李治培，韋科龍，盧 瑛，謝耀鋒

(廣西水牛研究所，廣西 南寧 530001)

0 引言

葉酸是機體細胞生長和繁殖所必需的物質，反芻動物通過瘤胃微生物的合成獲得葉酸，然而隨著高產(chǎn)奶牛的營養(yǎng)需要，僅依靠瘤胃微生物合成已無法滿足奶牛機體對葉酸的需求[1]。目前奶水牛中添加葉酸少見報道，本文通過研究在日糧中添加包被葉酸對奶水牛生殖激素和血清生化指標的影響，以期為奶水牛高效利用葉酸提供基礎數(shù)據(jù)。

1 試驗材料與試驗設計

1.1 試驗動物

選取年齡3～4歲、體重相近、體況良好的奶水牛48頭，隨機分為4組，對照組飼喂基礎日糧，試驗Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組在基礎日糧的基礎上每天分別添加35 mg、70 mg和105 mg經(jīng)包被處理的葉酸。飼養(yǎng)試驗在廣西南寧市某規(guī)模水牛養(yǎng)殖場內(nèi)進行。

1.2 試驗設計

1)不同水平包被葉酸對血清中葉酸的影響。在發(fā)情前期，發(fā)情第21天，妊娠期第60天，隨機選取每個組中的6只母水牛采集血樣，研究葉酸水平對血清中葉酸的影響。

2)不同水平包被葉酸對奶水牛生殖激素的影響。試驗期為21 d，同期發(fā)情處理后，隨機選取每個組中的6頭母水牛，在PG處理當天、發(fā)情周期第0天、1天、2天、6天、10天、14天、18天、19天、20天、21天采血，測定血清中FSH、LH、E2和P4的濃度。

3)不同水平包被葉酸對奶水牛血清生化指標的影響。試驗期為120 d，在妊娠期第30天、60天、120天，隨機選取每個組中的6頭母水牛采集血樣，檢測血清的生化指標。

1.3 飼養(yǎng)試驗管理

試驗奶水牛單牛喂養(yǎng)，由專門的飼養(yǎng)員管理，葉酸混合于精料中飼喂，牛只自由運動，在運動場有水槽，牛只自由飲水。

2 結果

2.1 不同水平包被葉酸對奶水牛血清FA含量的影響

不同葉酸添加水平在不同時間點對奶水牛血清中FA的影響，在發(fā)情前期、發(fā)情中期，各個組母水牛血清中FA濃度差異不顯著(P>0.05)。在妊娠期第60天，對照組母水牛血清中FA濃度顯著低于其他組(P<0.05)。

2.2 不同水平包被葉酸對奶水牛生殖激素的影響

日糧中添加不同水平包被葉酸后，母水牛血清中FSH均無顯著性變化，F(xiàn)SH在3.6～14 mIU/mL浮動。在PG處理當天、發(fā)情周期第0天、6天、14天、20天，母水牛血清中LH出現(xiàn)顯著性差異(P<0.05)，發(fā)情周期第1天出現(xiàn)峰值，其中70 mg/d組最高濃度為15.02 mIU/mL。在發(fā)情第6天，母水牛血清中E2濃度出現(xiàn)第一個峰值，其中70 mg/d 最高，E2濃度為230.30 pg/mL，但各組之間差異不顯著(P>0.05)，之后增長速度逐漸放慢，在第19天出現(xiàn)第二個峰值，其中70 mg/d 組最高，E2濃度為244.70 pg/mL。在發(fā)情周期第0天和第1天，母水牛血清中P4出現(xiàn)顯著性差異(P<0.05)，其中對照組較葉酸添加組P4的濃度都要高，其中70 mg/d組濃度最低為0.6 ng/mL；發(fā)情周期第14天出現(xiàn)峰值，其中105 mg/d 最高，為12.90 ng/mL，然后逐漸降低。

2.3 不同水平包被葉酸對奶水牛血清生化指標的影響

日糧中添加不同水平包被葉酸對妊娠母牛不同妊娠階段血清生化指標的影響：妊娠第30天時，母牛血清中70 mg/d 組TP顯著高于對照組和105 mg/d 組(P<0.05)，其濃度為72.04 g/L；70 mg/d 組血清中AST含量顯著低于其他組(P<0.05)，濃度為153.04 U/L。妊娠60 d時，70 mg/d組血清中GLOB、AST含量顯著高于對照組(P<0.05)，其濃度分別為32.84 g/L、161.23 U/L；隨著葉酸水平的增加，血液中GLU呈下降的趨勢，但各組間差異不顯著(P>0.05)。妊娠第120天時，70 mg/d組ALB顯著高于105 mg/d 組(P<0.05)；而105 mg/d 組GLOB顯著高于70 mg/d 組(P<0.05)。

3 討論

3.1 不同水平包被葉酸對奶水牛血清FA含量的影響

從試驗結果可知，在發(fā)情前期、發(fā)情中期，隨著日糧中葉酸添加水平升高，母牛血清中FA濃度并沒有顯著升高，這說明在催情補飼期內(nèi)，母牛瘤胃微生物合成的葉酸可以滿足機體自身的需要量，在妊娠期對照組中FA較試驗組要低，說明在這一階段可以適量添加葉酸。

3.2 不同水平包被葉酸對奶水牛生殖激素的影響

在動物的發(fā)情周期中，LH分泌有明顯的規(guī)律性，呈脈沖式分泌，在卵泡期，LH分泌量基本恒定，直到排卵前分泌量才明顯增加，形成排卵前峰[2]。E2的分泌呈明顯的周期性變化，而且在發(fā)情周期中其消長規(guī)律與P4相反，在發(fā)情周期的間情期和卵泡發(fā)育早期，血漿E2水平很低。試驗研究結果表明，在發(fā)情周期第10天，空白對照組P4的濃度出現(xiàn)峰值，而葉酸添加組P4的濃度在第14天出現(xiàn)峰值，此時母牛血清中LH濃度差異顯著(P <0.05)。在發(fā)情周期第20天，母牛血清中LH濃度出現(xiàn)峰值，添加葉酸組顯著高于對照組(P<0.05)，說明日糧中添加葉酸可以提高LH的峰值。通常哺乳動物發(fā)情前后極低的P4水平利于其進入下一發(fā)情周期[3]，本實驗中添加葉酸組母水牛P4水平在發(fā)情后48 h內(nèi)均低于對照組，說明日糧中添加葉酸能促進母水牛發(fā)情。

3.3 不同水平包被葉酸對奶水牛血清生化指標的影響

血清中GLU、TP、ALB作為糖和蛋白質代謝指標的參考，TC和TG是脂肪代謝和肝功能指標。在氨基酸代謝和蛋白質、脂肪和糖轉換過程中，轉氨酶有極其重要的作用，特別是AST和ALT還是反應肝臟和心臟功能的指標。本試驗中，在妊娠第30天時，70 mg/d 組TP含量顯著提高，說明日糧中添加葉酸可以加快母牛妊娠早期蛋白質代謝。妊娠第60天時，隨葉酸添加水平的增加，血液中GLU均低于對照組；70 mg/d 組中GLOB、AST含量顯著高于對照組(P<0.05)，說明日糧中添加葉酸可以提高母牛妊娠早期蛋白質代謝，并促進了氨基酸代謝。妊娠第120天時，添加葉酸組ALB含量較對照組增高，且隨著葉酸水平的添加，GLOB也隨著增高，說明日糧中添加葉酸可以提高妊娠后期蛋白質代謝。

4 結論

奶水牛的營養(yǎng)及健康狀況顯著影響發(fā)情、泌乳、繁殖等性能，本實驗借鑒了鄭亞琳[4]的設計思路，大部分實驗結果大致相同，證明葉酸能促進反芻動物的生產(chǎn)性能。本實驗在日糧中添加葉酸可以提高LH的峰值，在奶水牛發(fā)情前后降低P4水平，促進其在下一發(fā)情周期的發(fā)情。日糧中添加葉酸可以提高不同妊娠階段奶母水牛蛋白質代謝，促進氨基酸代謝，泌乳奶水牛日糧中包被葉酸的適宜添加量為70 mg/d。