史玲玲 董 林

（河南省三門(mén)峽市中心醫(yī)院醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)科，河南三門(mén)峽 472000）

艾滋病是全球關(guān)注的傳染病，目前并無(wú)確切有效的根治方案，患者在感染人類免疫缺陷病毒（HIV）后病毒侵襲T 淋巴細(xì)胞，造成細(xì)胞免疫損傷，免疫系統(tǒng)破壞后可發(fā)生條件致病菌感染及各類惡性腫瘤，盡早診斷疾病有助于臨床治療方案的擬定，早期進(jìn)行疾病干預(yù)，控制二次傳播。臨床艾滋病患者的診斷主要依據(jù)《全國(guó)艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范》[1]，確定患者發(fā)生了HIV 感染的實(shí)驗(yàn)室判斷依據(jù)為血清存在HIV 抗體，篩查陽(yáng)性者經(jīng)過(guò)確證試驗(yàn)后方可下達(dá)臨床陽(yáng)性報(bào)告，才能進(jìn)行下一步的治療、隨訪等工作?？贵w出現(xiàn)表明患者一定存在HIV 感染，但艾滋病患者HIV 抗體形成需要時(shí)間，抗體檢測(cè)可出現(xiàn)漏診；HIV 病毒的RNA 較抗體先出現(xiàn)，此時(shí)可應(yīng)用PCR-熒光法進(jìn)行病毒載量的檢測(cè)，以判斷是否發(fā)生了HIV 感染，降低窗口期的漏診率，但核酸檢測(cè)推廣難度較大，現(xiàn)以100 例艾滋病確診患者為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，進(jìn)行以上兩種檢測(cè)方法的優(yōu)勢(shì)分析，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料：收集2017 年1 月至2020 年2 月已經(jīng)確診為HIV 感染的艾滋病患者為研究對(duì)象，以回顧性研究方式進(jìn)行臨床資料整合與分析，其中72 例患者為初次抗體陽(yáng)性但確證試驗(yàn)（免疫印跡法試驗(yàn)）不確定，后經(jīng)二次隨訪、艾滋病生物樣本庫(kù)確診陽(yáng)性，結(jié)合臨床癥狀及相關(guān)檢查判斷為艾滋病早期感染者，取其首次血樣為實(shí)驗(yàn)進(jìn)行對(duì)象；通過(guò)艾滋病疫情網(wǎng)絡(luò)直報(bào)系統(tǒng)獲得28 例艾滋病感染中晚期患者血樣，且CD4+淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)<50 個(gè)/mL[2]，此28 例患者均有艾滋病中晚期相關(guān)癥狀。100 例患者中男性70 例，女性30 例；年齡19～66 歲，平均（46.45±6.35）歲。

1.2 方法：對(duì)所有患者血樣進(jìn)行篩查試驗(yàn)、確證試驗(yàn)、CD4+淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)檢測(cè)及核酸檢測(cè)?？贵w檢測(cè)采用酶聯(lián)免疫試驗(yàn)法，選擇第四代HIV ELISA 試劑，快速診斷試劑則為雅培HIV 硒標(biāo)試劑；確證試驗(yàn)為免疫印跡試驗(yàn)；流式細(xì)胞儀及相關(guān)試劑完成CD4+淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)檢測(cè)；核酸檢測(cè)應(yīng)用核酸序列擴(kuò)增試驗(yàn)技術(shù)及配套試劑進(jìn)行檢測(cè)。

1.3 觀察指標(biāo)：比較兩種檢測(cè)方法對(duì)于早期及中晚期艾滋病患者病毒感染準(zhǔn)確性，并分析兩種檢測(cè)方式的診斷效能。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析：運(yùn)用SPSS 22.0 軟件進(jìn)行處理，診斷準(zhǔn)確性采用百分比表示，采用χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩種檢測(cè)方法對(duì)于不同時(shí)期艾滋病患者病毒感染準(zhǔn)確性的比較：核酸檢測(cè)對(duì)早期艾滋病患者病毒感染的診斷準(zhǔn)確性為97.22%，顯著高于抗體檢測(cè)診斷準(zhǔn)確性86.11%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。中晚期艾滋病患者病毒感染抗體檢測(cè)診斷準(zhǔn)確性92.86%，核酸檢測(cè)診斷準(zhǔn)確性為82.14%，兩者對(duì)比不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），詳見(jiàn)表1。

表1 兩種檢測(cè)方法對(duì)于不同時(shí)期艾滋病患者病毒感染準(zhǔn)確性比較

2.2 兩組診斷效能比較：在艾滋病診斷中核酸檢測(cè)的曲線下面積最大，明顯高于抗體檢測(cè)診斷，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），詳見(jiàn)表2。

表2 兩組診斷效能比較 （%）

3 討論

機(jī)體在感染HIV 后發(fā)生的疾病為艾滋病，該病具有傳染性，患者自身表現(xiàn)為細(xì)胞免疫缺陷引起的各類并發(fā)癥。HIV 為逆轉(zhuǎn)錄病毒，并具有攜帶RNA形式遺傳信息，人類在感染此病毒后，病毒RNA 基因組通過(guò)病毒編碼產(chǎn)生DNA 并與宿主的細(xì)胞DNA 進(jìn)行整合，從而病毒可長(zhǎng)時(shí)間潛伏于人體并不產(chǎn)生癥狀，部分患者在10 年內(nèi)逐漸發(fā)展為艾滋病患者[3]，而艾滋病患者盡早的接受抗病毒治療對(duì)于其機(jī)體免疫功能的恢復(fù)及HIV 水平的控制均有積極意義，因此早期準(zhǔn)確的診斷HIV 病毒感染是艾滋病患者接受針對(duì)性干預(yù)治療的前提。無(wú)癥狀期間HIV 的感染診斷主要依靠臨床實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)，我國(guó)HIV 檢測(cè)流程基本分為篩查階段及復(fù)檢確證階段，篩查陽(yáng)性的病例中存在假陽(yáng)性情況，保證復(fù)檢準(zhǔn)確性是臨床有序干預(yù)艾滋病患者的證據(jù)?？贵w檢測(cè)與核酸檢測(cè)均屬于我國(guó)艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范中的初篩陽(yáng)性樣本補(bǔ)充試驗(yàn)內(nèi)容，可規(guī)范并未規(guī)定具體哪一種檢測(cè)手段為補(bǔ)充試驗(yàn)方法，合理應(yīng)用抗體檢測(cè)及核酸檢測(cè)對(duì)HIV 感染確診有重要意義。

酶聯(lián)免疫試驗(yàn)聯(lián)合檢測(cè)是抗體檢測(cè)方法中的一種，隨著醫(yī)療技術(shù)的進(jìn)步此種檢測(cè)方法發(fā)展到第四代，血清轉(zhuǎn)換窗口期較第三代酶聯(lián)免疫試驗(yàn)縮短4～8d[4]，大大提高了檢測(cè)靈敏性、準(zhǔn)確性及特異性；HIV 抗體形成后會(huì)一直存在，且隨疾病進(jìn)展艾滋病患者機(jī)體抵抗力嚴(yán)重下降，HIV 病毒“復(fù)蘇”大量復(fù)制，病毒載量持續(xù)增加，抗體檢測(cè)特異性、靈敏性更高，因此臨床將抗體檢測(cè)作為實(shí)驗(yàn)室診斷HIV 感染的金標(biāo)準(zhǔn)，但是有研究表明HIV 感染窗口期或急性感染者抗體檢測(cè)（特別是免疫印跡法）有概率出現(xiàn)陰性或不確定[5]，潛在感染者得不到及時(shí)診斷，阻礙了艾滋病防治工作的有效開(kāi)展。核酸檢測(cè)包括定量檢測(cè)與定性檢測(cè)，HIV 感染診斷通常為定性檢測(cè)，患者在HIV 感染后7～10d 血清中即可出現(xiàn)HIV RNA，核酸檢測(cè)對(duì)于該標(biāo)志物有較高的診斷準(zhǔn)確率，因此核酸檢測(cè)對(duì)于急性期或窗口期HIV 感染均可診斷，有效降低此時(shí)期病毒造成的風(fēng)險(xiǎn)。有學(xué)者認(rèn)為對(duì)于免疫印跡法不確定患者及初步篩查陰性者采用核算定量檢測(cè)有較高的診斷特異性及靈敏性，建議首次免疫印跡法檢測(cè)不確定及陰性者立即實(shí)施核酸檢測(cè)，縮短疾病確診時(shí)間，利于窗口期、急性期患者的早期診斷[6]。但是部分血清轉(zhuǎn)化前期或者發(fā)生高危行為的感染者預(yù)防性應(yīng)用了抗病毒藥物后，即使存在感染但病毒復(fù)制遭到抑制，窗口期延后，核酸檢測(cè)不能檢出[7]；艾滋病中晚期患者遵醫(yī)囑規(guī)律服藥，病毒復(fù)制受限，病毒載量即核算反而降低，故存在一定的漏診。核酸定性檢測(cè)有其局限性，即使單次檢測(cè)結(jié)果為陰性亦只能表明本次結(jié)果為陰性，并不代表患者并未發(fā)生HIV 感染，檢測(cè)陽(yáng)性則可作為HIV 感染的輔助診斷指標(biāo)；此外，核酸檢測(cè)操作復(fù)雜、成本高，鄉(xiāng)鎮(zhèn)等地區(qū)無(wú)法普及。病毒RNA 較抗體出現(xiàn)時(shí)間早1 至2 周[8]，核酸檢測(cè)能為患者是否發(fā)生HIV 感染提供最早期的輔助判斷意見(jiàn)；隨后病毒RNA 片段大量復(fù)制，人體機(jī)能做出相應(yīng)反應(yīng)，病毒載量逐漸降低，出現(xiàn)抗原甚至抗體，抗體形成后應(yīng)用抗體檢測(cè)法對(duì)疾病檢測(cè)準(zhǔn)確率更高，因此為了保證檢測(cè)準(zhǔn)確率應(yīng)針對(duì)患者HIV 感染時(shí)間靈活應(yīng)用檢測(cè)方式。本研究中早期艾滋病患者的核酸檢測(cè)準(zhǔn)確率高于抗體檢測(cè)，證明了核酸檢測(cè)在HIV 早期感染診斷中的優(yōu)勢(shì)；中晚期艾滋病患者的抗體檢測(cè)準(zhǔn)確性高于核酸檢測(cè)，但尚未構(gòu)成統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，筆者分析一方面與樣本量有關(guān)，一方面為部分晚期艾滋病患者免疫功能幾乎完全淪陷，抗體難以表達(dá)，故干擾了抗體檢測(cè)結(jié)果。就診斷效能分析，相對(duì)而言抗體檢測(cè)診斷特異性較差，假陽(yáng)性診斷概率較高，核酸檢測(cè)略顯優(yōu)勢(shì)。

綜上所述，艾滋病患者的HIV 檢測(cè)應(yīng)根據(jù)疾病進(jìn)程選擇檢測(cè)方法，核酸檢測(cè)適用于早期艾滋病患者、抗體檢測(cè)則對(duì)中晚期艾滋病患者有更高的診斷準(zhǔn)確性，兩者相互配合能降低漏診、誤診概率，保證診斷準(zhǔn)確性、特異性。