宇慶迎，楊瑩，劉墨林，褚玉鶴，夏小雯，薛玲

(山東中醫(yī)藥大學(xué)a.藥學(xué)院，b.中醫(yī)學(xué)院，濟(jì)南 250355)

抑郁癥是目前常見(jiàn)的一種心理障礙疾病，是全球疾病負(fù)擔(dān)的主要因素之一[1]，具有較高的致殘率，其癥狀標(biāo)準(zhǔn)以顯著而持久的心境低落為主要特征。而研究發(fā)現(xiàn)抑郁癥癥狀時(shí)間越長(zhǎng)，患者認(rèn)知障礙越嚴(yán)重[2]，強(qiáng)烈的悲觀情緒甚至?xí)?dǎo)致自殺。近年來(lái)，抑郁癥的發(fā)病率越來(lái)越高。據(jù)世界衛(wèi)生組織統(tǒng)計(jì)，全球抑郁癥發(fā)病率約11%，高發(fā)人群多為腦力勞動(dòng)者[3]。一項(xiàng)對(duì)抑郁癥患者進(jìn)行10年隨訪的研究發(fā)現(xiàn)，65%～70%的抑郁癥患者因會(huì)出現(xiàn)多次復(fù)發(fā)的情況而需要進(jìn)行預(yù)防治療[4]。此外，抑郁還會(huì)增加由心臟病、腦血管疾病等引起的死亡風(fēng)險(xiǎn)。但目前有關(guān)抑郁癥的發(fā)病機(jī)制仍不十分明確，研究抑郁癥的確切神經(jīng)生物學(xué)機(jī)制主要受限于其復(fù)雜性以及與其他合并癥的關(guān)聯(lián)。雖然通過(guò)使用人類(lèi)受試者的死后大腦樣本已經(jīng)克服了一些局限性，但是這些樣本經(jīng)常受到年齡、性別、用藥史、死后組織收集等因素的影響。因此，合理的抑郁癥動(dòng)物模型對(duì)于研究抑郁癥發(fā)病機(jī)制、藥物篩選以及指導(dǎo)臨床用藥尤為重要。動(dòng)物模型的缺陷在于其認(rèn)知度和情感能力與人類(lèi)不同，但近年來(lái)，抑郁癥動(dòng)物模型不斷得到完善[5]?，F(xiàn)通過(guò)介紹不同抑郁癥動(dòng)物模型，以尋求生理病理學(xué)現(xiàn)象與人類(lèi)抑郁癥盡可能高度相似的動(dòng)物，主要采用應(yīng)激、藥物、手術(shù)等造模方法構(gòu)建合理有效的抑郁癥動(dòng)物模型，為抑郁癥發(fā)病機(jī)制的研究和臨床治療提供參考。

1 抑郁癥相關(guān)的分子機(jī)制

抑郁癥涉及的分子種類(lèi)繁雜，確切分子機(jī)制仍不清楚，目前其主流發(fā)病機(jī)制假說(shuō)主要有以下幾種。①單胺神經(jīng)遞質(zhì)假說(shuō)：在抑郁癥患者中觀察到某些神經(jīng)遞質(zhì)失調(diào)，從而引起神經(jīng)生物學(xué)上的紊亂。如人體色氨酸攝入不足會(huì)使5-羥色胺水平降低[6]，進(jìn)而導(dǎo)致抑郁癥的發(fā)生。此外，去甲腎上腺素轉(zhuǎn)運(yùn)體也已成為重度抑郁癥的一種靶向治療途徑。②神經(jīng)可塑性假說(shuō)：神經(jīng)影像學(xué)顯示，抑郁癥患者前額皮質(zhì)和海馬體積減小，同時(shí)心理和環(huán)境應(yīng)激模式制作的動(dòng)物模型研究提供了神經(jīng)萎縮的直接證據(jù)[7]。如慢性不可預(yù)知溫和刺激模型或反復(fù)束縛會(huì)降低前額葉和海馬樹(shù)突復(fù)雜性及樹(shù)突棘密度。③氧化應(yīng)激反應(yīng)假說(shuō)：過(guò)度的氧化應(yīng)激也是抑郁癥的一個(gè)重要原因?？寡趸芰^(guò)低會(huì)降低對(duì)活性氧類(lèi)的保護(hù)，導(dǎo)致氧化應(yīng)激狀態(tài)，損害脂肪酸、蛋白質(zhì)和DNA的代謝，并產(chǎn)生過(guò)量的黃嘌呤氧化酶和丙二醛等[8]。氧化應(yīng)激也可能引發(fā)自身免疫反應(yīng)，導(dǎo)致神經(jīng)退行性疾病。已有研究證明，一些抗抑郁藥物可以通過(guò)持續(xù)提高抗氧化劑水平和使大腦紊亂正?；瘉?lái)逆轉(zhuǎn)某些動(dòng)物的抑郁癥狀[9]。④神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子假說(shuō)：據(jù)報(bào)道，抑郁模型大鼠海馬中腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(brain-derived neurotrophic factor，BDNF)表達(dá)減少[10-11]，表明BDNF可能是抑郁產(chǎn)生的重要因素。尸檢發(fā)現(xiàn)，女性自殺者前額葉皮質(zhì)中BDNF水平降低，而男性自殺者海馬中BDNF蛋白水平顯著降低[12]。⑤興奮性氨基酸假說(shuō)：研究發(fā)現(xiàn)，抑郁癥模型動(dòng)物大腦中谷氨酸水平在造模后24 h內(nèi)升高，在隨后的4周內(nèi)降低，同時(shí)檢測(cè)到海馬CA1區(qū)突觸小泡蛋白囊泡谷氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-1水平降低[13-14]。另有研究顯示，重癥抑郁癥患者的血小板對(duì)谷氨酸的敏感性增加[15]。⑥炎癥反應(yīng)機(jī)制：實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，小鼠腹腔注射脂多糖可以誘導(dǎo)抑郁樣行為，使模型動(dòng)物血漿中細(xì)胞因子水平升高，同時(shí)中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)生炎癥反應(yīng)[16]。

2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物抑郁癥造模

2.1模型動(dòng)物的選擇 隨著對(duì)抑郁癥臨床和實(shí)驗(yàn)研究的不斷進(jìn)步，越來(lái)越多的動(dòng)物被用于抑郁癥動(dòng)物模型的研究，以期尋找一個(gè)適用于人類(lèi)抑郁癥的動(dòng)物模型。①?lài)X動(dòng)物：嚙齒類(lèi)動(dòng)物是最常用的動(dòng)物模型，具有價(jià)格低廉、飼養(yǎng)方便、易于繁殖、造模周期短、可塑性及穩(wěn)定性較強(qiáng)等諸多優(yōu)勢(shì)，在評(píng)價(jià)抗抑郁藥物效果中取得了一定成果。但由于其與人類(lèi)吻合性較低，因此在研究抑郁行為及中樞調(diào)控機(jī)制方面限制較大。常用動(dòng)物品系有C57BL/6小鼠、Wistar大鼠等。②非人靈長(zhǎng)類(lèi)動(dòng)物：非人靈長(zhǎng)類(lèi)動(dòng)物由于與人類(lèi)在進(jìn)化上高度相似，親緣關(guān)系較近，故有發(fā)達(dá)的中樞神經(jīng)系統(tǒng)結(jié)構(gòu)。此外，它們的生活習(xí)慣和人類(lèi)吻合性較高，可以通過(guò)學(xué)習(xí)不斷增強(qiáng)認(rèn)知能力從而逐漸社會(huì)化，有高級(jí)認(rèn)知并表達(dá)一系列情感的能力，在抑郁癥行為和中樞神經(jīng)系統(tǒng)研究方面有較大優(yōu)勢(shì)，是較為理想的抑郁癥模型動(dòng)物。③轉(zhuǎn)基因動(dòng)物：隨著轉(zhuǎn)基因技術(shù)的迅速發(fā)展，出現(xiàn)了利用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物來(lái)構(gòu)建抑郁癥模型。這種轉(zhuǎn)基因動(dòng)物一般來(lái)自自然突變或近交系，目前常用品系有Fawn Hooded大鼠、Hinder Resistant Line大鼠、Tryon Maze Dull大鼠、Swim Low-active Model大鼠、Flinder Sensitive Line大鼠和Wistar-Kyoto大鼠等[17]。

2.2造模方法 由于人類(lèi)研究的固有局限性以及抑郁癥發(fā)病機(jī)制尚不清楚，目前尚無(wú)明確的實(shí)驗(yàn)指標(biāo)，因此動(dòng)物模型的使用仍是識(shí)別抑郁癥神經(jīng)機(jī)制和發(fā)現(xiàn)新的藥物以及治療方法的必要步驟。目前，常用的抑郁癥造模方法主要包括應(yīng)激造模、藥物造模，手術(shù)造模和遺傳造模。

2.2.1應(yīng)激造模

2.2.1.1行為絕望模型 行為絕望模型是指將動(dòng)物置于一定環(huán)境中，使其出現(xiàn)絕望的狀態(tài)進(jìn)而制作抑郁癥模型，但一般為急性應(yīng)激抑郁模型。行為絕望模型的理論基礎(chǔ)是人類(lèi)抑郁癥的發(fā)生和發(fā)展是由慢性、低水平的壓力源引起，它基本上模擬了人類(lèi)抑郁癥主要癥狀的發(fā)生，而這些癥狀可以在使用抗抑郁藥物后逆轉(zhuǎn)。但該模型中不動(dòng)因素復(fù)雜，其結(jié)果可能受運(yùn)動(dòng)疲勞和狀態(tài)適應(yīng)等因素的影響，從而降低行為絕望模型的有效性。該模型主要通過(guò)強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)、懸尾實(shí)驗(yàn)等進(jìn)行急性應(yīng)激模型的制備以及慢性束縛應(yīng)激實(shí)驗(yàn)等進(jìn)行慢性應(yīng)激模型的制備。

強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)：根據(jù)嚙齒動(dòng)物對(duì)不良環(huán)境的反應(yīng)來(lái)評(píng)估其絕望程度。將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物置于注水的玻璃容器內(nèi)，水溫(25±1) ℃，動(dòng)物會(huì)由激烈掙扎試圖逃離的狀態(tài)轉(zhuǎn)為絕望放棄掙扎狀態(tài)，而后漂浮在水面成靜止不動(dòng)姿勢(shì)。強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)產(chǎn)生的不動(dòng)可被視為促進(jìn)動(dòng)物適應(yīng)和生存的認(rèn)知功能的轉(zhuǎn)換[18-19]。記錄6 min內(nèi)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的不動(dòng)狀態(tài)。使用一定的抗抑郁藥物可以縮短實(shí)驗(yàn)動(dòng)物靜止不動(dòng)的時(shí)間。自20世紀(jì)70年代以來(lái)，強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)一直用于測(cè)試藥物的抗抑郁潛力，其成本低廉、操作簡(jiǎn)便、結(jié)果可靠，常用來(lái)進(jìn)行抗抑郁藥物的初步篩選以及對(duì)抑郁模型動(dòng)物的行為改變進(jìn)行評(píng)價(jià)。然而有研究人員認(rèn)為，強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)不能較好地體現(xiàn)抑郁癥患者的核心癥狀、實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的不動(dòng)狀態(tài)沒(méi)有確切解釋?zhuān)覍?duì)強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)是否是一種好的抑郁癥模型表示懷疑[20]。

懸尾實(shí)驗(yàn)：用于測(cè)量對(duì)壓力情況的響應(yīng)，多用于檢測(cè)抗抑郁藥物的反應(yīng)。將小鼠尾巴用膠帶吊起固定在一定高度，使其頭部向下處于懸空狀態(tài)，前期小鼠會(huì)由于不正常體位而不斷掙扎，當(dāng)多次掙扎發(fā)現(xiàn)無(wú)力改變現(xiàn)狀時(shí)便會(huì)逐步趨于間歇性靜止?fàn)顟B(tài)，從而短時(shí)間內(nèi)產(chǎn)生類(lèi)似抑郁癥的行為。如果受試動(dòng)物不動(dòng)時(shí)間增加，表明其具有抑郁樣行為。該方法操作簡(jiǎn)便、靈敏度高，但易受小鼠品系和周?chē)h(huán)境影響、實(shí)驗(yàn)者主觀判斷性較強(qiáng)，易出現(xiàn)假陽(yáng)性和假陰性結(jié)果；另外，懸尾實(shí)驗(yàn)僅用于小鼠，而不適用于大鼠。同時(shí)，懸尾實(shí)驗(yàn)不適用于檢測(cè)動(dòng)物中的“絕望情緒”，它適合由于無(wú)法承受的環(huán)境壓力而從主動(dòng)行為過(guò)渡到被動(dòng)行為?，F(xiàn)常用來(lái)初篩抗抑郁藥物、評(píng)價(jià)抑郁模型動(dòng)物的行為改變。

慢性束縛應(yīng)激實(shí)驗(yàn)：是常用的應(yīng)激模型之一，操作方法是將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物置于有通氣孔的透明材料所制的可調(diào)節(jié)圓柱形束縛器內(nèi)，每日束縛 3 h，連續(xù)28 d[21]，每日應(yīng)激階段禁食禁水。動(dòng)物因長(zhǎng)時(shí)間束縛于密閉空間內(nèi)，起初表現(xiàn)出焦慮、易怒，并嘗試逃脫，最終感到逃脫無(wú)望便產(chǎn)生類(lèi)似于人類(lèi)的快感缺失、體重減輕、飲食減少、絕望、乏力等可以通過(guò)抗抑郁藥物改善的癥狀[22]。該模型制備簡(jiǎn)單，刺激性小，可以部分描述心理應(yīng)激狀態(tài)，且與人類(lèi)抑郁癥相似程度高，常與慢性不可預(yù)知溫和刺激模型聯(lián)合制備，用來(lái)進(jìn)行抑郁癥整體評(píng)價(jià)的相關(guān)研究。其缺點(diǎn)為動(dòng)物易產(chǎn)生適應(yīng)性。

2.2.1.2習(xí)得性無(wú)助模型 習(xí)得性無(wú)助模型是讓實(shí)驗(yàn)動(dòng)物處于無(wú)法預(yù)測(cè)和控制的應(yīng)激環(huán)境中，一段時(shí)間之后，該動(dòng)物的學(xué)習(xí)能力會(huì)有所欠缺，自發(fā)性活動(dòng)越來(lái)越少，同時(shí)也會(huì)出現(xiàn)體重減輕、運(yùn)動(dòng)減少、攻擊性降低等現(xiàn)象，與人類(lèi)抑郁癥狀有一定相似性。而這一系列的行為均可以在抗抑郁藥物的作用下得到改善，目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了幾種對(duì)該模型具有潛在治療作用的新型化合物。另有研究表明，在習(xí)得性無(wú)助模型中，經(jīng)過(guò)代謝組學(xué)分析發(fā)現(xiàn)動(dòng)物體內(nèi)的谷氨酸鹽、半胱氨酸、脯氨酸等氨基酸的代謝以及糖代謝、脂代謝均有一定紊亂，這為抑郁癥發(fā)病機(jī)制的研究提供了新依據(jù)[23]。習(xí)得性無(wú)助模型藥理學(xué)預(yù)測(cè)性良好、對(duì)常用抗抑郁藥物均具有選擇性和特異性，但習(xí)得性無(wú)助癥狀是否為抑郁癥患者特有尚未被證實(shí)。現(xiàn)常用來(lái)進(jìn)行抗抑郁藥物初步篩選、抑郁癥發(fā)病機(jī)制研究。

2.2.1.3社會(huì)挫敗模型 社會(huì)挫敗模型是指在原生動(dòng)物活動(dòng)范圍內(nèi)多次引入攻擊性和侵略性更強(qiáng)的同一動(dòng)物，使其對(duì)原有動(dòng)物造成一定精神壓力而表現(xiàn)出情緒低落的現(xiàn)象，即相當(dāng)于居住者和入侵者的測(cè)試。在居住-入侵測(cè)試中，居住者會(huì)由于多次被攻擊壓迫而表現(xiàn)出斗爭(zhēng)消極狀態(tài)，主要表現(xiàn)出以社交退縮和快感缺乏為特征的行為。在社會(huì)挫敗模型中，模型動(dòng)物有兩種表現(xiàn)：一種表現(xiàn)出社交回避，被稱(chēng)為易感動(dòng)物；另一種表現(xiàn)正常，被稱(chēng)為彈性小鼠。該模型可以在社會(huì)層面模擬抑郁癥發(fā)病機(jī)制，但其多適用于雄性嚙齒動(dòng)物，而雌性因具有較低的攻擊力較難實(shí)現(xiàn)社會(huì)挫敗?，F(xiàn)常用來(lái)進(jìn)行抗抑郁藥物的研發(fā)。

2.2.1.4早期生活壓力模型 早期生活壓力模型的主要原理是早期生活中的不良事件會(huì)嚴(yán)重影響晚期生命中的精神疾病的發(fā)展，如抑郁癥。母嬰分離是早期應(yīng)激模型之一，對(duì)情感和壓力反應(yīng)具有長(zhǎng)期影響。研究發(fā)現(xiàn)，在出生早期將幼兒和母親分離會(huì)導(dǎo)致幼兒在心理和行為上均會(huì)發(fā)生一些轉(zhuǎn)變，缺乏母體依戀會(huì)誘發(fā)幼小動(dòng)物的下丘腦-垂體-腎上腺軸功能障礙，由于神經(jīng)內(nèi)分泌相關(guān)因子水平的變化，幼年的嚙齒動(dòng)物容易產(chǎn)生行為異常，甚至在成年之后也極易發(fā)生情感紊亂，其產(chǎn)生的抑郁行為可以通過(guò)抗抑郁藥物而有所好轉(zhuǎn)[24]。但該模型所進(jìn)行的雌性實(shí)驗(yàn)少、模型特異性及可信度未得到證實(shí)?，F(xiàn)常用來(lái)進(jìn)行抗抑郁藥物的初步篩選、在成長(zhǎng)過(guò)程中經(jīng)歷早期社會(huì)壓力的個(gè)體成年期抑郁癥的病因機(jī)制研究。

2.2.1.5慢性不可預(yù)知溫和刺激模型 通常單類(lèi)重復(fù)刺激在正常條件下會(huì)引發(fā)適應(yīng)性反應(yīng)，但慢性不可預(yù)知溫和刺激模型可以克服這種適應(yīng)性，并使動(dòng)物產(chǎn)生長(zhǎng)期有效的抑郁樣情緒[25]。該模型是在一段時(shí)間內(nèi)，對(duì)動(dòng)物進(jìn)行一系列重復(fù)且不可預(yù)測(cè)的溫和性刺激，從而誘導(dǎo)動(dòng)物產(chǎn)生一些抑郁樣行為。這些刺激具有如下特征：①?gòu)?qiáng)度溫和，不會(huì)對(duì)動(dòng)物本身產(chǎn)生持久的影響；②發(fā)作較慢，刺激會(huì)持續(xù)數(shù)周[26]，并反復(fù)發(fā)作；③不可預(yù)測(cè)，每個(gè)單獨(dú)的刺激持續(xù)時(shí)間，方式均有所不同。慢性不可預(yù)知溫和刺激模型一旦誘發(fā)大鼠行為改變，將持續(xù)約3個(gè)月，且大多數(shù)抑郁樣行為可以通過(guò)抗抑郁藥物逆轉(zhuǎn)[27]。該模型刺激溫和、可靠性強(qiáng)、具有高度有效性、與人類(lèi)抑郁癥吻合程度高，可以更好地模擬人類(lèi)長(zhǎng)期在各種環(huán)境中受到的各種低水平刺激所引起的反應(yīng)，被認(rèn)為是目前最經(jīng)典的動(dòng)物模型。但其造模時(shí)間長(zhǎng)、工作量大，常用來(lái)研究抑郁癥發(fā)病機(jī)制及抗抑郁藥物作用機(jī)制。

2.2.2藥物造模 藥物誘導(dǎo)模型主要是基于藥物之間的相互作用而產(chǎn)生，以抑郁癥的單胺假說(shuō)和炎癥因子假說(shuō)為基礎(chǔ)，主要用于篩選專(zhuān)一性靶點(diǎn)的抗抑郁藥物。這些模型操作簡(jiǎn)單，周期較短，但可信度低，與人類(lèi)抑郁癥的發(fā)病機(jī)制有顯著差異，因此不能廣泛應(yīng)用，只能用作抗抑郁藥的初步篩選測(cè)定。

2.2.2.1利血平誘導(dǎo)模型 抑郁可引起多種生化指標(biāo)的改變，如單胺代謝物缺乏、炎癥因子水平升高以及血清BDNF水平降低等[28]。因此，通過(guò)改變特定神經(jīng)遞質(zhì)或因子的水平來(lái)建立抑郁癥動(dòng)物模型是可行的。利血平是一種吲哚類(lèi)生物堿，臨床應(yīng)用中發(fā)現(xiàn)其不良反應(yīng)可以導(dǎo)致抑郁狀態(tài)，是首個(gè)用于構(gòu)建抑郁癥模型的藥物。該模型中的抑郁癥狀可以通過(guò)提前服用抗抑郁藥物來(lái)逆轉(zhuǎn)。已有研究表明，利血平誘導(dǎo)的抑郁癥模型對(duì)抗焦慮化合物具有較高的有效性，這對(duì)治療焦慮癥引起的抑郁癥具有潛在意義[29]。該模型造模時(shí)間短、操作簡(jiǎn)單、動(dòng)物痛苦較輕，但其動(dòng)物死亡率高、模型病理過(guò)程與個(gè)體抑郁不一致，常用來(lái)篩選中藥有效治療成分、評(píng)價(jià)藥物療效。研究發(fā)現(xiàn)，利血平誘發(fā)的抑郁癥與雌性大鼠的氟西汀敏感性升高、乙醇攝入量增加有關(guān)，而雄性青春期大鼠則與這種消耗量無(wú)關(guān)[30]。因此，該模型目前也用于探討青春期女性抑郁與飲酒之間的關(guān)系。

2.2.2.2糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)模型 在正常情況下，壓力誘導(dǎo)的下丘腦-垂體-腎上腺軸激活后皮質(zhì)類(lèi)固醇釋放。然而，在糖皮質(zhì)激素水平升高所反映的病理?xiàng)l件下，可能會(huì)發(fā)生腦損傷，如海馬神經(jīng)生成減少[31-32]，CA3中樹(shù)突分支減少等。糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)模型主要指通過(guò)皮下注射外源性皮質(zhì)酮，持續(xù)注射3周，使嚙齒類(lèi)動(dòng)物產(chǎn)生抑郁樣行為[33]。該模型可以使動(dòng)物的活動(dòng)明顯減少，蔗糖偏好程度降低，海馬區(qū)和前額葉皮質(zhì)也發(fā)生了一定變化，但應(yīng)用一定的抗抑郁藥物可以逆轉(zhuǎn)以上抑郁樣行為。然而，外源性皮質(zhì)酮給藥后觀察到的皮質(zhì)酮血漿水平與慢性應(yīng)激后觀察到的皮質(zhì)酮變化并不完全相同，可能原因?yàn)榕c慢性應(yīng)激模型相比，糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)模型可以更穩(wěn)定地提高動(dòng)物體內(nèi)的皮質(zhì)酮水平，從而引發(fā)中樞下丘腦-垂體-腎上腺軸負(fù)反饋調(diào)節(jié)機(jī)制失調(diào)，體現(xiàn)了該模型良好的實(shí)驗(yàn)可控性。此外，該模型還具有簡(jiǎn)單易行、造模周期短等優(yōu)點(diǎn)，但存在一定副作用。

2.2.3手術(shù)造模

2.2.3.1嗅球切除模型 臨床研究表明，抑郁癥患者對(duì)嗅覺(jué)的敏感性顯著降低，其降低程度與癥狀的嚴(yán)重程度有關(guān)[34]。因此，嗅覺(jué)系統(tǒng)的功能障礙與抑郁行為之間存在強(qiáng)烈的聯(lián)系。目前嗅球切除是最常用的手術(shù)造模方法，嗅球位于端腦的前端，常與邊緣系統(tǒng)的相關(guān)功能有關(guān)，對(duì)于情緒、行為以及內(nèi)分泌均有一定影響。因此如果手術(shù)將大鼠的嗅球切除，會(huì)降低被動(dòng)回避反應(yīng)并升高血漿類(lèi)固醇水平，從而導(dǎo)致抑郁樣行為[35]，如快感低下、空間學(xué)習(xí)和記憶障礙、食欲和性欲減退等，應(yīng)激反應(yīng)和攻擊行為會(huì)相應(yīng)增強(qiáng)。同時(shí)，炎癥和皮質(zhì)酮水平升高，5-羥色胺能神經(jīng)傳遞發(fā)生改變，這與抑郁癥患者的神經(jīng)生化機(jī)制改變相一致[36]?？挂钟羲幬镏委熆梢允剐崆蚯谐Ｐ痛笫蟮囊钟粜袨榛謴?fù)正常。嗅球切除模型穩(wěn)定性好、無(wú)藥物交互影響、實(shí)驗(yàn)誤差小。該模型不僅可用于抑郁癥的神經(jīng)生物學(xué)和抗抑郁作用機(jī)制的研究，還常用來(lái)進(jìn)行抗抑郁藥物的二次篩選。

2.2.3.2腦卒中后抑郁模型 腦卒中后抑郁較一般的抑郁癥更為復(fù)雜。腦卒中后抑郁模型由于具有多種病因特征而較難制備，目前應(yīng)用較少。根據(jù)其病理特性，最常使用的為復(fù)合模型[37-38]，即先誘發(fā)腦缺血，然后誘發(fā)抑郁癥，為相應(yīng)的臨床治療奠定了基礎(chǔ)。該模型雖制備過(guò)程復(fù)雜，但對(duì)于肢體癱瘓、行動(dòng)不便的臨床腦卒中患者產(chǎn)生的抑郁樣行為具有較高的還原度，是研究腦卒中后抑郁病理機(jī)制和臨床治療的良好模型[39-40]。

2.2.4遺傳造模 抑郁癥具有很強(qiáng)的遺傳成分，遺傳性抑郁通常與內(nèi)源性基因遺傳突變相關(guān)，因此許多研究試圖通過(guò)改變抑郁癥相關(guān)基因的表達(dá)來(lái)構(gòu)建抑郁癥模型。目前，已經(jīng)建立了許多針對(duì)5-羥色胺能和去甲腎上腺素能系統(tǒng)以及下丘腦-垂體-腎上腺軸調(diào)控隱含基因的轉(zhuǎn)基因品系，有多種模型可以不同程度地模擬人的抑郁癥癥狀，如Flinder Sensitive Line、Wistar-Kyoto和Fawn-Hooded等大鼠模型。此外，通過(guò)轉(zhuǎn)基因或敲除條件基因神經(jīng)遞質(zhì)、受體或轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白來(lái)構(gòu)建小鼠抑郁模型已經(jīng)顯示出良好的構(gòu)建有效性，這些動(dòng)物均表現(xiàn)出對(duì)治療的抵抗性以及壓力的敏感性增加[41]。然而，抑郁癥是一種多基因疾病，基因與環(huán)境因素相互作用，故單個(gè)基因突變的抑郁癥模型無(wú)法完全揭示抑郁癥的病理機(jī)制，且該模型價(jià)格昂貴，因此臨床應(yīng)用受限。

3 抑郁癥動(dòng)物模型行為學(xué)評(píng)價(jià)方法

行為學(xué)方法主要評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物情緒低落、快感缺乏、社交互動(dòng)行為減少甚至絕望等與臨床抑郁癥標(biāo)準(zhǔn)相關(guān)的表現(xiàn)。目前，行為評(píng)估的方法很多：①曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)主要用于評(píng)估實(shí)驗(yàn)動(dòng)物探索新環(huán)境的能力及在新環(huán)境中的焦慮和活動(dòng)情況，將動(dòng)物置于陌生的開(kāi)放場(chǎng)地中使其探索新的環(huán)境，然后分析動(dòng)物在中央?yún)^(qū)域和周?chē)鷧^(qū)域的停留時(shí)間和運(yùn)動(dòng)路程，是一種比較理想的評(píng)價(jià)抑郁情緒的方法。②蔗糖偏好實(shí)驗(yàn)是目前最適于抑郁癥核心癥狀——快感缺失的評(píng)估方法，攝入蔗糖幾乎可以給所有動(dòng)物帶來(lái)愉悅的情緒，蔗糖消耗率的下降反映出動(dòng)物對(duì)獎(jiǎng)勵(lì)性刺激的敏感性降低或缺乏。該實(shí)驗(yàn)通常分為適應(yīng)期和評(píng)估期，在評(píng)估期結(jié)束后計(jì)算蔗糖偏好率，用于對(duì)該模型的評(píng)價(jià)。該模型建立成功的標(biāo)志是，模型組蔗糖消耗量及蔗糖偏好率較對(duì)照組顯著下降[42]。③灑水實(shí)驗(yàn)是將10%蔗糖水噴灑于大鼠背部，連續(xù)噴灑3次，每次2 mL。然后將大鼠放回飼養(yǎng)鼠籠中累積記錄5 min內(nèi)大鼠梳洗背部被噴灑蔗糖水部位的行為時(shí)間。④Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)主要是訓(xùn)練動(dòng)物的位置和空間的識(shí)別和探索能力，將動(dòng)物隨機(jī)放置于水迷宮的不同位置并提供近段線索和遠(yuǎn)端提示，將動(dòng)物導(dǎo)航到隱藏平臺(tái)的最佳路徑。與強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)相比，水迷宮測(cè)試還可以降低誤吸水的風(fēng)險(xiǎn)。⑤強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)、懸尾實(shí)驗(yàn)和新奇環(huán)境誘導(dǎo)食欲減退實(shí)驗(yàn)等既可以作為抑郁癥造模方法，也可以用于評(píng)價(jià)其他抑郁癥模型。其中懸尾實(shí)驗(yàn)被廣泛用于評(píng)估小鼠的行為，但不適用于大鼠，因?yàn)楹笳叩捏w積較大，難以控制。

4 結(jié) 語(yǔ)

抑郁癥是一種復(fù)雜的疾病，影響因素諸多。動(dòng)物模型的建立成為人們研究抑郁癥神經(jīng)生物學(xué)基礎(chǔ)的可行方法之一。一方面，動(dòng)物模型可以闡明抑郁癥的神經(jīng)生物學(xué)機(jī)制以及檢驗(yàn)新的神經(jīng)生物學(xué)假設(shè)，另一方面，根據(jù)現(xiàn)有的抗抑郁藥，人們可以使用動(dòng)物模型來(lái)檢驗(yàn)新的假設(shè)并確定新的靶點(diǎn)，以進(jìn)行更好的針對(duì)性治療。迄今為止，已經(jīng)有十幾種動(dòng)物模型被用于篩選和探尋抗抑郁藥物，雖然現(xiàn)有的抑郁癥動(dòng)物模型存在一些局限性，但其在一定程度上對(duì)于了解抑郁癥的發(fā)病機(jī)制、鑒定抗抑郁藥的新靶標(biāo)及進(jìn)行抗抑郁藥的藥效研究均不可或缺。且對(duì)于研究抑郁癥的特定方面，不同的模型具有不同的優(yōu)勢(shì)。動(dòng)物模型的建立、驗(yàn)證和改進(jìn)在揭示抑郁癥的發(fā)病機(jī)制及藥物研發(fā)中起著關(guān)鍵作用。目前可用的抑郁癥動(dòng)物模型在不斷改進(jìn)，新的突變小鼠和令人關(guān)注的基因靶點(diǎn)不斷被開(kāi)發(fā)和研究。未來(lái)有關(guān)抑郁癥的研究應(yīng)為減少對(duì)藥物反應(yīng)的關(guān)注，更多地關(guān)注于揭示潛在機(jī)制的模型和系統(tǒng)。多種動(dòng)物模型交叉使用，以期深入了解抑郁癥的發(fā)病機(jī)制及抗抑郁藥物的作用機(jī)制，從而為目標(biāo)患者開(kāi)發(fā)出更高效的治療方法。