鄒蓓，葉藝先，鄺慧玲

(佛山市南海區(qū)第六人民醫(yī)院，廣東 佛山 528248)

0 引言

在我國(guó)南方，特別是廣東、廣西、海南等省份，地中海貧血比較多見(jiàn)，屬于溶血性貧血疾病，具有一定的遺傳性，是因?yàn)橹榈鞍谆蛉笔?、突變，?dǎo)致珠蛋白鏈無(wú)法正常合成，從而改變血紅蛋白成分，誘發(fā)慢性貧血。孕婦若是罹患地中海貧血，便會(huì)影響宮內(nèi)胎兒發(fā)育，引起畸形兒，與此同時(shí)，還會(huì)威脅到母嬰安全健康[1]。而且目前，地中海貧血還沒(méi)有有效的治療方法。就優(yōu)生優(yōu)育而言，近些年來(lái)，臨床檢驗(yàn)科、婦產(chǎn)科對(duì)于孕婦地中海貧血篩查工作給予高度關(guān)注?；驒z測(cè)是地中海貧血的“金標(biāo)準(zhǔn)”，雖然準(zhǔn)確率高、效果好，但是價(jià)格昂貴，具有較高的技術(shù)要求，無(wú)法在基層醫(yī)療單位大范圍普及[2]。因此，有必要探索一種高效、安全、低成本的血液學(xué)檢測(cè)手段。在臨床篩查地中海貧血過(guò)程中，MCV、血紅蛋白電泳檢測(cè)比較常見(jiàn)，但是單項(xiàng)指標(biāo)檢測(cè)誤差大，漏診風(fēng)險(xiǎn)較高。故而本研究特此嘗試了聯(lián)合檢測(cè)，希望能夠?yàn)榕R床篩查孕婦地中海貧血工作提供指導(dǎo)。

1 一般資料與方法

1.1 一般資料

選擇對(duì)象為2019 年6 月至2021 年5 月在本院常規(guī)產(chǎn)檢進(jìn)行地中海貧血篩查的1270 例孕婦，年齡21-41 歲，平均(31.1±3.9) 歲；妊娠時(shí)間11-31 周，平均(22.7±3.5) 周。觀察對(duì)象均排除凝血機(jī)制異常或血液系統(tǒng)疾病、孕期大出血、妊娠期伴有嚴(yán)重合并癥(高血壓或糖尿病)和其他嚴(yán)重器質(zhì)性疾病。

1.2 方法

所有觀察對(duì)象均接受我院全套產(chǎn)前檢查，其中包括了血紅蛋白電泳、血常規(guī)和鐵蛋白檢測(cè)。

(1)血紅蛋白電泳檢測(cè)。檢測(cè)當(dāng)日要求孕婦空腹，采集2mL 的EDTA 抗 凝 空 腹 靜 脈 血，使 用 英 國(guó)helena 的V8 全自動(dòng)毛細(xì)管電泳儀及其配套試劑，檢測(cè)孕婦血紅蛋白水平，HbA2 參考范圍2.5%-3.5% 且未出現(xiàn)異常血紅蛋白，如果HbF 范圍超過(guò)2.3%或者是HbA2 范圍超過(guò)3.5%，則視為β地中海貧血；如果出現(xiàn)HbH 帶、HbBart’s 帶或者是HbA2 范圍低于2.5%，則視為α 地中海貧血。

(2)MCV 檢測(cè)。采集2mLEDTA 抗凝空腹靜脈血，采用邁瑞B(yǎng)C-6000 全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀及其配套試劑，根據(jù)說(shuō)明書嚴(yán)格操作。截?cái)嘀禐?0fl，正常范圍82-94fl。

(3)鐵蛋白檢測(cè)。采集3mL 空腹靜脈血3000r/min 離心10 分鐘分離血清，用西門子ADUIA centaur XP 化學(xué)發(fā)光儀及配套試劑檢測(cè)，血清鐵蛋白低于10ng/mL 視為缺鐵性貧血。

(4)此外，對(duì)于篩查可疑陽(yáng)性的孕婦進(jìn)行基因檢測(cè)，采集孕婦4mL 的EDTA 抗凝空腹靜脈血，送廣州金域檢驗(yàn)中心檢測(cè)，通過(guò)反向點(diǎn)雜交和PCR 技術(shù)進(jìn)行基因檢測(cè)，試劑由深圳亞能生物有限公司提供。

1.3 觀察指標(biāo)

統(tǒng) 計(jì) 陽(yáng) 性 篩 查 例 數(shù)，即：MCV＜80f，HbA2＜2.5% 或HbA2＞3.5%和出現(xiàn)異常血紅蛋白帶均判斷為可疑陽(yáng)性。參照地中海貧血基因檢測(cè)結(jié)果，比較缺鐵性貧血與地中海貧血孕婦血紅蛋白電泳、MCV 水平。計(jì)算單項(xiàng)指標(biāo)(單一血紅蛋白電泳、單一MCV)檢測(cè)以及聯(lián)合指標(biāo)(血紅蛋白電泳+MCV)檢測(cè)的特異度、靈敏度、準(zhǔn)確度、陽(yáng)性似然比、陰性似然比。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)處理

統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件以SPSS 22.0 版本為主，進(jìn)一步檢驗(yàn)分析本研究獲得的計(jì)量數(shù)據(jù)以及計(jì)數(shù)信息，其中計(jì)量資料以(±s)形式描述，組間t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以%(率)形式表述，數(shù)據(jù)差異判定結(jié)果以P值描述，以P＜0.05 表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 觀察地中海貧血篩查結(jié)果

本研究1270 例孕婦經(jīng)過(guò)地中海貧血篩查，結(jié)果檢出152例可疑陽(yáng)性者，占比11.97%。經(jīng)基因檢測(cè)，其中70 例α 地中海貧血(46.05%)、34 例β 地中海貧血(22.37%)、α 合并β地貧3 例(2.0%)、7 例為異常血紅蛋白帶。另38 例經(jīng)鐵蛋白檢測(cè)確定為缺鐵性貧血。

2.2 觀察缺鐵性貧血與地中海貧血孕婦血紅蛋白、MCV 水平

α-地貧孕婦與缺鐵貧孕婦比較HbF、HbA 和MCV 水平?jīng)]有差異，HbA2 則顯著低于缺鐵貧孕婦(P＜0.05)；β-地貧和α 合并β 地貧孕婦與缺鐵貧孕婦比較HbF、HbA、HbA2 和MCV 結(jié)果均有顯著差異(P＜0.05)。詳情見(jiàn)表1。

表1 缺鐵性與地中海貧血孕婦血紅蛋白、MCV 對(duì)比

2.3 觀察單項(xiàng)指標(biāo)檢測(cè)效能與聯(lián)合檢測(cè)效能

把1270 例孕婦中篩查出152 例可疑陽(yáng)性者做地貧基因檢測(cè)。單項(xiàng)檢測(cè)和聯(lián)合檢測(cè)與基因檢測(cè)的結(jié)果比較詳見(jiàn)表2；比較單項(xiàng)檢測(cè)和聯(lián)合檢測(cè)的特異度、靈敏度、準(zhǔn)確度、陽(yáng)性似然比，陰性似然比，詳情見(jiàn)表3。

表2 單項(xiàng)檢測(cè)和聯(lián)合檢測(cè)與基因檢測(cè)的結(jié)果比較

表3 單項(xiàng)指標(biāo)檢測(cè)效能與聯(lián)合檢測(cè)效能對(duì)比

3 討論

地中海貧血是一種具有遺傳性的小細(xì)胞低色素性貧血，屬于溶血性貧血疾病。由于中幼紅細(xì)胞原卟啉和鐵的結(jié)合出現(xiàn)障礙，致使MCV 水平較正常健康人低[3]。故而是檢測(cè)MCV 水平，對(duì)于地中海貧血篩查工作具有重大價(jià)值[4]。此次研究發(fā)現(xiàn)，單一MCV 檢測(cè)特異性66.7%、靈敏度86.9%，準(zhǔn)確度80.9%，陽(yáng)性似然比2.60，陰性似然比0.20，其檢測(cè)效能還有待提高。

隨著臨床研究深入，已經(jīng)逐步明確了地中海貧血發(fā)病機(jī)制，主要原因在于珠蛋白基因缺失、突變，珠蛋白肽鏈由鏈、α鏈、β 鏈、鏈組成，都有基因編碼，一旦基因缺失、突變，便會(huì)導(dǎo)致肽鏈無(wú)法正常合成，故而臨床特此根據(jù)肽鏈組成類型，對(duì)地中海貧血進(jìn)行了分型，目前常見(jiàn)α 地中海貧血、β 地中海貧血[5]。其中β 地中海貧血是因?yàn)棣?肽鏈由于珠蛋白基因缺失、突變而合成障礙，人體代償作用狀況下，升高鏈、鏈，并結(jié)合α 鏈，增加HbF 和HbA2 水平[6]。故而臨床上辨別β 地中海貧血時(shí)，通常將HbF 水平、HbA2 水平作為特征性檢測(cè)指標(biāo)[7]。α 地中海貧血是因?yàn)棣?肽鏈減少，使得鏈、β 鏈過(guò)剩，導(dǎo)致血紅蛋白異常，主要表現(xiàn)為HbBar’s、HbH。與正常血紅蛋白相比而言，異常的血紅蛋白能夠通過(guò)電泳分離[8]。但對(duì)于靜止型地中海貧血，血紅蛋白電泳很難作出診斷，容易漏診[9]。此次研究發(fā)現(xiàn)，單一血紅蛋白電泳檢測(cè)特異性71.1%、靈敏度75.7%，準(zhǔn)確度74.3%，陽(yáng)性似然比2.62，陰性似然比0.34，其檢測(cè)效能同樣有待提高。

本研究通過(guò)血紅蛋白電泳、MCV 檢測(cè)，結(jié)果1270 例孕婦中篩查出152 例陽(yáng)性者，占比11.97%。通過(guò)基因檢測(cè)和鐵蛋白檢測(cè)后，發(fā)現(xiàn)70 例α 地中海貧血(46.05%)、34 例β 地中海貧血(22.37%)、α 合并β 地貧3 例(2.0%)、38 例缺鐵性貧血。說(shuō)明孕婦群體中具有一定的地中海貧血發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)，而孕婦在妊娠這個(gè)特殊的生理期對(duì)鐵元素需求量急劇增大，容易出現(xiàn)缺鐵性貧血。α-地貧孕婦HbA2 水平顯著低于缺鐵貧孕婦(P＜0.05)；β-地貧和α 合并β 地貧孕婦與缺鐵貧孕婦比較HbF、HbA、HbA2 和MCV 結(jié)果均有顯著差異(P＜0.05)。而且從數(shù)據(jù)上看，地貧孕婦和缺鐵貧孕婦電泳和MCV 的水平與正常參考值有著明顯的差異。這說(shuō)明不僅地中海貧血孕婦的MCV、血紅蛋白電泳指標(biāo)存在明顯異常情況，缺鐵性貧血孕婦也有可能會(huì)存在異常的MCV 和血紅蛋白電泳指標(biāo)，故而單項(xiàng)指標(biāo)檢測(cè)特異度、靈敏度偏低[10]。參照地中海貧血基因檢測(cè)結(jié)果，聯(lián)合檢測(cè)的檢測(cè)效能明顯比單項(xiàng)指標(biāo)高，而單項(xiàng)指標(biāo)之間檢測(cè)效能并無(wú)太大差異。故聯(lián)合檢測(cè)為臨床準(zhǔn)確篩查地中海貧血孕婦提供了新手段。需提及的是，為了避免漏診，必要時(shí)依然需要進(jìn)行地中?；蛟\斷，以提高臨床篩查準(zhǔn)確性，確保孕婦能得到及時(shí)有效的產(chǎn)前指導(dǎo)[11]。

綜上所述，對(duì)于地中海貧血孕婦篩查工作而言，血紅蛋白電泳與MCV 聯(lián)合檢測(cè)方案值得在現(xiàn)代臨床中廣泛普及，操作簡(jiǎn)單，特異度與靈敏度相對(duì)較高，應(yīng)用前景廣闊。