張 婧

（遼寧省阜新市中醫(yī)醫(yī)院檢驗(yàn)科，遼寧 阜新 123000）

臨床上對(duì)血常規(guī)檢驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生影響的因素多種多樣，在進(jìn)行血常規(guī)檢驗(yàn)的過(guò)程中可能會(huì)因?yàn)槭軝z者的病情、藥物治療方式、血液采集部位、血液采集方法、血液采集者的操作規(guī)范性、抗凝劑的使用狀況、血液靜置時(shí)間、血液的混勻方式、檢測(cè)儀器、檢測(cè)試劑、檢驗(yàn)人員的操作規(guī)范性、環(huán)境因素等諸多因素產(chǎn)生影響，導(dǎo)致最終血液檢驗(yàn)結(jié)果不準(zhǔn)確[1]。對(duì)于檢驗(yàn)結(jié)果總體的誤差主要源于對(duì)各個(gè)因素的誤差，所以在檢驗(yàn)的過(guò)程中需要充分的對(duì)多種因素加以考慮，為了獲取更加準(zhǔn)確的檢驗(yàn)結(jié)果，在整個(gè)檢驗(yàn)過(guò)程當(dāng)中需要最大限度的對(duì)各個(gè)環(huán)節(jié)產(chǎn)生的誤差加以控制，這是尤為關(guān)鍵性的一項(xiàng)工作[2]。在諸多的因素當(dāng)中根據(jù)血液標(biāo)本的混勻后靜置時(shí)間進(jìn)行評(píng)價(jià)可得出，不同的時(shí)間可能會(huì)導(dǎo)致檢驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn)誤差[3]。本文針對(duì)于此主要研究在進(jìn)行血液標(biāo)本檢驗(yàn)的時(shí)候混勻靜置時(shí)間對(duì)血液檢驗(yàn)結(jié)果的影響，同時(shí)將主要研究情況進(jìn)行如下的論述。

1 資料與方法

1.1 研究?jī)x器 本文調(diào)查過(guò)程中所使用的儀器主要是日本的西森美康血細(xì)胞分析儀、迪奧康計(jì)時(shí)器、西森美康血細(xì)胞分析儀相配套的稀釋液、清洗液和溶血素。所應(yīng)用的校準(zhǔn)品和質(zhì)控品均在有效期之內(nèi)，并且根據(jù)規(guī)定放置在2～8 ℃的環(huán)境當(dāng)中冷藏保存。西森美康相配套的校準(zhǔn)品，第1批次校準(zhǔn)品的RBC為5.5×1012g/L，Hb為126.5 g/L，WBC為6.89×109g/L，PLT為124×109g/L；第2批次校準(zhǔn)品的RBE為4.77×1012g/L，Hb為138.1 g/L，WBC為8.78×109g/L，PLT為126×109g/L。

1.2 方法 在進(jìn)行檢驗(yàn)的過(guò)程當(dāng)中控制操作環(huán)境溫度為25 ℃，并將濕度維持為70%，將電源等相關(guān)的指標(biāo)均穩(wěn)定在標(biāo)準(zhǔn)范圍之內(nèi)。使儀器能夠正常穩(wěn)定的運(yùn)行，近1個(gè)月之內(nèi)室內(nèi)質(zhì)控在控。通過(guò)校準(zhǔn)品的應(yīng)用，在進(jìn)行儀器校準(zhǔn)以后再選擇另一個(gè)批號(hào)的校準(zhǔn)品。主要應(yīng)用5支校準(zhǔn)品，每一支校準(zhǔn)品2 mL，分別標(biāo)注標(biāo)本1～5，并且將混勻后靜置時(shí)間設(shè)置為0、10、20、30、40 s，分別在相對(duì)應(yīng)的時(shí)間段對(duì)標(biāo)本進(jìn)行10次檢驗(yàn)，每次檢驗(yàn)均通過(guò)采用采樣針插入試管距離底部大約5 mm的部位，對(duì)于所有檢驗(yàn)標(biāo)本當(dāng)中10次檢驗(yàn)結(jié)果中的WBC、RBC、Hb和PLT等相關(guān)數(shù)據(jù)的均值等指標(biāo)進(jìn)行檢驗(yàn)，并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)和記錄，以方便進(jìn)行相關(guān)的比較[4]。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 對(duì)本文的所有標(biāo)本、資料和數(shù)據(jù)均導(dǎo)入統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件IBM SPSS25.0當(dāng)中進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)和分析。同時(shí)選擇采用[n（%）]為主要的表達(dá)方式對(duì)所有的計(jì)數(shù)資料進(jìn)行表示，并通過(guò)χ2對(duì)所有的計(jì)數(shù)值進(jìn)行驗(yàn)證性分析；選擇采用以（）為主要的表達(dá)方式，對(duì)所有的計(jì)量資料進(jìn)行表示，同時(shí)通過(guò)采用t值對(duì)所有的計(jì)量值進(jìn)行驗(yàn)證性分析；等級(jí)資料選擇采用以Z值為主的表達(dá)方式進(jìn)行表示，并且以秩和檢驗(yàn)和Ridit分析的方法進(jìn)行驗(yàn)證性分析；數(shù)據(jù)和數(shù)據(jù)之間的差異采用P＜0.05表示存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，并說(shuō)明數(shù)據(jù)之間的統(tǒng)計(jì)學(xué)存在差異性。

2 結(jié)果

混勻以后靜置時(shí)間為0 s，檢驗(yàn)所得的結(jié)果的相關(guān)參數(shù)值表現(xiàn)最低，單組變異系數(shù)最大，和靶值存在最大的偏差，P＜0.05；EBC和Hb兩項(xiàng)指標(biāo)在混勻靜置10 s和20 s，檢測(cè)所得的結(jié)果無(wú)明顯差異，單組變異系數(shù)較小，和靶值的偏差最小，P＞0.05；隨著靜置時(shí)間延長(zhǎng)，各項(xiàng)值會(huì)存在增高趨勢(shì)，并且和靶值的偏差逐漸變大；WBC與PLT在混勻以后靜置的所有時(shí)間段當(dāng)中檢測(cè)結(jié)果的單組均值和變異系數(shù)均無(wú)明顯差異，和靶值的偏差均相對(duì)較小，P＞0.05。見表1。

表1 所有標(biāo)本在混勻以后不同定制時(shí)間檢驗(yàn)的結(jié)果（）

表1 所有標(biāo)本在混勻以后不同定制時(shí)間檢驗(yàn)的結(jié)果（）

注：所有數(shù)據(jù)當(dāng)中的對(duì)應(yīng)靜止時(shí)間和靶值的相對(duì)偏差均為檢驗(yàn)均值和靶值的差值比上靶值的百分比。

3 討論

血常規(guī)檢驗(yàn)在臨床上是比較常見的一個(gè)檢驗(yàn)項(xiàng)目，主要包括檢驗(yàn)血液的白細(xì)胞、血小板、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)，同時(shí)也對(duì)血紅蛋白水平等相關(guān)的指標(biāo)進(jìn)行檢查，這能夠?qū)εR床的各種病癥和身體不適癥狀加以檢驗(yàn)，可以提供快速、準(zhǔn)確、可靠的數(shù)據(jù)支持。

通過(guò)對(duì)本文所得的試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析可看出在混勻靜置即可檢驗(yàn)的時(shí)候，血常規(guī)的4項(xiàng)參數(shù)的相對(duì)均值明顯表現(xiàn)最低，而且變異系數(shù)也最大，和靶值之間的偏差表現(xiàn)最大[5]。對(duì)此進(jìn)行分析能夠得出，這主要是因?yàn)樵诨靹蛞院罅⒓礄z驗(yàn)的時(shí)候，血液標(biāo)本在混勻過(guò)程中或多或少可能產(chǎn)生了一定數(shù)量的微小氣泡，這些氣泡會(huì)占據(jù)一定的體積空間，進(jìn)而使得實(shí)際的檢驗(yàn)血量明顯不足，進(jìn)而導(dǎo)致檢驗(yàn)所得的結(jié)果均值表現(xiàn)最低，且靶值偏差最大[6]。除此以外，還有部分原因每次混勻以后所產(chǎn)生的微量氣泡不盡相同，導(dǎo)致微小氣泡占據(jù)的體積空間不同，使得檢驗(yàn)結(jié)果不具備有較高的重復(fù)性，使得檢測(cè)的結(jié)果變異系數(shù)表現(xiàn)明顯偏大。在混勻以后放置10～20 s再進(jìn)行檢驗(yàn)，所得4項(xiàng)參數(shù)均值和靶值結(jié)果最接近，因此檢驗(yàn)結(jié)果也最準(zhǔn)確，變異系數(shù)最小，能夠說(shuō)明在這一時(shí)間段當(dāng)中標(biāo)本狀態(tài)最為穩(wěn)定和均勻。這主要是因?yàn)樵诨靹蚝箪o置10～20 s，在混勻的時(shí)候所產(chǎn)生的微小氣泡會(huì)因?yàn)闃?biāo)本靜置而逐漸上浮，距離試管底部大約5 mm的血液樣本在這一時(shí)間段當(dāng)中的氣泡基本上完全消失，所以通過(guò)采樣針在這一部位的樣本進(jìn)行采集，檢驗(yàn)其均勻性和穩(wěn)定性表現(xiàn)最佳，所得的血液檢驗(yàn)也最為標(biāo)準(zhǔn)和準(zhǔn)確。因此在這一階段對(duì)相關(guān)的參數(shù)進(jìn)行檢測(cè)的結(jié)果變異系數(shù)和靶值的偏差最小[7]。隨著混勻后靜置時(shí)間的不斷延長(zhǎng)至30～40 s時(shí)，因血細(xì)胞比密會(huì)對(duì)其產(chǎn)生一定的影響，RBC的比密最大，導(dǎo)致其逐漸沉降，而且沉降速度會(huì)大大增快，因此在這一時(shí)刻大約距離血管底部5 mm部位的RBC和Hb濃度會(huì)逐漸增高，所以檢驗(yàn)結(jié)果會(huì)存在均值逐漸增大的表現(xiàn)，和靶值的偏差也表現(xiàn)出逐漸增大的關(guān)聯(lián)[8]。在同一時(shí)間段RBC的沉降速度大致相同，所以在這一階段所檢驗(yàn)出的RBC和Hb的變異系數(shù)相對(duì)較小。再加上WBC和PLT的比密相對(duì)RBC而言更小，所以和RBC相比，隨著混勻以后的靜置時(shí)間不斷延長(zhǎng)，WBC和OLT也會(huì)表現(xiàn)出逐漸上浮的趨勢(shì)，但是上浮的速度不及RBC下沉速度迅速，因此在靜置以后30～40 s一般處于相對(duì)比較穩(wěn)定的狀態(tài)，所以這一時(shí)段對(duì)于WBC和PLT檢測(cè)結(jié)果所得的準(zhǔn)確性和變異系數(shù)也無(wú)明顯的差異[9]。但是隨著靜置時(shí)間的延長(zhǎng)，在進(jìn)行采樣的過(guò)程中距離試管底部約5 mm的部位的標(biāo)本也會(huì)隨著WBC與PLT逐漸表現(xiàn)為上浮的趨勢(shì)，并且在距離試管底部約5 mm的部位相關(guān)檢驗(yàn)值會(huì)表現(xiàn)出逐漸偏低的表現(xiàn)[10]。因?yàn)樵囼?yàn)所研究主要是混勻后靜置時(shí)間對(duì)于血常規(guī)結(jié)果的影響，所以本文表明在靜置30～40 s時(shí)，已經(jīng)對(duì)于血液標(biāo)本中的RBC和Hb的檢測(cè)產(chǎn)生了重要影響，之后相關(guān)時(shí)間段的檢驗(yàn)工作有無(wú)研究?jī)r(jià)值，未進(jìn)行進(jìn)一步試驗(yàn)探討。

需要注意的是，現(xiàn)如今市面上很多全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀在進(jìn)行血細(xì)胞分析的時(shí)候都會(huì)執(zhí)行混勻后立即進(jìn)行檢驗(yàn)的情況，通過(guò)本文調(diào)查能夠得出，在混勻后靜置0 s進(jìn)行檢驗(yàn)，存在不確定性，會(huì)對(duì)整體的檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性產(chǎn)生影響。所以在臨床檢驗(yàn)過(guò)程中獲取準(zhǔn)確的檢驗(yàn)結(jié)果，需要最大限度的強(qiáng)化各個(gè)環(huán)節(jié)的質(zhì)量控制工作。在諸多因素的影響之下，標(biāo)本混勻后靜置時(shí)間對(duì)于檢驗(yàn)結(jié)果的影響存在規(guī)律和可控性，需要對(duì)此加以控制。通過(guò)本文的調(diào)查，希望能夠得到相關(guān)檢驗(yàn)工作者的重視，特別是對(duì)相關(guān)儀器做好校準(zhǔn)和性能評(píng)價(jià)能對(duì)臨床檢驗(yàn)工作提供科學(xué)指導(dǎo)。綜上所述，臨床的血常規(guī)標(biāo)本在檢測(cè)之前混勻靜置時(shí)間需要控制在10～20 s，有助于對(duì)各項(xiàng)計(jì)算參數(shù)的穩(wěn)定性加以保持，可以提升檢測(cè)的準(zhǔn)確性。