李明曄，李 越，郝玉鵬，孫澤威，仲慶振

(吉林農(nóng)業(yè)大學(xué) 動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，吉林省動物營養(yǎng)與飼料科學(xué)重點實驗室，動物生產(chǎn)及產(chǎn)品質(zhì)量安全教育部重點實驗室，吉林 長春 130118)

雛雞運輸是現(xiàn)代養(yǎng)雞生產(chǎn)中重要的環(huán)節(jié)，運輸過程中難以避免的運輸應(yīng)激可導(dǎo)致肉雞動物福利降低、代謝紊亂和死亡率增加[1]。如何有效緩解運輸應(yīng)激對動物的影響是當(dāng)前畜牧生產(chǎn)中面臨的普遍問題。谷氨酰胺(Gln)可通過提高機體抗氧化應(yīng)激功能來預(yù)防癌癥、脂肪肝、心肌梗死和腸炎等疾病的發(fā)生[2-3]；基礎(chǔ)飼糧中添加Gln 可顯著緩解應(yīng)激對肉仔雞[4]、蛋雞[5]和鵝[6]等禽類的生理健康、生產(chǎn)性能以及養(yǎng)分消化代謝的影響。Gln 作為少數(shù)幾種能夠促進激素分泌和提高免疫機能的必需氨基酸，具有劑量小和見效快的特點[7]，是滿足雛雞運輸應(yīng)激保護劑的理想條件。但運輸前使用Gln 對雛雞運輸應(yīng)激的保護作用尚未明確，因此本試驗通過運輸前灌服不同質(zhì)量分數(shù)的Gln，探究Gln 對運輸應(yīng)激后肉仔雞生長性能、血液激素水平以及抗氧化能力的影響，旨在為Gln 在緩解雛雞運輸應(yīng)激中的應(yīng)用提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗動物選擇與試驗設(shè)計

試驗采用單因子完全隨機設(shè)計，選取健康A(chǔ)A 初生肉用雛雞300 只，隨機分成A、B、C、D 和E 5 個處理組，每組5 個重復(fù)，每個重復(fù)12 只。運輸前A、B 組口腔灌服1 mL 生理鹽水，C、D 和E 組分別按肉雞體重口腔灌服1 mL質(zhì)量分數(shù)為0.50、0.75 和1.00 g/kg的Gln。隨后B、C、D 和E 組雛雞分別放在1 個60 cm×48 cm專用運輸箱中進行5 h的運輸處理，運輸箱內(nèi)溫度控制在29 ℃，濕度控制在60%，平均時速70 km/h，A 組(CK)不做運輸處理。5 個處理組保持相同的溫?zé)釛l件和密度等飼養(yǎng)環(huán)境。

1.2 飼養(yǎng)管理

飼養(yǎng)試驗在吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)動物飼養(yǎng)中心進行。飼養(yǎng)方式為籠養(yǎng)，試驗日糧為肉仔雞商品日糧(購自吉林森鵬飼料有限公司)，飼養(yǎng)期間雞只自由采食及飲水，每天飼喂3 次；舍內(nèi)溫度、濕度、光照及免疫均按AA 肉雞管理手冊進行。

1.3 樣品采集

5 h 運輸結(jié)束后，各組每個重復(fù)分別取6 只AA 肉仔雞進行頸靜脈采血，2 500 r/min 離心15 min，制備血清，-20 ℃保存待測。

1.4 測定指標與方法

1.4.1生長性能指標

出殼后運輸5 h，試驗第7 和14 天，對AA肉雞進行空腹稱重，計算平均日增重(ADG)。試驗期間每天記錄投料量和剩料量，用來計算平均采食量(ADFI)及料重比(F/G)。

1.4.2血液指標測定

血清CORT、MDA、GSH-Px、SOD、ROS、ACTH、LDH 和CAT 均采用試劑盒測定，操作步驟按照試劑盒說明書進行，以上試劑盒均購買自上海酶聯(lián)生物科技有限公司。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析

試驗數(shù)據(jù)采用IBM SPASS Statistic 20的一般線性模型進行方差分析，結(jié)果用“平均值±標準差”表示，P＜0.05 表示差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 運前灌服谷氨酰胺對運輸應(yīng)激后肉仔雞生長性能的影響

如表1 所示：5 h 運輸應(yīng)激處理后，B 組顯著失重(P＜0.05)，灌服不同質(zhì)量分數(shù)Gln的C、D 和E 3 組體失重?zé)o顯著變化。7 日齡時，運輸應(yīng)激處理B 組肉仔雞平均日增重和平均采食量均顯著低于對照組，但與B 組相比，運前灌服不同劑量Gln 肉仔雞平均日增重和平均采食量則顯著提高(P＜0.05)，其中D 組平均采食量恢復(fù)到了對照組水平；運輸應(yīng)激處理后，B 組肉仔雞料重比顯著升高，但與B 組相比運前灌服不同劑量Gln 可使其得到改善，其中D 組料重比達到了對照組水平。飼養(yǎng)到14 日齡時，B、C 組肉仔雞平均日增重和采食量仍顯著低于對照組，但D 組已經(jīng)與對照組無顯著差異；而灌服不同質(zhì)量分數(shù)Gln 組料重比雖有所改善，但仍顯著高于對照組。

表1 運前灌服谷氨酰胺對運輸應(yīng)激肉仔雞生長性能的影響Tab.1 Effect of glutamine administration before transportation on the growth performance of broiler chickens after transportation stress

2.2 運前灌服谷氨酰胺對運輸應(yīng)激肉仔雞血液激素水平的影響

如表2 所示：5 h 運輸處理后B 組肉仔雞CORT 和ACTH 顯著升高，但與B 組相比運前灌服Gln 會降低二者含量，灌服0.50 g/kg 并無明顯保護作用，灌服0.75 和1.00 g/kg 保護作用明顯，但仍高于A 組。

表2 運前灌服谷氨酰胺對運輸應(yīng)激后肉仔雞血液激素水平的影響Tab.2 Effect of glutamine administration before transportation on the blood hormone levels of broilers after transportation stress ng/mL

2.3 運前灌服谷氨酰胺對運輸應(yīng)激后肉仔雞抗氧化功能的影響

如表3 所示：與對照組相比，運輸應(yīng)激導(dǎo)致B 組肉仔雞血清MDA、ROS 和LDH 含量顯著升高，但與B 組相比運前灌服不同劑量Gln 可降低其血清濃度，其中D 組ROS 水平與對照組無顯著差異；運輸應(yīng)激會導(dǎo)致B 組血液GSH-Px、SOD 和CAT 活性顯著下降，運前灌服Gln 可使其含量顯著升高，其中D 組與未運輸A 組差異不顯著。

表3 運前灌服谷氨酰胺對運輸應(yīng)激后肉仔雞抗氧化功能的影響Tab.3 Effect of glutamine administration before transportation on the antioxidant function of broilers after transportation stress

3 討論

3.1 運前灌服谷氨酰胺對運輸應(yīng)激后肉仔雞生長性能的影響

肉雞發(fā)生應(yīng)激時，機體增強對脂肪、碳水化合物和蛋白質(zhì)等的分解代謝，即產(chǎn)生更多的能量用于抵抗應(yīng)激，表現(xiàn)為熱散發(fā)、心跳加快、呼吸加速和不停跑動等[8]；抵抗應(yīng)激的營養(yǎng)物質(zhì)消耗相當(dāng)于減少了機體用于生長發(fā)育、增重和免疫完善的營養(yǎng)供給，進而間接地使雞群的生產(chǎn)性能受到影響，表現(xiàn)出發(fā)育不良、成活率降低、增重速度減慢和飼料報酬降低[9]。本試驗的運輸應(yīng)激處理也導(dǎo)致了同樣的現(xiàn)象發(fā)生。Gln 可防止胃腸道黏膜萎縮，促進機體對營養(yǎng)物質(zhì)的吸收，有效保護支持腸道結(jié)構(gòu)，減少消化道不良反應(yīng)從而提高機體采食量來促進生長[10]；還可用來抵抗病原微生物侵襲，提高機體免疫力，減輕疾病發(fā)生率，保證動物的正常生長發(fā)育[11]；同時，Gln 能通過提升生長激素水平來促進機體生產(chǎn)性能[12]。Gln能有效緩解應(yīng)激反應(yīng)且能夠改善應(yīng)激狀態(tài)如熱應(yīng)激、低溫應(yīng)激和循環(huán)熱應(yīng)激下動物的生長性能[13]。DAI 等[14]發(fā)現(xiàn)在日糧中添加1.0%～2.0% Gln 可通過改善熱應(yīng)激狀態(tài)下肉雞的抗氧化能力來促進肉雞的生長發(fā)育，在肉仔雞早期日糧中添加適宜水平的Gln 可以提高肉仔雞采食量、日增重并降低料質(zhì)量比。張柏林等[15]研究表明：飼糧添加Gln有利于促進肉雞生長性能，這與本試驗結(jié)果一致。本試驗發(fā)現(xiàn)：遭受5 h 運輸處理后，雛雞失重較高，而運前灌服Gln 可顯著緩解雛雞失重情況，飼養(yǎng)到14 日齡時，運輸處理肉雞的體重顯著低于對照組，而灌服0.75 g/kg Gln的雛雞可保持與對照組相近的體重，且提高運輸應(yīng)激雛雞的采食量和平均日增重。

3.2 運前灌服谷氨酰胺對運輸應(yīng)激后肉仔雞血液激素水平的影響

動物血液指標可反映動物體內(nèi)物質(zhì)代謝及組織器官的生理機能狀況[16]。動物發(fā)生應(yīng)激時，主要特征是增強神經(jīng)內(nèi)分泌反應(yīng)，以下丘腦—垂體—腎上腺皮質(zhì)激素增高為顯著特征，所以CORT和ACTH 水平是衡量應(yīng)激反應(yīng)的重要指標[17-18]。ACTH 是腎上腺皮質(zhì)活性的主要調(diào)節(jié)者，可用于評估腎上腺皮質(zhì)功能，應(yīng)激狀態(tài)會使ACTH 分泌升高。本研究發(fā)現(xiàn)：與對照組相比，Gln 可以顯著降低血液CORT 和ACTH 含量，運輸前灌服Gln 能夠緩解運輸應(yīng)激對AA 肉雞血液中CORT 和ACTH的影響，維持其穩(wěn)定性。由此可見，Gln可調(diào)控肉雞血液中的激素水平，有利于維持AA 肉雞血液中激素水平的穩(wěn)定。

3.3 運前灌服谷氨酰胺對運輸應(yīng)激后肉仔雞抗氧化功能的影響

Gln 能夠影響機體內(nèi)GSH-Px、CAT 和SOD活性，促進GSH 合成，從而提高和維持機體內(nèi)還原型GSH 水平，GSH-Px 活性可反映機體受氧化物侵害的程度[19]。CAT 是黑素細胞內(nèi)清除H2O2的主要酶，SOD 可以阻止氧自由基對細胞導(dǎo)致的損傷，有效修復(fù)受損傷細胞，并恢復(fù)自由基導(dǎo)致的氧化損傷。本研究發(fā)現(xiàn)：運前灌服Gln 可提高雛雞體內(nèi)GSH-Px、CAT 和SOD 活性。GSH-Px 活性降低可導(dǎo)致自由基清除能力下降，自由基與脂質(zhì)反應(yīng)生成的MDA 含量增多，間接反映機體受到氧化物侵害，MDA的存在會毒害細胞膜系統(tǒng)蛋白質(zhì)和DNA，最終導(dǎo)致細胞膜的降解和細胞功能的喪失[20-21]。高含量ROS 攻擊腸道內(nèi)皮細胞和腸上皮細胞的糖類、脂類、蛋白質(zhì)和核酸，導(dǎo)致腸細胞氧化損傷。LDH 是糖代謝中丙酮酸無氧酵解為乳酸的催化酶，血液中LDH 含量升高說明熱應(yīng)激時機體無氧酵解過程加強[22]。在本試驗中，與對照組相比，運輸前灌服Gln 可顯著提高雛雞血液中GSH-Px、SOD 和CAT的活性，降低MDA、ROS 和LDH 含量，提高機體抗氧化能力。由此表明：Gln 作為一種營養(yǎng)調(diào)控劑可以有效調(diào)節(jié)血液中氧化應(yīng)激指標，保護家禽運輸應(yīng)激腸道氧化損傷。

4 結(jié)論

5 h的運輸應(yīng)激顯著降低肉仔雞生長性能，導(dǎo)致血液激素水平以及抗氧化能力發(fā)生改變，運輸前灌服Gln 可有效緩解運輸應(yīng)激帶來的影響，其中0.75 g/kg 質(zhì)量分數(shù)較適宜。