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        脫細(xì)胞真皮基質(zhì)在口腔科的臨床應(yīng)用研究▲

        2021-12-04 12:18:35王鳳瓊
        微創(chuàng)醫(yī)學(xué) 2021年1期
        關(guān)鍵詞:手術(shù)

        王鳳瓊

        (廣西醫(yī)科大學(xué)第四附屬醫(yī)院暨廣西柳州市工人醫(yī)院口腔科,廣西柳州市 545005)

        【提要】 脫細(xì)胞真皮基質(zhì)(ADM)是人或動物皮膚經(jīng)脫細(xì)胞處理后制備而成的生物材料,其特點(diǎn)為具有低抗原性,且具有較好的組織相容性,最早用于燒傷治療中。隨著臨床上對ADM制備技術(shù)的深入研究,ADM逐漸被應(yīng)用到其他學(xué)科領(lǐng)域中。在口腔科的應(yīng)用包括創(chuàng)面覆蓋、腮腺手術(shù)中預(yù)防畸形和并發(fā)癥、引導(dǎo)組織再生等。探討ADM的生物學(xué)特性、作用機(jī)制和體內(nèi)轉(zhuǎn)歸的研究成果,可為ADM在口腔科的臨床應(yīng)用與推廣等提供參考。

        脫細(xì)胞真皮基質(zhì)(acellular dermal matrix,ADM)是一種生物材料,其通過采用人或動物皮膚,使用物理、化學(xué)方法完全脫去表皮和真皮中引起排斥反應(yīng)的成纖維細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞等成分,僅保留低抗原性細(xì)胞外基質(zhì)以及規(guī)則的三維網(wǎng)狀框架結(jié)構(gòu),具有良好的生物相容性[1]。ADM植入受體后,隨著自體組織的生成和移行而完成創(chuàng)面覆蓋、軟組織缺損填充、引導(dǎo)組織再生等作用,近年在口腔軟組織缺損、牙周組織再生和牙種植術(shù)中的應(yīng)用逐步得到推廣,現(xiàn)就其在口腔科的應(yīng)用研究進(jìn)展作一綜述。

        1 ADM的研究概況

        ADM是由國外興起的一種新型真皮替代物,其借助多種特殊方法去除皮膚內(nèi)的細(xì)胞成分,僅留下真皮內(nèi)含有膠原網(wǎng)狀支架的細(xì)胞外基質(zhì)成分。ADM的研發(fā)及技術(shù)發(fā)展起源于燒傷科學(xué)。Heck等[2]將人類異體真皮作為自體皮膚移植的載體,應(yīng)用于控制瘢痕增生和創(chuàng)面修復(fù)術(shù)取得了較好的效果。隨后Wainwright[3]進(jìn)行了深入研究,發(fā)現(xiàn)異體皮膚移植引起排斥反應(yīng)的抗原主要來自成纖維細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、表皮細(xì)胞,該研究促進(jìn)了異體真皮去細(xì)胞化研究的開展。目前,國內(nèi)外已研發(fā)出商品化ADM,且應(yīng)用到皮膚和黏膜缺損治療中[4-5]。ADM應(yīng)用于燒傷整形科、神經(jīng)外科、耳鼻咽喉和頭頸外科、眼科、口腔頜面外科手術(shù)中,尤其是皮膚和黏膜軟組織缺損修補(bǔ)術(shù)、乳房等器官再造、腹股溝疝修補(bǔ)術(shù)、神經(jīng)組織工程等[6-9]。在口腔科的研究范疇中,ADM可用于修補(bǔ)腭裂缺損、腮腺涎瘺和預(yù)防Frey綜合征、牙齦缺損不足、牙周組織再生、黑色素沉著、頰舌腫瘤切除后的軟組織缺損和種植體周圍軟組織不足等[10-11]。

        2 ADM的獲取

        ADM根據(jù)來源的不同分為兩種:同種異體ADM和異種ADM。為了降低排斥反應(yīng),需要去除真皮中所有細(xì)胞成分并保留完整的真皮膠原支架,常用方法有高滲鹽水法、酶消化法、去垢劑法、凍融法等。學(xué)者們經(jīng)過反復(fù)的實(shí)驗(yàn)和總結(jié),用上述方法組合改進(jìn)。溫春泉等[12]對比了改良-80 ℃低溫冰箱和液氮兩種低溫方法進(jìn)行反復(fù)凍融制作的大張羊ADM,脫細(xì)胞程度和其他生物學(xué)性能無明顯差異,但完整性前者明顯優(yōu)于后者,更適合臨床應(yīng)用。

        目前可行的ADM制備方法主要有Dispase Ⅱ-Triton法、高滲鹽液-SDS法、高滲鹽水-酶消化法、NaOH銷蝕法等。Sarkozyova等[13]報(bào)道將供體皮膚置于胰蛋白酶和乙二胺四乙酸混合液中,使表皮層與完整的基底膜分離,通過機(jī)械刮擦去除表皮殘留物,隨后將無表皮的真皮浸入低滲溶液中(無菌蒸餾水浴),逐步裂解殘留的真皮細(xì)胞,重復(fù)漂洗至留下完整的無細(xì)胞真皮膠原彈性蛋白基質(zhì)結(jié)構(gòu)體。目前國內(nèi)外已有獲得生物材料生產(chǎn)許可證的多款產(chǎn)品提供給臨床手術(shù)使用。

        3 ADM的生物學(xué)特性和對細(xì)胞的作用機(jī)制

        ADM存在基底膜與真皮兩個面,Livesey等[14]發(fā)現(xiàn)基底膜面與移植于其表面的皮片緊密貼合,引導(dǎo)表皮細(xì)胞的生長和成熟,對改善移植皮的外觀以及功能恢復(fù)起著重要的作用;真皮面促使正常膠原纖維的形成以及新生血管和上皮形成。

        Pabst等[15]將豬ADM植入裸鼠皮下后顯示出與周圍組織的良好整合以及其膠原蛋白結(jié)構(gòu)的明顯血運(yùn)重建。在光學(xué)顯微鏡下, 發(fā)現(xiàn)ADM真皮面呈鱗片狀結(jié)構(gòu),牙齦成纖維細(xì)胞在組織面生長良好;基底膜面結(jié)構(gòu)致密,很少有受體新生細(xì)胞穿透全層長入另一面,這體現(xiàn)了其屏障功能。陳武等[16]將ADM膜與牙周膜細(xì)胞共同培養(yǎng),電子顯微鏡下觀察顯示,5 d時ADM的光滑面有密集的熒光染色,而粗糙面只有少量的熒光染色,即牙周膜細(xì)胞在ADM的表面黏附、增殖性能較好,而基底膜面細(xì)胞增殖少,說明ADM影響牙齦成纖維細(xì)胞黏附、增殖及對牙齦成纖維細(xì)胞有屏障作用,ADM在植入受體后可形成物理屏障,基底膜面和真皮面引導(dǎo)相應(yīng)的細(xì)胞生長。

        ADM植入生物體后,因其成分和結(jié)構(gòu)與正常細(xì)胞生長所需微環(huán)境相似,可作為皮膚和黏膜替代物用于軟組織創(chuàng)傷的缺損修復(fù),并具有誘導(dǎo)周圍細(xì)胞爬行生長、促進(jìn)細(xì)胞增殖和血管再生,且利于組織重建的作用。

        4 ADM在體內(nèi)的轉(zhuǎn)歸

        ADM植入受區(qū)給創(chuàng)面提供修復(fù)所需的真皮組織,形成一個生物支架,其在體內(nèi)與受體組織的生長和重建過程的研究較為困難,目前發(fā)現(xiàn)隨著機(jī)體自身的血管長入和成纖維細(xì)胞遷移其中,ADM逐步進(jìn)行改建。

        對于ADM在受體內(nèi)的改建過程,學(xué)術(shù)界持有兩種觀點(diǎn):一部分學(xué)者研究[17-18]發(fā)現(xiàn)受體新生膠原纖維與ADM原有膠原支架并存,ADM被視為自體組織;更多學(xué)者[19-21]認(rèn)為ADM在受體內(nèi)隨著組織的生長逐漸被降解和替代,最終被自體組織完全替換,這一過程持續(xù)的時間呈現(xiàn)個體差異,影響因素尚待進(jìn)一步研究[22]。

        劉道峰等[23]發(fā)現(xiàn),ADM植入受體后,血小板激活系統(tǒng)觸發(fā)生長因子和其他形態(tài)生成素的釋放,使其沉積于膠原纖維之間。ADM內(nèi)含的大量精氨酸-甘氨酸-天門冬氨酸三肽序列引導(dǎo)特殊的細(xì)胞黏附蛋白(可被成纖維細(xì)胞表面的整合素受體識別)進(jìn)入支架。在微環(huán)境的多種因素作用下,成纖維細(xì)胞重塑支架,使其轉(zhuǎn)變?yōu)榕c原始組織具有同樣功能的組織。ADM并不是僅停留于基質(zhì)狀態(tài),而是隨應(yīng)用部位不同被改建為適宜的組織。

        ADM真皮面可引導(dǎo)新生血管長入,短時間內(nèi)形成血管網(wǎng)。Henn等[24]研究表明,在異種脫細(xì)胞真皮移植模型中,ADM促進(jìn)血管生成和1型膠原的產(chǎn)生而沒有引起明顯的纖維化反應(yīng)。這些發(fā)現(xiàn)可能有助于深入了解ADM修復(fù)傷口和組織再生的有益效果。

        5 ADM在口腔科的應(yīng)用

        5.1 口腔創(chuàng)面覆蓋 口腔創(chuàng)面缺乏充足的自體黏膜覆蓋是口腔頜面外科手術(shù)面臨的難題。臨床上常用的解決方法是利用自體皮片進(jìn)行修復(fù),但汗腺、毛發(fā)等因皮片自身組織特點(diǎn)產(chǎn)生的缺點(diǎn)與供區(qū)創(chuàng)傷問題為臨床醫(yī)師帶來諸多困擾,致使部分治療工作無法有效開展。近年來國內(nèi)外諸多研究表明,ADM為黏膜缺損的最佳替代物之一。Rhee等[25]報(bào)道了在異位口腔腫瘤切除術(shù)后29例患有口腔黏膜缺損(舌、口底、上頜、下頜、硬腭、軟腭、嘴唇和扁桃體)的患者中使用同種異體真皮,總體成功率達(dá)到90%,在4周內(nèi)的臨床評估中發(fā)現(xiàn)完全上皮化。居國平等[26]對ADM移植重建的36例口腔黏膜缺損患者進(jìn)行了至少6個月的隨訪,觀察移植物修復(fù)、傷口愈合時間、攣縮、顏色、感染、疼痛、免疫反應(yīng)、移植物質(zhì)地和臨床過程,成功地獲得了新的黏膜樣組織替代物(94.4%),7例嘴唇或頰側(cè)缺損的患者發(fā)生了輕度的移植物收縮,尤其是在重建手術(shù)后3~5周時,顯示ADM移植治療口腔黏膜缺損是安全有效的。

        ADM的愈合方式主要分為上皮愈合與附著愈合。術(shù)后上皮愈合有顯著片狀浸潤,自體組織由不同方向朝ADM生長而完成愈合;附著愈合可出現(xiàn)紅色斑點(diǎn)狀活組織,并不斷對ADM進(jìn)行浸潤,最后整體相連完成愈合。ADM成活后會被自體組織取代,新生組織顏色、耐磨性與周圍組織類似,可有效承受義齒基托壓力。

        5.2 腮腺手術(shù)預(yù)防畸形和并發(fā)癥 腮腺腫瘤是一種嚴(yán)重的頭頸疾病,嚴(yán)重影響顏面的美觀和功能,其中相當(dāng)一部分屬于惡性腫瘤,手術(shù)是重要的治療手段。然而,在手術(shù)后存在許多并發(fā)癥,包括面部瘢痕、凹陷性畸形、Frey綜合征等,這些并發(fā)癥會嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量。Frey綜合征是腮腺腫瘤手術(shù)后最常見的并發(fā)癥,主要表現(xiàn)為手術(shù)區(qū)域出汗、發(fā)熱和紅腫,通常在手術(shù)后1年內(nèi)出現(xiàn)。其發(fā)病機(jī)制可能是耳顳神經(jīng)的損傷。同時,還可發(fā)生錯位吻合并導(dǎo)致交感神經(jīng)和副交感神經(jīng)之間的相互干擾。植入ADM時,面部皮膚皮瓣和腮腺手術(shù)部位之間會形成生物屏障,控制腮腺神經(jīng)的吻合生長被切斷,錯誤的神經(jīng)傳導(dǎo)停止,這是ADM移植預(yù)防Frey綜合征的原理。Lee等[27]認(rèn)為對于腮腺腫瘤高?;颊邞?yīng)考慮常規(guī)的預(yù)防干預(yù)措施,使用ADM可有效預(yù)防味覺出汗綜合征(95%有效率),幫助術(shù)后腮腺部凹陷畸形修復(fù)。Irvine等[28]報(bào)道ADM可用于部分或全腮腺切除術(shù)后重建,可顯著提高患者滿意度,是目前腮腺切除術(shù)后軟組織缺損最好的處理方法。

        5.3 根面覆蓋 牙齦退縮導(dǎo)致的牙根暴露若未能得到有效的根面覆蓋,將會使牙周病進(jìn)一步發(fā)展,最終骨組織吸收、退縮,牙齒松動脫落。ADM作為根面覆蓋材料,在改善牙齦退縮方面的臨床效果得到了諸多學(xué)者的證實(shí)。Shirakata等[29]研究豬ADM單獨(dú)或聯(lián)合釉質(zhì)基質(zhì)衍生物治療犬實(shí)驗(yàn)性牙齦退縮缺損的效果,在研究的各組中,均獲得了不同程度的根面覆蓋,豬ADM很好地并入了牙齦結(jié)締組織中。Cosgarea等[30]評估改良隧道法結(jié)合豬ADM治療多個相鄰的Ⅰ型和Ⅱ型不連續(xù)性牙齦退縮患者的長期臨床療效,在治療后1年時78.05%的牙齦退縮顯示出牙根覆蓋,而在治療后4年時仍有68.29%顯示牙根覆蓋。為改良隧道法聯(lián)合豬ADM治療上頜和下頜多個相鄰的Ⅰ型和Ⅱ型牙齦退縮提供了有價(jià)值的治療選擇。Lu等[31]總結(jié)治療牙周病患者牙周組織退縮的療效,ADM在根部覆蓋手術(shù)方面具有與自體組織相當(dāng)?shù)呐R床療效,并具有良好的長期穩(wěn)定性。但是,對于軟組織充盈,ADM與游離牙齦移植物相比,術(shù)后3~6個月的結(jié)局較差,與結(jié)締組織移植物相比,角化組織寬度的長期穩(wěn)定性較差。但是,基于ADM的牙周整形手術(shù)可以改善美學(xué)效果,減少手術(shù)并發(fā)癥,并有助于治療牙本質(zhì)過敏癥。

        5.4 引導(dǎo)組織再生 種植體周圍有足夠的軟組織和硬組織是牙種植術(shù)成功的基本條件。近年來,諸多學(xué)者報(bào)道ADM在牙周和種植手術(shù)方面的成功應(yīng)用。通常情況下,ADM作為屏障膜能誘導(dǎo)多種類型組織細(xì)胞于雙側(cè)生長而互不影響。臨床實(shí)踐證明[32-33],ADM可有效重建種植體周圍組織,同時獲得軟組織和硬組織的再生,手術(shù)便捷、不良反應(yīng)少。 Momen-Heravi等[34]在上頜前牙種植體骨缺損區(qū)域使用蜂窩狀A(yù)DM作為屏障,有效阻止了上皮細(xì)胞的長入,獲得了足夠的軟組織和硬組織再生,實(shí)現(xiàn)牙齦的生物型轉(zhuǎn)化。近期Mahn[35]采用改良的隧道技術(shù)和雙層ADM治療多顆牙齒和種植體,觀察3~5年,取得了良好的結(jié)果。葛菲等[36]對15例拔牙后行即刻種植的患者進(jìn)行觀察研究,在骨組織引導(dǎo)再生術(shù)中使用異體ADM,結(jié)果發(fā)現(xiàn)6個月后所有患者均完成最終修復(fù),無感染及明顯并發(fā)癥。說明異體ADM作為屏障膜能有效引導(dǎo)骨組織再生, 降低術(shù)中關(guān)閉創(chuàng)口的難度,可以推廣應(yīng)用。

        6 總結(jié)和展望

        生物材料應(yīng)具有良好的生物相容性、生物安全性、生物降解性等。ADM主要從捐獻(xiàn)者皮膚獲取,也可來自異種生物體如豬、牛等哺乳動物。不同供體的ADM作用機(jī)理類似,臨床效果也接近。受區(qū)皮片和黏膜愈合后質(zhì)地好,外觀平整,攣縮輕,功能恢復(fù)良好。雖然同種異體ADM在臨床上的應(yīng)用效果較好,但也存在著不可忽視的問題:(1)異體皮供體來源有限;(2)可能傳播疾??;(3)存在著倫理問題;(4)需低溫保存,運(yùn)輸和存儲不方便。異種ADM的來源充足,可以為患者創(chuàng)造多次手術(shù)機(jī)會,不存在倫理問題,采用凍干工藝,常溫存儲,有效期長,運(yùn)輸方便。

        ADM在臨床中的應(yīng)用已有20余年,材料制備方法和工藝已經(jīng)有較大的改善,在性能方面也使其抗原性大大降低,與受體組織更易于結(jié)合,適應(yīng)證也擴(kuò)大到口腔臨床各專業(yè)的手術(shù)中,但是仍需要更多的基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)研究與臨床研究進(jìn)行長期觀察,進(jìn)一步完善其實(shí)用功能,提高其應(yīng)用價(jià)值。

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