侯傳名，蔣無(wú)硯，朱春燕，金藝鵬，劉 波，朱怡平，李 靖

(1.中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院，北京 海淀 100193 ； 2. 上海市農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全中心，上海 青浦 201708)

我國(guó)養(yǎng)驢歷史悠久，目前國(guó)內(nèi)驢的存欄量約268萬(wàn)頭，世界排名第六。近年來(lái)，養(yǎng)驢產(chǎn)業(yè)逐漸從零散的農(nóng)戶(hù)養(yǎng)殖轉(zhuǎn)變?yōu)橐?guī)?；B(yǎng)殖。牙科疾病是馬屬動(dòng)物的主要口腔疾病，且發(fā)病率很高，常見(jiàn)的牙科疾病包括咬合不正、過(guò)度生長(zhǎng)、乳齒未脫、齒間隙增寬和磨損異常等。一項(xiàng)驢牙科疾病的橫斷面研究顯示，97%的驢存在切齒咬合面向腹側(cè)凸出[1]。Chinkangsadarn等[2]在澳大利亞的馬牙科疾病調(diào)查中發(fā)現(xiàn)，11～15歲馬的牙病患病率高達(dá)97.5%。牙科疾病常引起口腔疼痛和體重減輕，某些牙科疾病如齒間隙增寬是可引起馬屬動(dòng)物腹痛的風(fēng)險(xiǎn)因素之一[3]。牙科疾病長(zhǎng)期存在會(huì)導(dǎo)致動(dòng)物發(fā)生營(yíng)養(yǎng)不良、消瘦、不能使役甚至淘汰，不僅損害動(dòng)物福利，也會(huì)對(duì)養(yǎng)殖業(yè)造成較大的經(jīng)濟(jì)損失[4]。

我們認(rèn)為糞便纖維長(zhǎng)度(Fecal fiber length，F(xiàn)FL)有可能作為監(jiān)測(cè)驢口腔健康的非侵入性檢查手段，并可能用以評(píng)估馬屬動(dòng)物的牙科疾病治療效果。本試驗(yàn)首先確定不同程度的牙科疾病與驢FFL之間的關(guān)系，進(jìn)而判斷FFL檢測(cè)能否作為監(jiān)測(cè)驢口腔健康的方法 ； 其次探究牙科治療是否會(huì)改變驢的糞便纖維長(zhǎng)度，從而判斷牙科治療對(duì)驢飼料消化的影響。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物 2019年10月在大連地區(qū)農(nóng)戶(hù)養(yǎng)殖的600頭遼西繁殖母驢中選取了59頭。這些驢從未接受過(guò)牙科檢查和牙科治療，其日常主要飼料為機(jī)器切碎的玉米秸稈碎塊，這些碎塊的長(zhǎng)度均為大致3 cm。選取的59頭驢年齡在2～18歲，體況評(píng)分主要集中在3～5(9分制)。

1.2 糞便樣品采集 在牙科檢查和治療前(第0周)采集了59頭樣本驢的糞便。采集前，將驢趕到柱欄中保定確實(shí)，通過(guò)直腸采集糞便。將采集的糞便放入密封塑料袋中保存。進(jìn)行糞便采樣的驢均接受了全面的口腔檢查。首先觀察其頭部骨骼雙側(cè)是否對(duì)稱(chēng)(主要觀察額骨、顴骨、上頜骨、下頜骨和切骨)，然后沖洗口腔以清除口腔中的食物殘?jiān)乐蛊涓蓴_檢查。在仔細(xì)檢查切齒情況后，給驢佩戴常規(guī)開(kāi)口器(Hausmann speculum)，并使用頭燈、牙科鏡、牙科探針以及牙周探針檢查口腔。59頭驢在牙科檢查后均接受了常規(guī)的牙科治療以去除尖銳的齒尖。3周后從59頭驢中隨機(jī)選取14頭，以同樣的方法采取糞便樣本。本試驗(yàn)中涉及的牙科疾病定義如下：(1)局灶性頰齒過(guò)度生長(zhǎng)：即齒鉤，第2前臼齒與第3臼齒的局灶性過(guò)度生長(zhǎng)；(2)潰瘍：黏膜表面組織的局限性缺損、潰爛；(3)齒間隙增寬：齒間間隙的異常增加，有時(shí)有食物纖維嵌塞在齒間隙中；(4)上頜突出：由于頜骨發(fā)育異常，導(dǎo)致上切齒咬合面位于下切齒唇側(cè)；(5)齒折：牙齒的創(chuàng)傷性損傷；(6)中重度牙科疾病：剪狀口、階梯口、波口；(7)剪狀口：頰齒排咬合面角度大于35°，多見(jiàn)于一側(cè)頰齒排，罕見(jiàn)于雙側(cè)頰齒；(8)階梯口：過(guò)度生長(zhǎng)的頰齒，常與缺失的頰齒相對(duì)；(9)波口：頰齒排咬合面呈波浪型外觀。

1.3 糞便纖維長(zhǎng)度測(cè)量 從每個(gè)糞便樣本中隨機(jī)取出5 g加入到裝有500 mL蒸餾水的玻璃燒杯中，輕輕攪拌混合物，將纖維與沉淀物分離。然后將混合物倒入0.5 mm的篩子中以除去0.5 mm以下的纖維與殘?jiān)?，再將剩余的纖維塊鋪在正方形箔片上，并給樣本做標(biāo)記。將盛有糞便纖維的正方形箔片放置于烘箱中，以150 ℃的溫度烘烤2 h。待纖維干燥后，使用1 cm的篩子進(jìn)行篩分。篩分纖維時(shí)，使用軟毛刷來(lái)促進(jìn)纖維分離，但盡可能地動(dòng)作輕柔，以避免纖維長(zhǎng)度的磨損。本試驗(yàn)使用有4個(gè)象限的網(wǎng)格用于挑選糞便纖維。此網(wǎng)格中每個(gè)象限均細(xì)分成64個(gè)小格。將分離好的纖維均勻鋪在網(wǎng)格上，并在每個(gè)象限中隨機(jī)選取1個(gè)小格，從中選取10根糞便纖維(共40根)進(jìn)行測(cè)量。用鑷子將纖維從網(wǎng)格中取出，使用數(shù)字游標(biāo)卡尺進(jìn)行測(cè)量(精度0.01 mm)。

1.4 統(tǒng)計(jì)分析 測(cè)量完糞便纖維長(zhǎng)度后，統(tǒng)計(jì)全部進(jìn)行牙科檢查的59頭驢中患有不同牙科疾病的驢的數(shù)量、百分比、平均數(shù)、方差以及最大值和最小值。對(duì)于進(jìn)行二次采樣的14頭驢的糞便纖維，先用Excel 2010分析FFL的平均數(shù)、標(biāo)準(zhǔn)差、變異系數(shù)、最大值、最小值和四分位點(diǎn)。再使用SPSSAU進(jìn)行配對(duì)t檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 進(jìn)行牙科治療的14頭驢牙科治療前后FFL的變化 如表1所示，對(duì)14頭驢牙科治療前后FFL的平均值進(jìn)行配對(duì)t檢驗(yàn)，結(jié)果顯示治療后的平均FFL為3.96 mm，相比治療前的4.39 mm顯著降低(P<0.01)。

表1 牙科治療前后FFL的對(duì)比及配對(duì)t檢驗(yàn)結(jié)果Table 1 Comparison of FFL before and after dental treatments and the result of paired t-test

2.2 59頭驢牙科疾病與糞便纖維長(zhǎng)度的統(tǒng)計(jì) 統(tǒng)計(jì)全部進(jìn)行牙科檢查的59頭驢中患有不同牙科疾病的驢的數(shù)量、百分比、平均數(shù)、方差以及最大值和最小值。發(fā)現(xiàn)間隙異常(88.1%)、齒鉤(76.3%)和潰瘍(66.1%)占比較大，有不少的驢患有咬合障礙[如上頜突出(32.2%)、波口(18.6%)、階梯口(10.2%)等]、齒折(16.9%)等牙科疾病。驢牙齒異常情況和FFL變化的幅度見(jiàn)表2，因大部分驢患有多種牙科疾病，故出現(xiàn)了不同的牙科疾病對(duì)應(yīng)相同的最大值和最小值的情況。

表2 牙科疾病與糞便纖維長(zhǎng)度的統(tǒng)計(jì)分析Table 2 Statistical analysis of dental disorders and fecal fiber length

2.3 牙科治療對(duì)驢糞便纖維長(zhǎng)度的影響 根據(jù)進(jìn)行牙科檢查的59頭驢牙科疾病的臨床表現(xiàn)，本試驗(yàn)認(rèn)為波口、階梯口、剪狀口為中重度牙科疾病。根據(jù)表3，牙科疾病越嚴(yán)重的驢在治療后糞便纖維長(zhǎng)度的變化值越大(表3)。

表3 14頭驢牙科治療前后FFL的變化Table 3 Changes in FFL of 14 donkeys before and after dental treatment (mm)

3 討論

目前，尚未有我國(guó)驢牙科疾病患病率的相關(guān)調(diào)查，但由于我國(guó)驢養(yǎng)殖業(yè)普遍缺乏獸醫(yī)護(hù)理，可推斷其牙科疾病患病率較高，因此牙科疾病有可能已經(jīng)影響驢的健康，并對(duì)養(yǎng)殖業(yè)造成較大的經(jīng)濟(jì)損失。本試驗(yàn)結(jié)果顯示,FFL在牙科治療前后有顯著差異(P<0.01)，并表明牙科疾病會(huì)引起不同程度的FFL的增加，治療后的FFL會(huì)顯著降低(P<0.01)。牙齒疾病嚴(yán)重程度為中重度的，F(xiàn)FL的改善會(huì)更明顯。也有研究認(rèn)為馬牙科治療不能降低FFL[5-6]，但這些研究使用橡膠球來(lái)促進(jìn)纖維分離，然后進(jìn)行干篩，這可能會(huì)導(dǎo)致糞便纖維的過(guò)度磨損，從而使測(cè)得的FFL不準(zhǔn)確，導(dǎo)致結(jié)果不具有代表性[7-8]。

也有文獻(xiàn)提出，成年溫血馬和懷孕母馬在牙科治療后FFL沒(méi)有得到改善[9-10]。Zwirglmaier等[9]對(duì)9匹溫血馬的研究中，馬進(jìn)食干草、燕麥、大麥和玉米的混合物并接受了牙科治療，其FFL結(jié)果并未體現(xiàn)差異。Carmalt等[10]對(duì)56匹懷孕母馬的分析結(jié)果顯示，母馬喂食不同類(lèi)型的精料和干草，牙科護(hù)理并沒(méi)有顯著改變FFL。其原因可能為碳水化合物(例如淀粉)主要通過(guò)淀粉酶的作用大部分都被消化，因此與以干草為主的飲食相比，富含精料的飲食干物質(zhì)消化率更高。如果在牙科治療前后，沒(méi)有嚴(yán)格控制干草與精料的比例，則可能會(huì)導(dǎo)致結(jié)果差異不明顯[4]。

一項(xiàng)在英國(guó)驢保護(hù)區(qū)進(jìn)行的調(diào)查結(jié)果表明，只有患嚴(yán)重牙科疾病的動(dòng)物在接受牙科治療前后表現(xiàn)出FFL顯著降低[11]。這與本試驗(yàn)的結(jié)果比較符合。根據(jù)英國(guó)馬獸醫(yī)協(xié)會(huì)指南，常規(guī)的牙科治療可以減少牙齒的過(guò)度生長(zhǎng)，去除尖銳的齒尖，恢復(fù)正常咀嚼動(dòng)作，并建立正確的咬合角度[11]。剪狀口、波口、階梯口等中重度牙科疾病對(duì)咀嚼影響很大，在矯正后其咀嚼效率明顯提升，這可能是牙科疾病嚴(yán)重的驢FFL改善明顯的原因。

本試驗(yàn)還證實(shí)，F(xiàn)FL可以反映牙科疾病的嚴(yán)重程度，并驗(yàn)證了牙科治療對(duì)驢飼料消化確實(shí)存在影響。Carmalt等[6]對(duì)17匹馬進(jìn)行的尸檢調(diào)查顯示，糞便顆粒的大小與胃中的食物纖維顆粒長(zhǎng)短沒(méi)有顯著差異，這說(shuō)明隨著食物通過(guò)胃腸道，其最終纖維顆粒長(zhǎng)短并沒(méi)有因消化作用而減少[12]。但如果由于牙齒疼痛或其他口腔疾病引起咀嚼的生物力學(xué)變化，則會(huì)導(dǎo)致咀嚼效率降低，阻礙飼料的研磨，使咀嚼完成后進(jìn)入胃的纖維顆粒的初始長(zhǎng)度增加，進(jìn)而使其消化率降低。

綜上所述，F(xiàn)FL可以作為一種非侵入性的牙齒健康狀況評(píng)估工具，但要獲得準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)需要對(duì)操作人員進(jìn)行簡(jiǎn)單的培訓(xùn)以保證纖維的完整性。另外，F(xiàn)FL與牙齒健康狀況的具體關(guān)聯(lián)還需要更多的研究闡明，從而使操作人員通過(guò)數(shù)據(jù)能快速判斷哪些個(gè)體需要進(jìn)一步的口腔健康檢查和治療。目前，我國(guó)的驢養(yǎng)殖業(yè)由于飼養(yǎng)管理?xiàng)l件有限，普遍不能對(duì)驢進(jìn)行及時(shí)規(guī)范的牙科檢查和護(hù)理。檢測(cè)FFL操作簡(jiǎn)單，無(wú)需專(zhuān)業(yè)人員和設(shè)備，成本低廉，一般驢場(chǎng)均可進(jìn)行本操作，是進(jìn)行驢牙科和消化道健康評(píng)估的簡(jiǎn)易方法。