高趨勢(shì)［13］。

張瑾等［14］研究顯示，新生兒敗血癥中死亡組PCT 明顯高于存活組，PCT 在新生兒敗血癥的病情嚴(yán)重程度及預(yù)后中具有較高價(jià)值。陳潔等［15］研究顯示，NLR 在預(yù)測(cè)膿毒癥患者預(yù)后狀況中具有重要價(jià)值。鄧永紅等［16］研究提出，新生兒敗血癥者HMGB1 明顯高于非敗血癥者，HMGB1 與新生兒敗血癥的發(fā)生密切相關(guān)。以上研究均提示NLR、HMGB1、PCT 在新生兒敗血癥中具有一定研究意義。本研究亦發(fā)現(xiàn)NLR、HMGB1、PCT 是影響敗血癥患兒預(yù)后的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，提示以上指標(biāo)與新生兒敗血癥預(yù)后密切相關(guān)。研究顯示，在感染性疾病中NLR 呈明顯升高趨勢(shì)，在敗血癥患者中，NLR 檢測(cè)敏感度明顯高于中性粒細(xì)胞，被認(rèn)為是能快速反映機(jī)體炎癥及免疫狀態(tài)的指標(biāo)［17］。敗血癥患兒免疫功能明顯紊亂，會(huì)激活中性粒細(xì)胞，損傷機(jī)體各個(gè)器官、細(xì)胞，誘發(fā)多器官功能失衡；淋巴細(xì)胞的降低則會(huì)影響機(jī)體特異性免疫反應(yīng)，加重感染，而中性粒細(xì)胞與淋巴細(xì)胞比值NLR 隨之升高，加重疾病進(jìn)展［18］。HMGB1 可與機(jī)體中相關(guān)受體結(jié)合，激活血管內(nèi)皮細(xì)胞或免疫細(xì)胞，產(chǎn)生炎性細(xì)胞因子，加重機(jī)體炎癥反應(yīng)，進(jìn)一步加重感染風(fēng)險(xiǎn)［19］。PCT 為敗血癥診斷標(biāo)志性指標(biāo)，其含量與細(xì)菌內(nèi)毒素、炎性細(xì)胞因子密切相關(guān)，在機(jī)體被致病菌感染、器官衰竭或出現(xiàn)膿毒癥時(shí)，可從組織釋放，在體內(nèi)具有較強(qiáng)的穩(wěn)定性，且半衰期長(zhǎng)，可作為預(yù)測(cè)敗血癥預(yù)后的有效指標(biāo)［20］。因此針對(duì)NLR、HMGB1、PCT 水平升高者應(yīng)給予針對(duì)性干預(yù)，改善新生兒預(yù)后。另外本研究中還發(fā)現(xiàn)，聯(lián)合NLR、HMGB1、PCT 預(yù)測(cè)敗血癥患兒效能顯著高于單一指標(biāo)，提示臨床可通過(guò)聯(lián)合監(jiān)測(cè)以上指標(biāo)以提高整體效能。

綜上所述，NLR、HMGB1、PCT 在新生兒敗血癥預(yù)后預(yù)測(cè)中體現(xiàn)出較高價(jià)值，值得在臨床推廣應(yīng)用。