沈 瑋 錢夢(mèng)逸 黃昕潤(rùn) 厲晨皓

(平湖市食品藥品檢測(cè)中心，平湖 314200)

腐霉利又被稱作速克靈，是一種低毒性內(nèi)吸殺菌劑，主要用于防治果蔬等作物上的灰霉病、菌核病等[1]。由于噴灑后有很好的保護(hù)效果、持效期長(zhǎng)，因而得到了廣泛使用，導(dǎo)致在日常農(nóng)產(chǎn)品檢測(cè)中時(shí)有檢出，容易超標(biāo)。GB 2763-2019《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中農(nóng)藥最大殘留限量》[2]對(duì)腐霉利在不同種類蔬菜中的最大殘留量做了明確規(guī)定。

測(cè)量不確定度是表征賦予被測(cè)量值分散性的非負(fù)參數(shù)，可分為A類不確定度(使用貝塞爾公式法或極差法進(jìn)行評(píng)定)和B類不確定度(根據(jù)有關(guān)的信息或經(jīng)驗(yàn)進(jìn)行評(píng)定)。對(duì)于檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室來(lái)說(shuō)，通過評(píng)定測(cè)量不確定度可以衡量檢測(cè)結(jié)果質(zhì)量的高低，也能分析找出造成測(cè)定誤差的來(lái)源，進(jìn)而提高檢測(cè)質(zhì)量[3]。而黃瓜中腐霉利殘留量檢測(cè)的不確定度評(píng)定未見報(bào)道。

本文以JJF 1059.1-2012《測(cè)量不確定度評(píng)定與表示》[4]和JJF 1135-2005《化學(xué)分析測(cè)量不確定度評(píng)定》[5]為依據(jù)，參照NY/T 761-2008《蔬菜和水果中有機(jī)磷、有機(jī)氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯類農(nóng)藥多殘留的測(cè)定》[6]方法對(duì)黃瓜中腐霉利殘留量的不確定度進(jìn)行評(píng)定，分析不確定度的影響因素，為提升測(cè)量結(jié)果的準(zhǔn)確性與可靠性提供參考。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

6890N氣相色譜儀(配ECD檢測(cè)器)；PL602-L電子天平；TurboVapLV全自動(dòng)定量濃縮儀；L530離心機(jī)。

腐霉利標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(100 μg/mL)；乙腈、正己烷、丙酮(色譜純)；氯化鈉(分析純，)；黃瓜購(gòu)買自農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1標(biāo)準(zhǔn)溶液配制

用可調(diào)量程移液器吸取1 mL濃度為100 μg/mL的腐霉利標(biāo)準(zhǔn)溶液于10 mL容量瓶中，正己烷定容至刻度，配制成濃度為5 μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液，再用可調(diào)量程移液器分別吸取0.05 mL、0.1 mL、0.2 mL、0.5 mL、1.0 mL標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液至10 mL容量瓶中，配制成 0.05 μg/mL、0.1 μg/mL、0.2 μg/mL、0.5 μg/mL、1.0 μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。

1.2.2樣品前處理

準(zhǔn)確稱取25.00 g試樣于100 mL離心管中，用50 mL量筒量取50.0 mL乙腈加入離心管，均質(zhì)2 min，用濾紙過濾，濾液收集到裝有6 g氯化鈉的100 mL具塞量筒中，蓋上塞子，劇烈震蕩1 min，室溫下靜置30 min，使乙腈相和水相分層。用移液管移取10.00 mL上清液至玻璃試管中，80℃全自動(dòng)定量濃縮儀氮吹濃縮近干，加入2.0 mL正己烷，凈化液倒入活化好的弗羅里矽柱，用15 mL刻度離心管接收洗脫液，用5.0 mL丙酮+正己烷(1：9)沖洗玻璃試管后淋洗弗羅里矽柱，并重復(fù)1次，50 ℃下氮吹濃縮至小于5.0 mL，恢復(fù)室溫后用正己烷定容至5.0 mL，渦旋混勻后過膜待測(cè)。

1.2.3色譜條件

色譜柱：HP-5MS柱(30 m×0.25 mm，0.25 μm)；程序升溫：初始溫度150℃，保持2 min，以10℃/min升至280℃，保持10 min；進(jìn)樣口溫度：250℃；進(jìn)樣方式：不分流進(jìn)樣；進(jìn)樣量：1 μL；載氣：氦氣(純度≥99.999%)，流速1.0 mL/min。

1.3 數(shù)學(xué)模型的建立

黃瓜中腐霉利含量按下列公式計(jì)算得出：

式中，x—試樣中腐霉利的含量(mg/kg)；c—樣品液測(cè)定濃度(μg /mL)；V1—提取溶劑體積(mL)；V2—分取體積(mL)；V3—樣品溶液定容體積(mL)；m—樣品質(zhì)量(g)。

1.4 不確定度來(lái)源魚骨圖

氣相色譜法測(cè)定黃瓜中腐霉利的不確定度分量主要來(lái)自以下幾個(gè)方面，見圖1。

圖1 不確定度來(lái)源

2 結(jié)果與分析

2.1 方法回收率引入的不確定度

稱取6份黃瓜空白樣品，添加腐霉利標(biāo)液使其濃度為0.4mg/kg，靜置1 h使正己烷揮發(fā)，按樣品處理步驟進(jìn)行回收率測(cè)定，結(jié)果見表1。

表1 回收率引入的不確定度

測(cè)定次數(shù)n=6，根據(jù)貝塞爾公式計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)偏差：

加標(biāo)回收率的不確定度屬于A類評(píng)定，按以下公式計(jì)算

2.2 測(cè)量重復(fù)性引入的不確定度

對(duì)上述某一加標(biāo)樣品待測(cè)液連續(xù)進(jìn)行7次重復(fù)測(cè)定，結(jié)果見表2。

表2 重復(fù)測(cè)定黃瓜中腐霉利含量

測(cè)定次數(shù)n=7，根據(jù)貝塞爾公式計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)偏差：

測(cè)量重復(fù)性的不確定度屬于A類評(píng)定，按以下公式計(jì)算

2.3 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)引入的不確定度

2.3.1標(biāo)準(zhǔn)品純度產(chǎn)生的不確定度

證書給出的腐霉利標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為100 μg/mL，擴(kuò)展不確定度為3%，取k=2，則相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度為：

2.3.2標(biāo)準(zhǔn)溶液配制過程產(chǎn)生的不確定度

標(biāo)準(zhǔn)溶液配制時(shí)量器允差和溫度校準(zhǔn)引入的不確定度結(jié)果見表3。

表3 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制過程引入的不確定度

則由表1中數(shù)據(jù)合成的標(biāo)準(zhǔn)溶液配制過程引入的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度為：

2.3.3標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合引入的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度

腐霉利標(biāo)準(zhǔn)工作溶液各濃度點(diǎn)依次測(cè)量，每個(gè)濃度點(diǎn)分別測(cè)定3次，對(duì)應(yīng)的峰面積見表4，利用最小二乘法擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到線性回歸方程：Y=7666.13546X+ 60.7249(其中Y為峰面積，X為腐霉利質(zhì)量濃度，斜率a=7666.13546，截距b=60.7249，R2=0.9999)

表4 標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度與對(duì)應(yīng)峰面積

重復(fù)性實(shí)驗(yàn)時(shí)，對(duì)同一樣品溶液平行測(cè)定7次，得到待測(cè)樣液中腐霉利的平均濃度為0.417 μg/mL。標(biāo)準(zhǔn)工作溶液總共測(cè)定15次，平均濃度為0.37 μg/mL。則標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合的引入的不確定度由以下公式計(jì)算：

=0.00422

2.3.4標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)引入的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度合成

2.4 樣品稱量引入的不確定度

2.5 樣品溶液體積引入的不確定度

2.5.1提取溶劑體積引入的相對(duì)不確定度

因此，50 mL量筒量取提取溶劑引入的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度為：

2.5.2分取溶液體積引入的相對(duì)不確定度

分取溶液時(shí)使用了10 mL的A級(jí)單標(biāo)線吸量管，其最大允許誤差為±0.020 mL，按2.5.1過程計(jì)算，則

因此，10 mL A級(jí)單標(biāo)線吸量管分取溶液引入的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度為：

2.5.3定容體積引入的相對(duì)不確定度

定容時(shí)使用15 mL刻度離心管，查看JJG 10-2005《專用玻璃量器檢定規(guī)程》[9]，15 mL離心管在5 mL標(biāo)線處的容量允差為±0.2 mL，按2.5.1過程計(jì)算，則

因此，刻度離心管定容引入的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度為：

2.5.4樣品前處理中樣品溶液體積引入的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度合成

=0.0248

2.6 合成相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度

將各相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度分量進(jìn)行合成即得到黃瓜中腐霉利殘留量測(cè)定結(jié)果的相對(duì)合成標(biāo)準(zhǔn)不確定度：

=0.0439

2.7 擴(kuò)展不確定度

在95%置信水平下，通常取包含因子k=2，即得氣相色譜法測(cè)定黃瓜中腐霉利殘留量過程的相對(duì)擴(kuò)展不確定度為：

Urel=k×urel=2×0.0439=0.0878

加標(biāo)黃瓜樣品中腐霉利含量為0.417 mg/kg，得擴(kuò)展不確定度為：

2.8 測(cè)量不確定度結(jié)果報(bào)告

按照方法NY/T 761-2008測(cè)定黃瓜中腐霉利殘留量結(jié)果為：0.417±0.037 mg/kg(k=2)。

3 結(jié)論

依據(jù)NY/T 761-2008《蔬菜和水果中有機(jī)磷、有機(jī)氯、擬蟲菊酯和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留的測(cè)定》對(duì)黃瓜中腐霉利殘留量進(jìn)行了測(cè)定，并從方法回收率、測(cè)量重復(fù)性、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(純度、配制、曲線擬合)、樣品稱量和樣品溶液體積(提取液、分取液、定容液)等方面對(duì)不確定度進(jìn)行量化分析，并合成相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度及擴(kuò)展不確定度。黃瓜中腐霉利的含量可以表示為0.417±0.037 mg/kg(k=2)。通過比較各不確定度分量的大小，得出不確定度的主要影響因素為標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制、樣品溶液體積及加標(biāo)回收率，其相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度分別為0.0283、0.0248、0.0158?；谝陨辖Y(jié)果，實(shí)驗(yàn)室可通過選擇更精準(zhǔn)的量器，規(guī)范前處理操作，達(dá)到減小測(cè)定結(jié)果不確定度的目的。本方法適用于氣相色譜法測(cè)定黃瓜中腐霉利的不確定度評(píng)定，為今后提升實(shí)驗(yàn)測(cè)量結(jié)果的準(zhǔn)確性與可靠性提供參考。