何蓉，易靜，何小清，李君怡

（萍鄉(xiāng)市婦幼保健院病理科，江西 萍鄉(xiāng) 337000）

子宮內(nèi)膜癌是女性生殖系統(tǒng)常見(jiàn)惡性腫瘤之一，其病因尚未明確，多認(rèn)為與生活方式、遺傳等因素密切相關(guān)，而隨著生活模式的轉(zhuǎn)變，該病發(fā)生率呈逐年升高的趨勢(shì)[1-2]。錯(cuò)配修復(fù)（MMR）蛋白是修復(fù)DNA 錯(cuò)配重要因子，可糾正DNA 復(fù)制過(guò)程中出現(xiàn)的錯(cuò)誤堿基對(duì)，維持基因組織穩(wěn)定性與完整性，預(yù)防基因突變，抑制腫瘤產(chǎn)生[3]。MMR蛋白缺失對(duì)推進(jìn)子宮內(nèi)膜癌疾病發(fā)展具有重要意義，但該觀點(diǎn)尚未得到臨床證實(shí)。基于此，本研究旨在探討子宮內(nèi)膜癌組織中MMR蛋白表達(dá)缺失的臨床意義，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 回顧性分析本院2016 年2 月至2019 年12月收治的62例子宮內(nèi)膜癌患者的臨床資料，年齡32～58歲，平均年齡（43.26±3.24）歲；其中腫瘤浸潤(rùn)至黏膜內(nèi)23 例，腫瘤浸潤(rùn)至淺肌層26例，腫瘤浸潤(rùn)至深肌層13例；無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移59 例，伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移3 例；FIGO 分期：Ⅰ期29 例，Ⅱ期17例，Ⅲ期11例，Ⅳ期5例；高分化子宮內(nèi)膜癌37例，中分化子宮內(nèi)膜癌16例，低分化子宮內(nèi)膜癌9例?；颊呔鶎?duì)本研究知情同意并自愿簽署知情同意書(shū)；本研究經(jīng)本院倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)。納入標(biāo)準(zhǔn)：均經(jīng)手術(shù)治療，且經(jīng)手術(shù)病理確診；術(shù)前未應(yīng)用激素類藥物；臨床資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：嚴(yán)重心、肝、腎等重要臟器功能不全；合并其他惡性腫瘤；合并感染性疾?。徊溉槠诨蛉焉锲谂?；凝血功能障礙。

1.2 方法 選取患者的石蠟病理組織，連續(xù)切取厚度為4 μm 的薄片，應(yīng)用Envision 法進(jìn)行免疫組化；將石蠟切片脫蠟至水，應(yīng)用PBS 液進(jìn)行沖洗后，采用pH 9.0 的EDTA 進(jìn)行抗原修復(fù)；修復(fù)后將組織切片置于3%H2O2水中，于室溫下孵育10 min后，應(yīng)用PBS液進(jìn)行沖洗；于切片組織上滴加正常血樣血清工作液，在室溫環(huán)境下孵育20 min后，傾去液體，并分別滴加鼠抗人MLH1單克隆抗體、鼠抗人MSH2單克隆抗體、鼠抗人MSH6單克隆抗體、鼠抗人PMS2單克隆抗體，于4 ℃環(huán)境下孵育過(guò)夜后，應(yīng)用PBS 液清洗；添加辣根酶標(biāo)記鏈霉卵白素工作液，于37 ℃環(huán)境下孵育15 min 后，應(yīng)用PBS 液清洗；DAB 顯色后，應(yīng)用自來(lái)水清洗，并以蘇木素對(duì)細(xì)胞進(jìn)行復(fù)染，采用中性樹(shù)膠封固切片。免疫組化試劑盒及MLH1、MSH2、MSH6、PMS2 均選自福州邁新生物技術(shù)開(kāi)發(fā)有限公司。

1.3 診斷標(biāo)準(zhǔn) MMR蛋白陽(yáng)性：細(xì)胞核明確著色；MMR蛋白陰性：細(xì)胞核不著色；陽(yáng)性對(duì)照：正常子宮內(nèi)膜腺上皮細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞、間質(zhì)細(xì)胞、淋巴細(xì)胞MMR蛋白著色情況。

1.4 觀察指標(biāo) 觀察MMR蛋白在病理組織中的表達(dá)情況，并分析MMR蛋白表達(dá)缺失與不同年齡、病理類型子宮內(nèi)膜癌關(guān)系。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)數(shù)資料用[n（%）]表示，比較采用χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 MMR 蛋白在子宮內(nèi)膜癌中表達(dá)情況 62 例患者病理組織中，MMR 蛋白表達(dá)缺失率為29.03%（18/62），其他子宮內(nèi)膜癌組織MMR蛋白表達(dá)正常。

2.2 MMR蛋白在不同年齡、病理類型子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá)情況 MMR蛋白表達(dá)缺失在不同年齡段子宮內(nèi)膜癌中比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；MMR蛋白表達(dá)缺失在不同肌瘤浸潤(rùn)深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、FIGO 分期、腫瘤分化程度子宮內(nèi)膜癌中比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)表1。

表1 MMR蛋白在不同年齡、病理類型子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá)情況[n（%）]Table 1 The expression of MMR protein in endometrial cancer of different ages and pathological types[n(%)]

3 討論

子宮內(nèi)膜癌是女性常見(jiàn)及多發(fā)的惡性腫瘤，好發(fā)于圍絕經(jīng)期或絕經(jīng)后女性，具有較高病發(fā)率及致死率，嚴(yán)重影響女性身心健康，甚至威脅生命安全[4]。有研究顯示，伴有林奇綜合征家族史女性子宮內(nèi)膜癌發(fā)病率風(fēng)險(xiǎn)高達(dá)60%，而林奇綜合征是由MMR 蛋白缺失導(dǎo)致的常染色體顯性遺傳性疾病，因此，明確MMR蛋白缺失與子宮內(nèi)膜癌病情發(fā)展關(guān)系，對(duì)臨床診治具有重要意義[5-6]。

本研究結(jié)果顯示，62例子宮內(nèi)膜癌患者病理組織中，MMR蛋白表達(dá)缺失率為29.03%，且MMR蛋白表達(dá)缺失在不同年齡段子宮內(nèi)膜癌中比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，在不同肌瘤浸潤(rùn)深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、FIGO分期、腫瘤分化程度子宮內(nèi)膜癌中比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），表明MMR蛋白缺失與子宮內(nèi)膜癌患者年齡無(wú)關(guān)，但在腫瘤浸潤(rùn)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、疾病分期、腫瘤分化程度中具有重要作用[7-8]。分析原因?yàn)椋琈MR蛋白于DNA修復(fù)過(guò)程中具有重要作用，主要以復(fù)合物形式修復(fù)生理功能，復(fù)合物主要分為MutSα、MutSβ兩種，其中MutSα主要由MSH6、MSH2組成，其兩者可結(jié)合MLH1、PMS2復(fù)合物，修復(fù)單堿基錯(cuò)配，MutSβ主要由MSH2、MSH3組成，其兩者結(jié)合MLH1、PMS2復(fù)合物后，可修復(fù)DNA大缺失或突變環(huán)[9-10]。在關(guān)鍵調(diào)節(jié)途徑中，若DNA錯(cuò)配修復(fù)功能丟失，則易導(dǎo)致調(diào)節(jié)途徑丟失調(diào)節(jié)功能，進(jìn)而影響正常細(xì)胞生長(zhǎng)與分裂，促進(jìn)腫瘤形成與發(fā)展。而MMR蛋白丟失率越高，則子宮內(nèi)膜腫瘤發(fā)展速度越快，進(jìn)而浸潤(rùn)深度、腫瘤分期越高，分化程度越低，且多伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況[11-12]。

有研究[13]顯示，隨著年齡的增加，MMR蛋白缺失率也隨之升高，故在不同年齡子宮內(nèi)膜癌患者中，MMR蛋白缺失情況比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但本研究選取最大年齡患者僅為58歲，故難以證實(shí)該研究結(jié)論，臨床仍需擴(kuò)大選取患者年齡范圍，以探討MMR蛋白表達(dá)情況與患者年齡關(guān)系。

綜上所述，MMR 蛋白在深肌層浸潤(rùn)、高FIGO 分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、低分化子宮內(nèi)膜癌組織中表達(dá)缺失率較高，對(duì)推進(jìn)子宮內(nèi)膜癌疾病發(fā)展具有重要作用，建議臨床定期檢測(cè)子宮內(nèi)膜癌患者M(jìn)MR蛋白表達(dá)情況。