劉俊杰 駱昕 林金盛 馬林 李輝平 蔣寧 侯立娟 李翠新 曲紹軒*

(1 江蘇省農(nóng)業(yè)科學院蔬菜研究所/江蘇省高效園藝作物遺傳改良重點實驗室，江蘇 南京 210014；2 西南林業(yè)大學生命科學學院，云南 昆明 650224）

腐食酪螨Tyrophagus putrescentiae，屬于粉螨科Acaridae，食酪螨屬Tyrophagus，是一種世界廣泛分布的儲藏物害螨，經(jīng)常發(fā)生于儲藏食品中，也是食用菌的主要害螨之一[1-2]。腐食酪螨主要取食食用菌菌絲及子實體，也可為害各級菌種，在培養(yǎng)料上爬行并傳播各種雜菌，危害程度與螨的數(shù)量有關。被此螨為害的菌絲斷裂退化，不能長出絮狀的絨毛菌絲，若是菌種用于生產(chǎn)，易導致絕收[2-3]。此螨主要為害海鮮菇、蟹味菇、金針菇、杏鮑菇、毛木耳、銀耳、猴頭菇、黑木耳、香菇、茶樹菇等30多種食用菌[4]。

腐食酪螨的生命周期短(僅4～7 d），在適宜溫度和濕度下，在多種食用菌上均有較高的內(nèi)稟增長率，由于其個體小、生活隱蔽、繁殖力強，一旦發(fā)生極易暴發(fā)成災[4-6]。對腐食酪螨的防治措施主要有物理防治、生物防治和化學防治，以化學防治為主。由于食用菌登記的化學藥劑只有一種，生產(chǎn)中不規(guī)范用藥頻繁發(fā)生，造成該螨對多種殺蟲、殺螨劑的抗藥性增強，并對阿維菌素、噠螨靈、螺螨酯、有機磷類農(nóng)藥產(chǎn)生高抗性，防治害螨越來越困難[7-8]。因此，當務之急是要科學選擇生物源及對環(huán)境生態(tài)友好，能有效控制腐食酪螨藥劑。筆者選擇近年10個新型生物藥劑，測定其對腐食酪螨的半致死濃度，為科學選用新型生物制劑防治腐食酪螨提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗藥劑與儀器

供試的10種新型的生物殺蟲殺螨劑分別為4%米爾貝霉素可濕性粉劑，由浙江威爾達化工有限公司提供；0.4%蛇床子素可溶性液劑、0.5%小檗堿水劑、0.3%苦參堿水劑、0.5%藜蘆堿可溶性液劑、5%魚藤酮微乳劑、95%礦物油乳油和23%銀杏果提取物可溶性液劑，均由江蘇省農(nóng)藥總站提供；30%茶皂素水劑，為湖北綠天地生物科技有限公司產(chǎn)品；95%伊維菌素原藥，為山西康派偉業(yè)生物科技有限公司產(chǎn)品。對照藥劑為90%阿維菌素原藥，為上海源葉生物科技有限公司產(chǎn)品。

主要儀器有人工氣候箱SPX-2501，為上海博訊實業(yè)有限公司產(chǎn)品；培養(yǎng)箱HPS-200，為哈爾濱市東聯(lián)電子技術開發(fā)有限公司產(chǎn)品。

1.2 供試菌株和培養(yǎng)基（料）

香菇Lentinus edodes申香-215，由上海市農(nóng)業(yè)科學院提供。

PDA培養(yǎng)基：葡萄糖13 g/L，馬鈴薯浸提粉4 g/L，瓊脂20 g/L，蛋白胨2 g/L。經(jīng)高壓滅菌后備用。

麥粒培養(yǎng)基：選擇無霉變無蟲蛀的麥粒，提前浸泡12 h后，高壓滅菌備用。

1.3 香菇麥粒種制備

將直徑4 cm母種(申香215）塊接入裝有10 g麥粒培養(yǎng)基的250 mL的培養(yǎng)瓶中，25℃培養(yǎng)至菌絲滿瓶，放置于4℃冰箱備用。

1.4 供試螨蟲

2012年取樣于江蘇省豐縣師寨鎮(zhèn)張寨村毛木耳產(chǎn)區(qū)腐食酪螨，現(xiàn)培養(yǎng)于江蘇省農(nóng)業(yè)科學院蔬菜研究所食用菌實驗室。培養(yǎng)條件：培養(yǎng)箱溫度(24±1）℃，空氣相對濕度80%±5%，飼料為香菇菌絲(麥粒培養(yǎng)基），飼養(yǎng)方法同趙紅炎等[9]。

1.5 室內(nèi)毒力試驗

參照駱昕等[8]的胃毒觸殺聯(lián)合毒力測定方法。將供試藥劑在預試的基礎上稀釋5～6個濃度，每個濃度重復4次，設浸入清水為空白對照。分別用移液器吸取2 mL藥液至干凈的玻璃瓶中，取1 g香菇麥粒種放入玻璃瓶中浸泡5 min后取出，含藥劑的5粒香菇麥粒種放在底部鋪有濾紙的25 mL養(yǎng)蟲瓶中(養(yǎng)蟲瓶先用同一濃度同一藥劑潤洗）；分層過濾法收集腐食酪螨成螨0.10 g，用ddH2O沖洗3次，用吸水紙吸干水分后，放入100 mL養(yǎng)蟲瓶內(nèi)，顯微鏡下向每個裝有含藥劑香菇麥粒種的養(yǎng)蟲瓶中挑入30只成螨，然后置于25℃、空氣相對濕度75%±5%、無光照的培養(yǎng)箱中。試驗均為生物制劑，因此統(tǒng)計48 h的半致死濃度(LC50）。在體視顯微鏡下檢查螨的存活情況，用0號毛刷輕觸螨體及附肢，不動的即視為死亡。統(tǒng)計各個濃度梯度死亡的螨數(shù)量。

1.6 數(shù)據(jù)分析

螨蟲的死亡率按照以下的公式計算：

校正死亡率=[(處理組死亡率-對照組死亡率）/(1-對照組死亡率）]×100%

毒力測定所得數(shù)據(jù)用SPSS21軟件進行相關分析和回歸分析，得出相關系數(shù)R、毒力回歸方程y=ax+b、LC50值及其95%置信區(qū)間。

2 結果與分析

10種新型生物藥劑對腐食酪螨的毒力測定回歸方程及LC50值見表1。由表1可知，處理48 h后，對照藥劑(90%阿維菌素）的毒力最高(LC50為0.015 mg/L）。在10種新型生物藥劑中，對腐食酪螨成螨的毒力依次為：4%米爾貝霉素可濕性粉劑＞0.4%蛇床子素可溶性液劑＞0.5%小檗堿水劑＞0.3%苦參堿水劑＞0.5%藜蘆堿可溶性液劑＞5%魚藤酮微乳劑＞95%伊維菌素原藥＞23%銀杏果提取物可溶性液劑＞30%茶皂素水劑＞95%礦物油乳油。其中以4%米爾貝霉素可濕性粉劑的毒力最強，LC50為2.606 mg/L，0.4%蛇床子素可溶性液劑次之，LC50為17.105 mg/L，95%礦物油乳油的毒力最弱，LC50為8 839.321 mg/L。

表1 48 h后10種新型生物殺蟲殺螨劑對腐食酪螨成螨的毒力測定

10種新型生物藥劑對腐食酪螨成螨的毒力測定結果表明，其中95%伊維菌素原藥、23%銀杏果提取物可溶性液劑、30%茶皂素水劑和95%礦物油乳油等藥劑對腐食酪螨成螨毒力很弱，說明這些藥劑不能用于防治腐食酪螨的成螨。

3 小結與討論

腐食酪螨作為儲糧的主要害螨之一，一般采用磷化氫、磷化鋁等熏蒸劑防治，但這些熏蒸劑大都是劇毒品，對人、畜都有很大的危害性。而腐食酪螨對磷化氫及常用的殺蟲劑如DDT、林丹、環(huán)戊二烯類、除蟲菊酯、有機磷、噠螨靈、螺螨酯、阿維菌素等已產(chǎn)生抗性[7-8]。因此，試驗目的就是試圖在新型的生物源殺蟲殺螨劑中尋找高效低毒的藥劑來防治腐食酪螨，降低防治該螨對人、畜、環(huán)境生態(tài)帶來的負面影響，促進食用菌產(chǎn)業(yè)的綠色健康可持續(xù)發(fā)展。

試驗未涉及田間藥效，采用的胃毒觸殺聯(lián)合毒力測定的結果可為田間防治腐食酪螨生物制劑的選擇和用量提供數(shù)據(jù)參考。綜合腐食酪螨室內(nèi)毒力測定結果，90%阿維菌素原藥和4%米爾貝霉素可濕性粉劑的毒力最強，二者均屬于大環(huán)內(nèi)酯類殺蟲劑，是目前已知的最有效的殺蟲、殺螨劑[10]；植物源殺蟲劑0.4%蛇床子素可溶性液劑、0.5%小檗堿水劑、0.3%苦參堿水劑對腐食酪螨具有一定的毒殺作用。因此建議在腐食酪螨發(fā)生初期交替施用90%阿維菌素、米爾貝霉素或蛇床子素、小檗堿、苦參堿等藥劑，降低螨口基數(shù)，同時能延緩害螨產(chǎn)生抗藥性，這些藥劑具有無交互抗性、安全等特點[11-12]，可作為防治腐食酪螨的備選安全藥劑在田間應用，但田間應用前應評價這些生物藥劑對腐食酪螨的田間防治效果與安全性，不可盲目使用。