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        陰道分泌物檢測方法的研究進(jìn)展

        2021-12-02 00:07:39李治清
        今日健康 2021年8期
        關(guān)鍵詞:染色法念珠菌涂片

        李治清

        (武鳴區(qū)婦幼保健院,廣西 南寧,530199)

        陰道炎/陰道病是婦科常見病、多發(fā)病,近年來,隨著生活壓力不斷增加,女性陰道病患病率也隨之上升,因女性的特殊生理結(jié)構(gòu),極易遭受病原微生物的感染,常見包括細(xì)菌、病菌、霉菌、衣原體、支原體等感染,促使外陰引起灼痛、瘙癢等臨床癥狀,嚴(yán)重時可造成不孕不育,對患者及其家庭帶來極大程度的影響[1]。陰道病誘發(fā)因素較多,且極易復(fù)發(fā),故盡早診斷、治療至關(guān)重要。目前針對陰道病患者,臨床多對患者陰道分泌物進(jìn)行檢測。陰道分泌物主要是女性生殖系統(tǒng)分泌的液體,因正常婦女陰道中存在乳酸桿菌可酵解而引起乳酸,陰道內(nèi)pH 值保持在3.8~4.4 之間,在此環(huán)境可有效抑制細(xì)菌生長、繁殖,以此達(dá)到自凈功能,一旦機(jī)體防御機(jī)能遭受破壞,則極易引發(fā)病原菌感染,故對陰道分泌物進(jìn)行檢測至關(guān)重要[2-3]。陰道分泌物存在多種實驗室檢測技術(shù),本文主要介紹各檢測技術(shù)的方式與特點(diǎn),以便選擇有效、精準(zhǔn)的方式檢測、診斷疾病。

        1.直接涂片法

        陰道分泌物最常見、最傳統(tǒng)的檢測方式是濕片懸滴法與改進(jìn)后效果更為顯著的甲苯胺藍(lán)鹽水、稀堿、加熱三步法,以及超高倍鏡檢測法[4]。上述檢測方式具有操作簡便、經(jīng)濟(jì)、精準(zhǔn)等優(yōu)點(diǎn),在一張涂片上能夠同時進(jìn)行真菌、滴蟲、白細(xì)胞等多項常規(guī)檢測,適用于基層醫(yī)療單位與初診、體檢篩查等,檢測溫度環(huán)境一般為25~42℃[5]。但該檢測方式存在一定的局限性,對醫(yī)師要求較高,受標(biāo)本、檢測次數(shù)等多種因素影響,可能獲得不同的結(jié)果;同一患者因不同醫(yī)師取材,也可能獲取不同結(jié)果,故采取上述檢測方式也存在一定的漏檢率、誤診率[6]。

        2.染色法

        染色法檢測靈敏度較直接涂片法高,具有能夠在1 張涂片上同時實施多項檢測,且不受保溫措施限制,污染程度較小,具有準(zhǔn)確、操作方式簡便、檢出率高等優(yōu)點(diǎn)。其中包括革蘭染色、白帶多功能染色(BTR)、多項檢測迅速染色技術(shù)(CTB)等。

        2.1 革蘭染色

        革蘭染色檢測具有操作方式簡便、用時短、費(fèi)用低等優(yōu)點(diǎn),在臨床已得到廣泛應(yīng)用。多項研究顯示,革蘭染色法能夠顯著提升陰道分泌物真菌檢測的檢出率,效果較佳。在對真菌進(jìn)行檢驗過程中,革蘭染色法還可對淋球菌、加德納菌等致病菌進(jìn)行檢測,具有一定的敏感性[7]。肖征、章京楠、曹正[8]等人研究顯示,對120 例陰道炎患者給予革蘭氏染色法檢測,結(jié)果顯示,其檢測靈敏度、特異性、準(zhǔn)確率分別為87.07%、100.00%、87.50%。

        2.2 BTR

        BTR 主要是依據(jù)白帶病原具有不同的形態(tài)特點(diǎn),利用具有多種功能的染色液作染色檢查的一種實用性較強(qiáng)的形態(tài)學(xué)檢測技術(shù)。BTR 染色液主要由R1、R2 液組成,染白帶涂片,能夠在一張涂片上同時進(jìn)行淋球菌、霉菌、滴蟲等多項檢測,具有操作方式簡便、染色形態(tài)清晰與檢出率高等優(yōu)點(diǎn),可為臨床診斷、治療等提供可靠的依據(jù)[9]。

        2.3 CTB

        CTB 染液主要是由R1、R2 組成,因其染色液的效能可使病原體形態(tài)特點(diǎn)更為清晰顯示出,可實施多項檢查,同時還可進(jìn)行陰道鱗狀細(xì)胞分類計數(shù),對卵巢功能進(jìn)行檢測,具有操作方式簡便,迅速、檢出率高等優(yōu)點(diǎn)[10]。

        3.培養(yǎng)法

        培養(yǎng)法是診斷細(xì)菌性陰道病、滴蟲性陰道炎的“金標(biāo)準(zhǔn)”,具有一定的高敏感性與高特異性,需要特定的試驗環(huán)境與材料。其中包括普通細(xì)菌培養(yǎng)法、快速培養(yǎng)法、念珠菌顯色培養(yǎng)基法(CA)等。楊潔、陳海迎、鄭建瓊[11]等人研究顯示,對961 例孕婦采取陰道下段1/3 處及肛門分泌物實施細(xì)菌培養(yǎng)檢測,結(jié)果顯示,細(xì)菌培養(yǎng)法檢測的靈敏度、特異度、約登指數(shù)、陰性似然比分別為0.32、1.00、0.32、0.6。而快速培養(yǎng)法檢測時間僅需2.5h,也存在一定的靈敏度、特異度。CA 自20 世紀(jì)90年代由法國研究者進(jìn)行開發(fā),CA 的原理主要是依據(jù)酶底物法,經(jīng)過顯色來區(qū)別不同念珠菌,在25~28℃環(huán)境中培養(yǎng)24~48h 后,白色念珠菌可呈現(xiàn)出藍(lán)綠色;熱帶念珠菌呈現(xiàn)藍(lán)灰色或鐵藍(lán)色;光滑念珠菌呈現(xiàn)紫色;其他念珠菌顯示白色,細(xì)菌被抑制。CA優(yōu)點(diǎn)是能夠直接使用陰道分泌物標(biāo)本,僅需24~48h 培養(yǎng)即可診斷外陰陰道念珠菌?。╒VC),同時鑒別引起VVC 常見念珠菌[12]。

        4.分子生物學(xué)

        近年來,隨著分子生物學(xué)逐漸發(fā)展,微生物的分類鑒定從表型特征鑒定深化為基因特征鑒定。其中基于16SrRNA 基因聚合酶反應(yīng)(PCR)擴(kuò)增是臨床檢測陰道微生物最常見、主要方式[13]。曹敬榮、高世超、陳典典[14]等人研究顯示,對12 株菌株使用PCR 擴(kuò)增其16SrRNA 基因,測序后實施BLAST 比對鑒定菌種,結(jié)果顯示,12 株菌經(jīng)PCR 擴(kuò)增均可獲得陽性條帶,均鑒定到種。由上述得出,分子生物學(xué)方式檢測促使檢測到的陰道微生物種類更為全面、更準(zhǔn)確,檢出率相比其他檢測方式高。借助分子生物學(xué)方式能夠研究不同微生物對陰道微生物作用,并掌握各生殖道感染性病癥,進(jìn)而為臨床診斷、治療提供有效理論依據(jù)。

        5.小結(jié)

        陰道分泌物檢測是臨床診斷婦科疾病的,主要方式之一,陰道分泌物檢測方式較多,不同方式存在不同的特點(diǎn)。其中直接涂片、染色法作為臨床傳統(tǒng)檢測方式,具有直觀以及經(jīng)濟(jì)等特點(diǎn),常在臨床譽(yù)為“金標(biāo)準(zhǔn)”,但操作方式較為復(fù)雜、時間較長。培養(yǎng)法具有較高的靈敏度、特異性;分子生物學(xué)作為目前臨床研究的重點(diǎn)內(nèi)容,具有鑒定準(zhǔn)確、設(shè)備昂貴、檢測費(fèi)用高等特點(diǎn),故僅具有科研與確診意義。因此在臨日后臨床研究中,可進(jìn)一步增加樣本數(shù)、引用客觀性指標(biāo)以及延長研究時間等,以深入研究陰道分泌物檢測方式。

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