周昂 王紹闖 朱傳榮 許琦琦 吳金聲

乙型肝炎病毒(hepatitis B virus, HBV)引起的乙型肝炎是一種具有傳染性的疾病，是導(dǎo)致肝臟病變的主要原因，慢性乙肝能夠逐漸發(fā)展為乙肝合并肝硬化，甚至肝衰竭，嚴(yán)重威脅患者的生命安全，研究表明HBV每年導(dǎo)致全球近百萬(wàn)人死亡[1]。流行病學(xué)統(tǒng)計(jì)研究表明，慢性乙肝(chronic hepatitis B, CHB)纖維化的發(fā)病率高達(dá)數(shù)百人/萬(wàn)人[2]。臨床上對(duì)于患者肝炎病情以及肝纖維化程度主要依靠病理學(xué)檢測(cè)，但其對(duì)患者具有創(chuàng)傷大，隨著生物標(biāo)志物的發(fā)展，臨床上逐漸發(fā)現(xiàn)補(bǔ)體C3、C4及IgG水平在肝損傷不同的階段具有一定的變化[3]。故本研究檢測(cè)分析了116例乙型肝炎患者，探討補(bǔ)體C3、C4及血清IgG水平與慢性乙型肝炎肝硬化之間的相關(guān)性，為臨床診斷提供參考依據(jù)。

資料和方法

一、一般資料

選取2018年3月至2019年12月期間在南京醫(yī)科大學(xué)附屬淮安第一醫(yī)院治療的116例慢性乙型肝炎患者為觀察組，116例同期體檢的健康人為對(duì)照組，觀察組患者均行肝臟病理學(xué)檢測(cè)，檢測(cè)血清補(bǔ)體C3、C4以及IgG水平，同時(shí)分析觀察組所有患者C3、C4及IgG水平與肝組織病理學(xué)分級(jí)、分期的相關(guān)性。

觀察組中男性62例，女性54例，平均年齡為(41.28±10.27)歲，病理分級(jí)：G1 40例，G2 42例，G3 30例，G4 4例。對(duì)照組中男性60例，女性56例，平均年齡為(40.22±11.34)歲。本研究經(jīng)醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)后實(shí)施，患者及其家屬了解研究相關(guān)內(nèi)容并簽署知情同意書(shū)。所有患者的資料具有可比性。

納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合有關(guān)慢性乙肝診斷標(biāo)準(zhǔn)；②患者進(jìn)行血清學(xué)檢測(cè)，并且HBsAg呈現(xiàn)陽(yáng)性結(jié)果；③思維清晰、意識(shí)正常，可清楚明確表達(dá)自身感受的患者；④肝纖維化的診斷依據(jù)肝臟超聲以及病理學(xué)檢測(cè)確診。

排除標(biāo)準(zhǔn)：①伴有心、腎、肺功能嚴(yán)重障礙患者；②合并肝癌及先天性免疫系統(tǒng)疾病患者；③患有精神類疾病，無(wú)法有效溝通的患者。

二、研究方法

血清學(xué)指標(biāo)檢測(cè)：所有患者在入組后次日清晨抽取5 mL外周靜脈血，將其放入枸櫞酸鈉抗凝管內(nèi)送檢，以3 000 r/min離心后取上清液。采用全自動(dòng)生化儀器進(jìn)行血清補(bǔ)體C3、C4水平的檢測(cè)(采用免疫比濁法)，試劑盒采自上海北加生化，所有操作均嚴(yán)格按照試劑盒操作指南，補(bǔ)體C3正常范圍為0.9～1.8 g/L，補(bǔ)體C4 正常范圍為 0.1～0.4 g/L。

根據(jù)患者肝纖維化程度進(jìn)行分期：患者肝臟部位未出現(xiàn)明顯肝纖維化病變，為S0期；患者肝臟部位的匯管區(qū)肝纖維化程度加重大，但未形成明顯的纖維間隔，為S1期；患者肝臟部位的匯管區(qū)纖維性擴(kuò)大，為S2期；患者肝臟部位出現(xiàn)多數(shù)的纖維間隔，但是未見(jiàn)明顯肝硬化結(jié)節(jié)，為S3期；患者為肝硬化期，為S4期。

三、觀察指標(biāo)

(1) 比較兩組血清補(bǔ)體C3、C4以及IgG水平。

(2) 比較觀察組不同病理學(xué)分級(jí)患者的血清補(bǔ)體C3、C4以及IgG水平。

(3) 比較觀察組不同肝纖維化分期患者的血清補(bǔ)體C3、C4以及IgG水平。

四、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析，用χ2檢驗(yàn)比較計(jì)數(shù)資料，兩組間比較采用t檢驗(yàn)，多組間比較采用F檢驗(yàn)。P<0.05為有顯著性差異。

結(jié) 果

一、兩組血清補(bǔ)體C3、C4以及IgG水平比較

觀察組的補(bǔ)體C3[(0.84±0.12)g/L]、C4[(0.23±0.05)g/L]水平均低于對(duì)照組[C3:(1.07±0.21)g/L，C4:(0.31±0.06)g/L]，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；觀察組患者的血清IgG[(27.59±6.27)mg/L]水平高于對(duì)照組[(16.81±3.15)mg/L]，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。如表1所示。

表1 兩組血清補(bǔ)體C3、C4以及IgG水平比較[±s]

二、觀察組不同病理學(xué)分級(jí)患者的血清補(bǔ)體C3、C4以及IgG水平比較

觀察組中G2～G4級(jí)炎癥患者的補(bǔ)體C3及C4的水平明顯低于G1級(jí)患者(F=4.142,P<0.05;F=4.142,P<0.05)，觀察組中G3～G4級(jí)炎癥患者的IgG的水平明顯高于G1級(jí)患者(F=8.512,P<0.05)，如表2所示。

表2 不同病理學(xué)分級(jí)患者的血清補(bǔ)體C3、C4以及IgG水平比較[±s]

三、觀察組不同病理學(xué)分級(jí)患者的血清補(bǔ)體C3、C4以及IgG水平比較

觀察組中S2～S4級(jí)炎癥患者的補(bǔ)體C3及C4的水平明顯低于S1級(jí)患者(P<0.05)，觀察組中S2～S4級(jí)炎癥患者的IgG的水平明顯高于S1級(jí)患者(P<0.05)，如表3所示。

表3 觀察組不同病理學(xué)分級(jí)患者的血清補(bǔ)體C3、C4以及IgG水平比較[±s]

四、血清補(bǔ)體C3、C4以及IgG水平與疾病程度的相關(guān)性

采用Spearman進(jìn)行相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)，≥G2和G4分級(jí)與補(bǔ)體C3、C4呈現(xiàn)出負(fù)相關(guān)，與IgG呈現(xiàn)出正相關(guān) (r=0.572,P=0.014;r=0.589,P=0.009)；≥S2和S4分級(jí)與補(bǔ)體C3、C4呈現(xiàn)出負(fù)相關(guān)，與IgG呈現(xiàn)出正相關(guān)(r=0.631,P=0.007;r=0.551,P=0.007)。詳情見(jiàn)表4。

表4 血清補(bǔ)體C3、C4以及IgG水平與疾病程度的相關(guān)性

討 論

CHB肝纖維化的發(fā)生不僅能夠?qū)е禄颊吒闻K功能的減退，同時(shí)還能夠增加心腦血管出血性疾病的發(fā)生，提高患者敗血癥、膿毒血癥等的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)，對(duì)CHB肝纖維化的病情評(píng)估具有重要的意義，其能夠指導(dǎo)臨床上抗纖維化治療和預(yù)后評(píng)估[4-6]。超聲引導(dǎo)下肝臟穿刺組織活檢雖然是CHB肝纖維化診斷的金標(biāo)準(zhǔn)，但其檢查具有明顯的創(chuàng)傷性，耗時(shí)較長(zhǎng)，檢測(cè)周期長(zhǎng)。而血清學(xué)指標(biāo)的研究具有檢測(cè)方便快速的優(yōu)勢(shì)，在CHB患者的病情評(píng)估過(guò)程中發(fā)揮了重要的作用[7]。

補(bǔ)體是一種具有酶活性的糖蛋白，可輔助和補(bǔ)充特異性抗體,介導(dǎo)免疫溶菌、溶血作用，其能夠參與機(jī)體的免疫調(diào)控[8]。當(dāng)機(jī)體受外來(lái)病毒入侵時(shí)，補(bǔ)體的水平會(huì)受到機(jī)體的調(diào)控，從而在血清中的含量發(fā)生變化，能夠被臨床檢測(cè)[9]。通過(guò)補(bǔ)體途徑介導(dǎo)的先天信號(hào)有助于HBV特異性細(xì)胞免疫反應(yīng), Katharina Br?ker等[10]在研究中發(fā)現(xiàn)，加入C3a和C5a后，IFNγ釋放試驗(yàn)的診斷靈敏度大大提高，這表明這些作用使基于全血的細(xì)胞因子釋放試驗(yàn)在HBV免疫學(xué)和HBV疫苗接種研究中作為篩選工具更加有效。

在本研究中，筆者首先對(duì)慢性肝炎患者及健康人進(jìn)行血清C3、C4及IgG的水平測(cè)定并進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)慢性肝炎患者的三者含量均與健康組具有顯著差異，這與董麗娜[11]在140例CHB患者與70例健康志愿者的研究比較中的結(jié)論相一致，即慢性肝炎患者的血清C3、C4及IgG的水平與健康人的水平存在顯著差異。之后筆者對(duì)116例慢性肝炎患者根據(jù)病理學(xué)進(jìn)行分級(jí)比較，發(fā)現(xiàn)觀察組中G2～G4級(jí)炎癥患者的補(bǔ)體C3及C4的水平明顯低于G1級(jí)患者(P<0.05)，觀察組中G3～G4級(jí)炎癥患者的IgG的水平明顯高于G1級(jí)患者(P<0.05)。即觀察組中S2～S4級(jí)炎癥患者的補(bǔ)體C3及C4的水平明顯低于S1級(jí)患者(P<0.05)，觀察組中S2～S4級(jí)炎癥患者的IgG的水平明顯高于S1級(jí)患者(P<0.05)。這表明隨著患者病情的加重，其血清補(bǔ)體C3、C4的水平呈下降趨勢(shì)，而血清IgG呈上升趨勢(shì)。朱書(shū)利[12]在研究180例慢性乙型肝炎患者與80例健康體檢者的血清C3、C4水平差異時(shí)發(fā)現(xiàn)，炎癥分級(jí)和肝纖維化程度高的患者其C3和C4水平明顯低于病情較輕患者。趙俊平[13]在研究中進(jìn)一步表明乙型肝炎患者血清免疫球蛋白和補(bǔ)體C3/C4水平劣于健康人，且肝硬化比慢性肝炎差異更明顯。這些研究結(jié)論均與本文結(jié)論相一致。本文進(jìn)一步通過(guò)相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)，≥G2和G4分級(jí)與補(bǔ)體C3、C4呈現(xiàn)出負(fù)相關(guān)，與IgG呈現(xiàn)出正相關(guān)(P<0.05)；≥S2和S4分級(jí)與補(bǔ)體C3、C4呈現(xiàn)出負(fù)相關(guān)，與IgG呈現(xiàn)出正相關(guān)(P<0.05)。這些結(jié)果進(jìn)一步佐證了前文結(jié)論，即乙肝肝炎患者的病情惡化程度與血清C3、C4水平呈負(fù)相關(guān)，與IgG水平呈正相關(guān)。補(bǔ)體C3、C4 主要由肝臟合成，C3多為肝細(xì)胞合成，C4 為巨噬細(xì)胞合成[14]。研究認(rèn)為，由于補(bǔ)體C3、C4 由不同細(xì)胞合成，在機(jī)體出現(xiàn)HBV 感染后，其血清中的含量會(huì)出現(xiàn)不同程度的減少，血清補(bǔ)體C3 水平下降幅度較大[15]。受限于樣本數(shù)量，本研究?jī)H針對(duì)本院接收的116例患者進(jìn)行研究統(tǒng)計(jì)及分析比較，初步得出上述結(jié)論，仍需進(jìn)一步大型隊(duì)列研究，進(jìn)一步探討慢性乙肝患者的生物標(biāo)志物與病情分級(jí)分期之間的關(guān)聯(lián)性。

綜上所述，通過(guò)檢測(cè)慢性乙肝肝炎患者的血清C3、C4及IgG水平，對(duì)于指導(dǎo)患者的肝組織病理學(xué)級(jí)別以及分期具有一定的指導(dǎo)意義。