錢靜宇，沙 敏

（泰州市人民醫(yī)院 中心實(shí)驗(yàn)室，江蘇 泰州 225300）

冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病，簡稱冠心病，是最常見的一種心血管疾病。冠心病嚴(yán)重威脅人類健康，已經(jīng)成為全世界人類疾病死亡的主要原因之一。冠心病患者經(jīng)皮冠狀動(dòng)脈介入術(shù)（PCI術(shù)）能夠開通狹窄或阻塞的血管，使心臟供血得到改善[1]。臨床相關(guān)研究表明，可溶性生長刺激表達(dá)基因2 蛋白（soluble growth stimulation expressed gene 2，sST2）與冠心病的進(jìn)展密切相關(guān)[2]。當(dāng)心肌受到損傷后，血清中的sST2 水平會(huì)立即升高，大量的sST2 與IL-33 結(jié)合后激活相應(yīng)的信號(hào)通路，心肌細(xì)胞出現(xiàn)纖維化以及心室肥大，最終導(dǎo)致心室重構(gòu)[3]。IL-33是IL-1家族的重要細(xì)胞因子，其血清水平可以用來評(píng)估PCI 術(shù)后患者的預(yù)后及預(yù)測冠脈支架內(nèi)再狹窄。IL-33 的血清水平與冠心病的嚴(yán)重程度密切相關(guān)，且冠心病患者PCI 術(shù)后血清IL-33 水平的升高與術(shù)后支架內(nèi)狹窄的發(fā)生率相關(guān)，從而認(rèn)為血清IL-33 水平可作為冠心病PCI 術(shù)后再狹窄的獨(dú)立預(yù)測因子[4,5]。本研究旨在進(jìn)一步明確機(jī)體血清sST2 和IL-33水平變化在冠心病患者PCI術(shù)治療前后的相關(guān)性及效果評(píng)價(jià)方面的價(jià)值，為冠心病患者預(yù)后的預(yù)測提供有效依據(jù)。

1 資料和方法

1.1 研究對(duì)象本次研究的對(duì)象為2019 年12 月至2020年12月期間至泰州市人民醫(yī)院行PCI 術(shù)的136 例冠心病患者，年齡：42～77 歲，其中男性88 例，女性48 例，平均年齡（55.364±5.72）歲；將136例冠心病患者分為3個(gè)臨床亞組：疾病類型分組：急性心肌梗死組（AMI）50 例、不穩(wěn)定型心絞痛組（UAP）43 例、穩(wěn)定性心絞痛組（SAP）43 例；根據(jù)Gensini 積分將患者分為3 個(gè)冠脈硬化程度亞組：輕度組（＜26.1 分）52 例、中度組（26.1～51.4分）48例、重度組（≥51.4分）36例。同時(shí)以本院體檢的80名健康者作為對(duì)照組，年齡40～76歲，平均年齡（49.82±5.93）歲。冠心病患者的冠脈造影和支架植入治療由兩名手術(shù)經(jīng)驗(yàn)豐富的醫(yī)師完成。冠心病患者與健康對(duì)照組在性別、年齡方面的差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＞0.05。

1.2 主要試劑與儀器可溶性生長刺激表達(dá)基因2 蛋白（ST2）檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫法，中國重癥監(jiān)護(hù)診斷股份有限公司）；人白介素33（IL-33）檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫法，中國上海哈靈生物科技有限公司）；多功能酶標(biāo)儀（Synergyht，美國BioTek公司）。

1.3 血清sST2和IL-33水平檢測所有患者分別于入院次日（或術(shù)前）和術(shù)后次日晨空腹抽取肘靜脈血3 ml，4℃離心（3000 r/min，30 min）后吸取上清液，置于-80℃冰箱冷凍保存?zhèn)錅y，期間要避免反復(fù)凍融。采用可溶性生長刺激表達(dá)基因2 蛋白檢測試劑盒和人白介素33 檢測試劑盒進(jìn)行檢測，操作步驟嚴(yán)格按照試劑盒的說明進(jìn)行。此次研究中，檢測sST2 和IL-33 水平的ELISA 系列的標(biāo)準(zhǔn)品均由試劑公司提供，其具體濃度為：可溶性生長刺激表達(dá)基因2蛋白（ST2）標(biāo)準(zhǔn)品濃度梯 度 為200ng/mL，100ng/mL，50ng/mL，25ng/mL，12.5ng/mL，6.3ng/mL，3.1ng/mL，0ng/mL；人白介素33（IL-33）標(biāo)準(zhǔn) 品 濃度 梯度 為400pg/mL，200pg/mL，100pg/mL，50pg/mL，25pg/mL，12.5pg/mL，0pg/mL。嚴(yán)格按照說明書配制標(biāo)準(zhǔn)品、生物素化抗體、酶標(biāo)記物、洗滌液。

以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。通過檢測出的樣本的OD值可以通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算其濃度。所有標(biāo)本測定3 次，取其平均值進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析使用SPSS21.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。數(shù)據(jù)采用“”表示，組間比較采用單因素方差分析；相關(guān)性檢驗(yàn)采用Pearson 檢驗(yàn)。P＜0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

2 結(jié)果

2.1 不同臨床亞組人員血清sST2和IL-33水平比較術(shù)前各組比較：與對(duì)照組相比，冠心病UAP組和AMI 組患者血清sST2 水平顯著升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），表1；冠心病UAP 組和AMI組患者血清IL-33水平顯著降低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），表2。PCI治療前后：UAP組和AMI組患者介入治療后血清sST2水平顯著下降，以AMI 組下降最明顯（P＜0.05），見表1；UAP 組和AMI 組患者介入治療后血清IL-33 水平顯著上升，以AMI組上升最明顯（P＜0.05），見表2。

表1 不同臨床亞組人員血清sST2水平比較（）

表1 不同臨床亞組人員血清sST2水平比較（）

注：*表示治療前，臨床亞組與對(duì)照組相比，差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；#表示臨床亞組治療后與治療前相比，數(shù)據(jù)存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

表2 不同臨床亞組人員血清IL-33水平比較（）

表2 不同臨床亞組人員血清IL-33水平比較（）

注：*表示治療前，臨床亞組與對(duì)照組相比，差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；#表示臨床亞組治療后與治療前相比，數(shù)據(jù)存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

2.2 不同冠脈硬化程度亞組人員血清sST2和IL-33 水平比較PCI 治療前，與對(duì)照組相比，冠脈硬化重度組和中度組患者血清sST2 水平明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表3，且隨著冠脈硬化程度加重，血清sST2 水平逐漸升高；PCI治療前，與對(duì)照組相比，冠脈硬化重度組和中度組患者血清IL-33 水平明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表4，且隨著冠脈硬化程度加重，血清IL-33 水平逐漸降低。PCI 術(shù)后，中、重組患者血清sST2 水平較術(shù)前有明顯降低，以AMI 組下降最明顯（P＜0.05），見表3；PCI 術(shù)后，中、重組患者血清IL-33 水平較術(shù)前有明顯升高，以AMI組升高最明顯（P＜0.05），見表4。

表3 冠脈硬化程度亞組人員血清sST2水平比較（）

表3 冠脈硬化程度亞組人員血清sST2水平比較（）

注：*表示治療前，冠脈硬化程度亞組與對(duì)照組相比，差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；#表示冠脈硬化程度亞組治療后與治療前相比，數(shù)據(jù)存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

表4 冠脈硬化程度亞組人員血清IL-33水平比較（）

表4 冠脈硬化程度亞組人員血清IL-33水平比較（）

注：*表示治療前，冠脈硬化程度亞組與對(duì)照組相比，差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；#表示冠脈硬化程度亞組治療后與治療前相比，數(shù)據(jù)存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

2.3 冠心病患者PCI 手術(shù)前后血清sST2與IL-33濃度相關(guān)性分析采用Pearson相關(guān)性分析：冠心病患者PCI手術(shù)前后血清中sST2與IL-33的水平均為顯著負(fù)相關(guān)（P＜0.05）。其中術(shù)前兩者的相關(guān)系數(shù)為-0.733（圖1A）；術(shù)后兩者相關(guān)系數(shù)為-0.792（圖1B）。手術(shù)前后血清sST2 濃度呈顯著降低趨勢，而IL-33 濃度呈顯著升高趨勢，表明二者皆與冠心病嚴(yán)重程度密切相關(guān)。

圖1 冠心病患者PCI手術(shù)前后血清sST2與IL-33濃度相關(guān)性分析

3 討論

冠心病的主要病理基礎(chǔ)為冠狀動(dòng)脈血管粥樣硬化，血管腔循環(huán)受阻，斑塊破裂導(dǎo)致冠狀動(dòng)脈管腔部分或完全堵塞從而導(dǎo)致心肌細(xì)胞缺血缺氧或壞死，同時(shí)不同類型ACS的臨床癥狀和預(yù)后等存在差異[6]。PCI 術(shù)已成為治療冠心病的一種重要手段，且效果顯著，可迅速重建血運(yùn)，改善患者心肌細(xì)胞缺血缺氧的狀態(tài)。但是PCI術(shù)同時(shí)會(huì)導(dǎo)致心內(nèi)膜撕裂剝脫、斑塊破裂、微血栓形成等風(fēng)險(xiǎn)，引發(fā)冠狀動(dòng)脈痙攣或穿孔等從而損傷心肌細(xì)胞，誘發(fā)相關(guān)細(xì)胞因子水平出現(xiàn)異常，進(jìn)而影響ACS患者的預(yù)后[7]。因此，探究不同類型ACS患者PCI術(shù)前和術(shù)后血清中相關(guān)炎癥因子的變化及其相關(guān)性，對(duì)于預(yù)測不良心血管事件及改善預(yù)后具有重要臨床意義。

sST2/IL-33 與動(dòng)脈粥樣硬化相關(guān)，IL-33 的升高與冠脈支架內(nèi)再狹窄相關(guān)，但sST2/IL-33 在冠心病患者PCI 手術(shù)前后的表達(dá)水平差異和兩者相關(guān)性研究尚未見報(bào)道。本研究主要探討了sST2 和IL-33在冠心病患者PCI手術(shù)前后的表達(dá)差異，結(jié)果顯示，冠心病UAP組和AMI組患者血清sST2水平顯著升高，而血清IL-33水平顯著降低；PCI術(shù)后1 個(gè)月，冠心病UAP 組和AMI 組血清sST2 水平均顯著下降，而血清IL-33 水平顯著升高，提示ACS患者血清sST2、IL-33水平變化與其斑塊穩(wěn)定性、危險(xiǎn)分層密切相關(guān)，隨著病情加重，血清sST2水平逐漸升高、IL-33水平逐漸降低，PCI 可促進(jìn)心外膜大血管的血流恢復(fù)，改善心肌供血不足，減輕心肌損傷，從而降低血清sST2、提高IL-33水平，提示治療過程中IL-33/sST2通路被大量激活。本實(shí)驗(yàn)還證實(shí)冠心病PCI手術(shù)前后血清IL-33 與sST2 水平之間呈負(fù)相關(guān)，提示sST2 作為IL-33/sST2通路的負(fù)反饋調(diào)節(jié)劑，參與了冠心病患者PCI術(shù)后炎癥因子水平的調(diào)節(jié)。

綜上所述，血清sST2 在病情嚴(yán)重的ASC 患者中呈高表達(dá)狀態(tài)，在PCI 術(shù)后可出現(xiàn)不同程度的下降；且血清IL-33 在病情嚴(yán)重的ASC 患者中呈低表達(dá)狀態(tài)，在PCI術(shù)后可出現(xiàn)不同程度的升高；兩者在PCI 手術(shù)前后均存在負(fù)相關(guān)，臨床應(yīng)密切關(guān)注血清sST2 和IL-33 水平變化，以監(jiān)測冠心病患者病情進(jìn)展及預(yù)后情況，對(duì)評(píng)估冠心病患者冠脈狹窄程度及PCI術(shù)后患者隨訪有較明確的作用。