徐倩南，姜磊，林源，李莉，劉希玲

1.四川大學基礎醫(yī)學與法醫(yī)學院，四川 成都 610041；2.司法鑒定科學研究院 上海市法醫(yī)學重點實驗室 司法部司法鑒定重點實驗室 上海市司法鑒定專業(yè)技術服務平臺，上海200063

1 案 例

1.1 簡要案情

石某（被檢母）、陳某（被檢父）與孩子（男性，3 周歲）委托本院進行親子鑒定。

1.2 檢驗過程

1.2.1 首次檢驗結(jié)果及分析

按照《法庭科學DNA 實驗室檢驗規(guī)范》（GA/T 383—2014）抽提DNA，采用SiFaSTRTM23 plex 身份鑒定系統(tǒng)（司法鑒定科學研究院）進行復合PCR 擴增，用3130xl基因分析儀（美國Thermo Fisher Scientific 公司）進行毛細管電泳和基因型分析。結(jié)果顯示，D3S1358、D5S818、D2S1338等21 個STR 基因座均為人類的遺傳學標記，遵循孟德爾遺傳定律，聯(lián)合應用進行親權鑒定，累積非父（母）排除率大于0.999 9。

分型圖譜顯示，孩子每個STR 基因座上的等位基因均可由被檢母和被檢父提供。在Amelogenin基因座（圖1），被檢母檢出X 峰，被檢父同時檢出X 峰和Y峰，孩子僅檢出X 峰，缺乏男性樣本應包含的Y 峰，孩子疑似缺失Y 染色體。除STR 基因座外，SiFaSTRTM23 plex 身份鑒定系統(tǒng)還包含一個Y 染色體插入缺失（Y chromosome insertion/deletion，Y-InDel）位點，在此位點被檢母和孩子均未出現(xiàn)分型結(jié)果（圖1），與Amelogenin基因座結(jié)果相符。

圖1 被檢母、孩子和被檢父在Amelogenin 基因座和Y-InDel位點的分型結(jié)果Fig.1 Genotyping results of Amelogenin and Y-InDel for alleged mother，child and alleged father

1.2.2 Y 染色體STR 基因座檢驗結(jié)果及分析

采用AmpF?STRTMYfilerTMPCR 擴增試劑盒（美國Applied Biosystems 公司）進行復合擴增，用3130xl基因分析儀進行毛細管電泳和基因型分析。檢驗結(jié)果顯示，被檢母和孩子無Y 染色體STR 基因座，被檢父則在各個Y 染色體STR 基因座上均有分型結(jié)果，支持首次檢驗中孩子Y 染色體缺失的假設。所得分型結(jié)果如表1 所示。

表1 被檢母、孩子和被檢父血樣Y 染色體STR 分型結(jié)果（AmpF?STRTM YfilerTM PCR 擴增試劑盒）Tab.1 Genotyping results of Y-STR from the blood samples for alleged mother，child and alleged father（AmpF?STRTM YfilerTM PCR Amplification Kit）

1.2.3 X 染色體STR 基因座檢驗結(jié)果及分析

進一步采用Goldeneye?DNA 身份鑒定系統(tǒng)17X［基點認知技術（北京）有限公司］進行復合擴增，用3130xl基因分析儀進行毛細管電泳和基因型分析。檢驗結(jié)果顯示，被檢母和被檢父符合女性樣本和男性樣本X 染色體STR 基因座分型結(jié)果的特征，即女性雜合子樣本顯示2 個等位基因峰，男性樣本則只顯現(xiàn)為1 個等位基因峰[1]。但孩子作為男性樣本卻呈現(xiàn)出了女性雜合子樣本分型結(jié)果的特征，且X 染色體STR 基因座上的等位基因均可由被檢母和被檢父提供。所得分型結(jié)果如表2 所示。

表2 被檢母、孩子和被檢父血樣X 染色體STR 分型結(jié)果（Goldeneye? DNA 身份鑒定系統(tǒng)17X）Tab.2 Genotyping results of X-STR from the blood samples for alleged mother，child and alleged father（Goldeneye? DNA ID 17X）

2 討論

Amelogenin基因座是目前法醫(yī)學常用的用于性別鑒定的基因座，理論上，正常男性個體在Amelogenin基因座上應同時檢出X 峰和Y 峰，本例孩子社會性別為男性，但采用常染色體STR 分型試劑盒SiFaSTRTM23 plex 身份鑒定系統(tǒng)檢測后發(fā)現(xiàn)Amelogenin基因座Y 峰缺失。遇到此種情況時應從多個方面考慮，如引物結(jié)合區(qū)突變導致等位基因擴增失敗、性反轉(zhuǎn)、染色體缺失等[2]?？紤]到Amelogenin基因座區(qū)域偶爾會發(fā)生基因變異或缺失導致Amelogenin基因座峰圖出現(xiàn)異常[1]，故采用AmpF?STRTMYfilerTMPCR 擴增試劑盒對各樣本的Y 染色體STR 基因座進行檢測，以辨別Amelogenin基因座峰圖錯誤，Y 染色體STR 基因座檢驗結(jié)果表明本案孩子Y 染色體缺失。為進一步確認本案例是否為性反轉(zhuǎn)案例，采用Goldeneye?DNA 身份鑒定系統(tǒng)17X 檢測各樣本的X染色體STR 基因座，結(jié)果顯示被檢母和被檢父X 染色體數(shù)目正常，社會性別為男性的孩子擁有2 條X 染色體。綜上所述，推測孩子的染色體核型為（46，XX），符合男性性反轉(zhuǎn)綜合征的遺傳學特征。

性反轉(zhuǎn)綜合征是一種罕見的性發(fā)育障礙。在生殖醫(yī)學、兒科學等領域多有報道[3-5]。1964 年，DELACHAPELLE 等[3]首次發(fā)現(xiàn)男性個體擁有2條X 染色體而缺乏Y染色體的病例。謝家倫等[5]也報道了4例（46，XX）男性性反轉(zhuǎn)綜合征的病例，指出（46，XX）男性大多數(shù)有正常男性外生殖器，早期診斷需根據(jù)具體情況做性染色體檢查及性腺探查活檢。在法醫(yī)學親子鑒定中，性反轉(zhuǎn)案例較少遇到[6-8]。本案例通過聯(lián)合應用常染色體STR、Y染色體STR和X染色體STR 3種生物學遺傳標記確定被檢孩子因存在性反轉(zhuǎn)現(xiàn)象，故常染色體試劑盒檢測Amelogenin基因座Y峰缺失。

親子鑒定案件量逐年增加，隨之而來的問題也越來越多，如染色體缺失、嵌合體以及腫瘤等各種原因?qū)е碌腄NA 分型異常會在親子鑒定過程被更多學者發(fā)現(xiàn)，聯(lián)合應用多種檢測手段以及多種生物學遺傳標記將有助于更精準地得出鑒定意見，降低鑒定風險。