朱松濤，鄒旭美，楊華瑩，陸焱，劉鴻生

（南京醫(yī)科大學附屬無錫人民醫(yī)院醫(yī)學檢驗科，江蘇 無錫214023）

肺炎支原體（mycoplasmap neumonia，MP）是社區(qū)獲得性呼吸道感染的常見原因，可引起上、下呼吸道感染，并在全球范圍內引發(fā)流行性感染。國外有報道[1]稱，MP可導致特定時期4%～8%社區(qū)獲得性細菌性肺炎（community-acquired bacterial pneumonias，CABP）的發(fā)生，在疾病流行期間可導致一般人群中高達20%～40%的CABP，甚至在封閉人群中上升至70%。肺炎支原體肺炎（mycoplasma pneumonia pneumonia，MPP）因年齡而異，學齡兒童和青少年是最常見的受感染年齡組，且占＞5歲兒童肺炎病例的40%[2]。由于缺乏典型的臨床特征、胸部X線表現(xiàn)和快速、特異的實驗室技術，及該病原體在實驗室培養(yǎng)方面的困難，因此，大多數(shù)情況下只能憑經(jīng)驗診斷，更因其表現(xiàn)形式常與其他原因的支氣管炎、肺炎相似而易導致誤診。常見的檢測方法包括顆粒凝集試驗、免疫熒光法及核酸擴增技術等，但血清學方法應用最廣，即酶免疫分析法檢測抗肺炎支原體的免疫球蛋白M（immunoglobulin M，IgM）、IgG和IgA抗體[3]。IgM抗體陽性，發(fā)生于免疫早期防御階段，對MPP患兒的病情輕重及預后情況判斷起重要的作用[4]，而血常規(guī)作為臨床上最常用的檢測項目，可詳細反映外周血成分變化。同樣，外周血細胞參數(shù)的異常對MPP的病程發(fā)展有一定的提示作用。伴隨肺炎支原體IgM抗體的產(chǎn)生，血液中具體哪些細胞參數(shù)發(fā)生變化及發(fā)生何種變化，還缺乏全面的實際研究。基于此，本研究旨在探討血細胞參數(shù)在IgM抗體陽性兒童肺炎支原體感染中的應用價值，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料選取2020年9月1日—30日于無錫市兒童醫(yī)院就診的52例肺炎支原體IgM抗體陽性患兒作為病例組，其中男21例，女31例；年齡1～12歲，平均（3.7±3.6）歲。另選取同期年齡、性別相匹配的59名健康體檢兒童作為對照組，其中男23例，女36例；年齡1～12歲，平均（4.1±3.3）歲。兩組性別、年齡比較差異無統(tǒng)計學意義，具有可比性。本研究方案經(jīng)無錫市兒童醫(yī)院醫(yī)學倫理委員會審核通過，兩組兒童監(jiān)護人均知情同意并簽署知情同意書。

1.2 納入及排除標準納入標準：病例組依據(jù)《兒童肺炎支原體肺炎中西醫(yī)結合診治專家共識》（2017）[5]，符合以下條件：有咳嗽伴或不伴發(fā)熱等呼吸道表現(xiàn)，有呼吸音減低，局部出現(xiàn)干濕啰音、喘鳴音等；臨床表現(xiàn)輕且與影像學的顯著表現(xiàn)不一致；影像學提示肺部有大葉性浸潤改變、小葉性點片狀浸潤或間質性改變等，胸部CT常見的征象為伴有支氣管充氣征的大片實變影、結節(jié)狀或小斑片狀氣腔實變影、磨玻璃樣陰影；單次MP-IgM抗體滴度≥1∶160。對照組均經(jīng)臨床檢查排除MPP，無肺部基礎疾?。ǚ谓Y核、氣管軟化癥等），無其他系統(tǒng)性疾病。排除標準：免疫缺陷患兒；有肺部基礎疾病患兒；合并其他病原感染患兒。

1.3 方法采集兩組空腹外周靜脈血樣本2～3 mL，乙二胺四乙酸二鉀抗凝混合，15 min內采用Sysmex XN-9000全自動血細胞分析儀及其配套試劑檢測外周血白細胞（WBC）、嗜酸粒細胞（EO）、淋巴細胞（LY）、中性粒細胞（NE）、紅細胞分布寬度（RDW）、血紅蛋白（Hb）、血小板（PLT）、血小板壓積（PCT）、血小板分布寬度（FL）、C反應蛋白（CRP）等血細胞參數(shù)指標并記錄結果。

1.4 觀察指標比較兩組外周血細胞參數(shù)指標及其在診斷兒童支原體肺炎中的價值。

1.5 統(tǒng)計學方法采用IBM SPSS Statistics 23統(tǒng)計軟件、Excel進行數(shù)據(jù)分析。服從正態(tài)分布的計量資料采用“±s”表示，組間比較采用獨立樣本t檢驗，計數(shù)資料以百分率（%）表示，組間比較采用χ2檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。外周血細胞參數(shù)指標診斷效能采用受試者工作特征曲線（receiver operating characteristic curve，ROC曲線）進行分析，以曲線下面積（area under curve，AUC）作為衡量依據(jù)，取約登指數(shù)最大值對應的數(shù)值作為臨界值（Cut-off值），并計算靈敏度和特異度。

2 結果

2.1 兩組外周血細胞參數(shù)指標比較病例組WBC、NE、NE#、LY#、RDW、CRP水平均明顯高于對照組，LY、EO、EO#、PLT、PCT、Hb水平均明顯低于對照組（P＜0.05）；兩組PDW比較差異無統(tǒng)計學意義，見表1。

表1 兩組血細胞參數(shù)指標比較（±s）Table 1 Comparison of blood cell parameters between the two groups(±s)

表1 兩組血細胞參數(shù)指標比較（±s）Table 1 Comparison of blood cell parameters between the two groups(±s)

注：WBC，白細胞；NE#，中性粒細胞計數(shù)；NE，中性粒細胞比例；LY#，淋巴細胞計數(shù)；LY，淋巴細胞比例；EO，嗜酸粒細胞比例；EO#，嗜酸粒細胞計數(shù)；PLT，血小板計數(shù)；PDW，血小板分布寬度；PCT，血小板壓積；Hb，血紅蛋白；RDW，紅細胞分布寬度；CRP，C反應蛋白

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2.2 血細胞參數(shù)指標在診斷兒童支原體肺炎中的價值WBC、NE、NE#、CRP、RDW、EO、EO#、LY、Hb、PCT、PLT在診斷兒童MPP中的AUC差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。ROC曲線分析結果顯示，EO、RDW、PCT的AUC分別為0.806、0.797、0.78，具有最佳的診斷效能。在Cut-off取值下，EO、PCT的診斷靈敏度（0.731）最高，WBC的診斷特異度（0.966）最高，見表2、圖1。

圖1 血細胞參數(shù)指標診斷兒童支原體肺炎的ROC曲線Figure 1 The ROC curve of blood cell parameters in the diagnosis of Mycoplasma pneumonia in children

表2 血細胞參數(shù)指標在診斷兒童支原體肺炎中的價值Table 2 Value of blood cell parameters in the diagnosis of MPP in children

3 討論

肺炎支原體感染后導致機體發(fā)生一系列免疫應答，首先是B淋巴細胞通過免疫球蛋白介導的體液免疫。有研究[6]顯示，豬感染MPP 28 d后，肺泡灌洗液和肺實質中B細胞數(shù)量增加25倍。MP感染后，正常兒童的IgM水平明顯升高，通常發(fā)生在感染后7～14 d，在第3～4周達到高峰，并持續(xù)數(shù)月[7]。IgM水平升高被認為是6個月以上兒童近期感染的診斷指標，這些兒童不會經(jīng)歷反復支原體感染，但隨著時間的推移，再感染可能導致IgM反應減弱，在成人中最典型[1]。MP誘導體液免疫、抗體應答是肺炎支原體感染應答的基礎，因此，IgM水平升高是肺炎支原體感染的特征性表現(xiàn)。其次，T淋巴細胞通過細胞因子參與的細胞免疫及MP直接侵犯肺部和支氣管組織，并激發(fā)機體產(chǎn)生過度炎性反應，而WBC及中性粒細胞水平升高與其密切相關。除中性粒細胞直接粘附和吞噬肺炎支原體外，聚合酶鏈反應分析表明，在BALB/C大鼠發(fā)生原發(fā)性MP肺炎感染后，腫瘤壞死因子-α（TNF-α），白細胞介素-1β（IL-1β）及肺組織中IL-6的mRNA表達水平明顯增加[8-9]。據(jù)報道[10]，MP可誘導IL-1β的產(chǎn)生，廣泛參與多種類型的損傷，包括組織破壞和水腫形成。

本研究結果表明，病例組CRP水平明顯高于對照組（P＜0.05），說明炎癥因子與支原體肺炎密切相關。有調查[11]顯示，在全血計數(shù)、電解質、肝功能和腎功能正常的支原體肺炎輕度感染疾病患者中，患者的實驗室評估通常是非診斷性的，CRP可能輕度升高；在病情較重的患者，尤其是原發(fā)性非典型肺炎患者中，炎癥標志物（CRP和血沉）可明顯升高。同時，PLT、PCT水平明顯低于正常對照組，說明MP初期感染可能伴隨著凝血狀態(tài)的改變。PLT對于止血、血栓形成、肺免疫防御和炎癥反應至關重要[9]。有資料[12]顯示，嚴重的支原體肺炎感染會伴隨血栓形成，急性期血管損傷部位形成PLT-Fn復合物，導致PLT消耗量的增加。此外，炎癥標志物CRP可能通過促進血管重塑、內皮功能障礙和原位血栓形成而導致近端肺動脈的持續(xù)阻塞，使孤立性動脈血栓形成原位血栓，這可能是癥狀輕微的原因之一[13]。

本研究結果顯示，病例組血紅蛋白含量低于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），推測除受感染導致機體營養(yǎng)素流失外，MP可通過改變紅細胞膜的抗原性，并誘導針對紅細胞膜I抗原的自身抗體，即紅細胞的冷凝集素，從而誘導自身免疫性溶血性貧血[14]。同時，RDW的顯著增加也提示造血異常，有發(fā)生貧血的可能。關于EO#及其比例EO的問題，雖然EO具有最佳的診斷效能，但需與EO#及臨床相結合。一般嗜酸性粒細胞計數(shù)降低無較大臨床意義，主要是感染導致的一種癥狀，例如感冒、發(fā)燒、咳嗽、肺炎等應激狀態(tài)，且治療時使用腎皮質激素也會導致EO#降低。但與此相反的是，MP感染可導致血清中總IgE水平升高，而速發(fā)型和遲發(fā)性過敏反應可作為一種即時反應和延遲相反應或雙相反應誘發(fā)哮喘，從而誘發(fā)IgE介導的氣道炎癥和氣道高反應性[15]。但無直接證據(jù)表明MPP是引發(fā)哮喘的直接原因。

綜上所述，支原體肺炎患兒血細胞參數(shù)表現(xiàn)為EO、RDW、PCT指標的顯著異常，WBC有最大診斷特異度，但因EO結果無較大臨床意義或需進一步證實，因此，除EO外均可作為輔助診斷支原體肺炎的潛在指標，但具體機制有待進一步研究證實。