王 倩，曾 培，袁莉莉，張永玲，白永利，范文濤

(1.陜西中醫(yī)藥大學(xué)，陜西 咸陽 712046；2.陜西省中醫(yī)藥研究院，陜西 西安 710003)

癲癇(Epilepsy,EP)是大腦神經(jīng)元超同步化反復(fù)異常放電所引起的以暫時性意識喪失、口吐白沫、四肢肌肉強直抽搐為主要臨床表現(xiàn)的一種中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能障礙性疾病。中國范圍內(nèi)現(xiàn)有癲癇患者大約九百多萬人，全球平均每天新發(fā)癲癇病例大約6000例左右，且80%左右的癲癇患者生活在發(fā)展中和經(jīng)濟(jì)偏于落后的國家和地區(qū)，由于受到經(jīng)濟(jì)和醫(yī)療條件的限制很多癲癇患者并未得到全面的治療[1]。

前期研究發(fā)現(xiàn)，癲癇的發(fā)病可能是NF-κB信號通路、炎癥因子共同作用的結(jié)果[2]。本文研究柴胡加龍骨牡蠣湯對NF-κB信號通路的影響，為明確柴胡加龍骨牡蠣湯治療癲癇的作用機(jī)制提供分子生物學(xué)支撐。

1 材料與方法

1.1 實驗動物 西安交通大學(xué)實驗動物中心購買SPF級健康SD雄性大鼠60只，鼠的年齡25～26周，體重為180～220 g左右，動物許可證號:SCXK(陜)2017-003。購買后的大鼠需要適應(yīng)性飼養(yǎng)1周，自由飲水與進(jìn)食，室溫(21±2)℃，濕度40%～50%，1周后進(jìn)行相關(guān)動物實驗。

1.2 實驗藥品、試劑 硫酸阿托品注射液、丙戊酸鈉片、毛果蕓香堿、氯化鋰、IL-6/TNF-α ELISA試劑盒、HE染色試劑盒、β-actin、NF-κBp65兔多克隆抗體、BCA蛋白測定試劑盒。

1.3 動物分組與造模

1.3.1 分組：采用隨機(jī)數(shù)字表法選取SPF級SD成年大鼠60只，然后隨機(jī)將大鼠分成六組，分別設(shè)為空白組、模型組、丙戊酸鈉組和柴胡加龍骨牡蠣湯高、中、低劑量組，每組大鼠有10只，且均為雄性SD大鼠。

1.3.2 顳葉癲癇大鼠造模：將氯化鋰注射液調(diào)配成127 mg/kg，每只大鼠進(jìn)行稱重記錄，然后行腹腔注射，記錄時間，注射完氯化鋰后間隔18～24 h，再給予1 mg/kg阿托品腹腔注射，以抑制匹羅卡品注射后大鼠出現(xiàn)的外周膽堿能反應(yīng)。30 min后開始按32 mg/kg的比例給予匹羅卡品腹腔注射，注射完藥物后，將大鼠放入籠中，密切觀察每只大鼠的反應(yīng)。大約5 min左右大鼠陸續(xù)出現(xiàn)嘴角流涎、吐白沫、鼓腮、不斷撓胡須、眼球充血流血淚等癥狀，部分大鼠開始出現(xiàn)面部頻繁抽動，四肢強直顫栗抖動，甚則雙上肢出現(xiàn)直立、頭后仰、旋轉(zhuǎn)、摔倒等，如Racine發(fā)作等級標(biāo)準(zhǔn)表中的發(fā)作癥狀(0級：沒有癲癇發(fā)作的任何癥狀；Ⅰ級：胡須抖動，鼓腮，面部時有抽搐；Ⅱ級：全身陣攣性抽動，口角流涎，節(jié)律性點頭，背部毛濕潤；Ⅲ級：同Ⅱ級，出現(xiàn)上肢站立性抖動；Ⅳ級：全身陣攣性抽搐，后肢直立；Ⅴ級：反復(fù)跌倒，全身肌肉強直，抽搐頻繁)。大鼠癲癇發(fā)作等級達(dá)到Ⅳ級及以上，且發(fā)作時間持續(xù)30 min以上者則為癲癇模型成功，沒有達(dá)到以上發(fā)作級別和發(fā)作時間的，則表明造模沒有成功，需按10 mg/kg匹羅卡品量每間隔30 min追加1次，連續(xù)追加3次仍未達(dá)到以上發(fā)作級別和時間要求者，則為造模失敗，予以剔除。造模過程中有3只發(fā)作級別沒有達(dá)到Ⅳ級或Ⅳ級以上，予以剔除，造模過程中因癲癇大發(fā)作死亡5只，模型成功大鼠給予30 mg/kg水合氯醛以緩解癲癇大發(fā)作的痙攣狀態(tài)，在注射水合氯醛過程中有2只大鼠死亡，可能與水合氯醛注射過量有關(guān)。造模成功后比較虛弱的大鼠，每只給予3 ml葡萄糖氯化鈉注射液進(jìn)行營養(yǎng)支持治療，每天分早晚2次，連續(xù)給予3 d。每組大鼠給予常規(guī)飼料喂養(yǎng)，正常飲水。

1.4 藥物及給藥方法

1.4.1 柴胡加龍骨牡蠣湯：柴胡12 g，龍骨、生姜、黨參、桂枝、茯苓、牡蠣各4.5 g，半夏10 g，黃芩3 g，大黃6 g，大棗6枚(原方中有鉛丹，但因鉛丹有毒，所以方中未加鉛丹)。煎藥方法：將龍骨、牡蠣放入先煎30 min，然后再加入剩余藥物，武火煮沸，文火再煎25 min，共煎2次，將兩次所煎藥物混合在一起，待藥物冷卻以后放入4 ℃冰箱備用。每次灌胃前將藥物倒出一定的量，放入溫水中加熱。

1.4.2 給藥方法與劑量：空白組與模型組每天給予相同劑量的0.9%氯化鈉灌胃治療，0.9%氯化鈉劑量為10 ml/kg，1次/d。丙戊酸鈉組：每天給丙戊酸鈉組1.6 mg/kg體重，溶于2.5 ml0.9%氯化鈉灌胃，1次/d。柴胡加龍骨牡蠣湯組：每天給予按生藥18、9、4.5 g/kg體重溶于2.5 ml0.9%氯化鈉灌胃，1次/d，分為柴胡加龍骨牡蠣湯高、中、低劑量組。灌胃療程為4周，模型復(fù)制成功后，從造模成功后第2天開始進(jìn)行中藥灌胃干預(yù)療法，連續(xù)灌胃4周。

1.5 指標(biāo)檢測及方法

1.5.1 大鼠行為學(xué):造模成功后和治療期間觀察各組大鼠癲癇發(fā)作的頻率、次數(shù)和每次發(fā)作的持續(xù)時間，進(jìn)食情況同時測量大鼠體重的變化。

1.5.2 海馬組織HE染色:將海馬組織浸泡在4%的多聚甲醛中24 h后，取出用清水水洗，依次放入梯度酒精和二甲苯中脫水過夜15 h、脫水后取出用石蠟進(jìn)行包埋，將包埋后的組織取出，用切片機(jī)切成厚約3 μm的薄片，放入恒溫池中，再用載玻片進(jìn)行撈片，烘烤1 h左右。按照HE染色步驟進(jìn)行。

1.5.3 TNF-α、IL-6 按照ELISA及Western blot實驗步驟進(jìn)行。

2 結(jié) 果

2.1 大鼠一般行為學(xué)變化 空白組大鼠每日正常進(jìn)食飲水，較活躍，呈聚集式圍攏在一塊，毛色光亮，大便致密呈顆粒狀；造模組大鼠1周內(nèi)，每日癲癇發(fā)作較頻繁，發(fā)作時上肢直立、口吐涎沫、全身肌肉痙攣抽搐甚則向后顛倒，眼球怒睜，易激惹狀，毛發(fā)豎立呈“濕狗狀”、大鼠之間容易發(fā)生撕咬現(xiàn)象，發(fā)作結(jié)束后精神萎靡，進(jìn)食飲水也較空白組大鼠減少，大便稀溏，體重明顯減輕；治療組經(jīng)每日柴胡加龍骨牡蠣湯和丙戊酸鈉灌胃治療2周后，每日癲癇發(fā)作的級別、時間、程度、進(jìn)食飲水情況、體重等都有所改變；其中高劑量組癲癇發(fā)作次數(shù)減少較明顯，每日發(fā)作的級別和程度都有所減少，進(jìn)食飲水明顯增加，體重逐漸增加；丙戊酸鈉組和中劑量組大鼠每日癲癇發(fā)作次數(shù)、發(fā)作級別和發(fā)作時間也較灌胃前相比有所減少，進(jìn)食飲水有所增多，體重有所增加；小劑量組大鼠每日癲癇發(fā)作次數(shù)和級別與灌胃治療前相比有所減少，進(jìn)食增多，體重也有所增加。

2.2 各組大鼠體重變化 在造模后和灌胃治療期間每日對各組大鼠體重進(jìn)行稱重并記錄，造模前，各組大鼠體重之間的比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義。灌胃治療2周后，造模后各組大鼠體重明顯低于空白組(P<0.05或0.01)，柴胡加龍骨牡蠣湯高劑量組、中劑量組及丙戊酸鈉組大鼠體重明顯高于模型組(P<0.01)，柴胡加龍骨牡蠣湯中劑量組、低劑量組大鼠體重明顯低于高劑量組(P<0.05或0.01)，丙戊酸鈉組大鼠體重明顯高于柴胡加龍骨牡蠣湯低劑量組(P<0.05)；灌胃治療4周后，造模后各組大鼠體重明顯低于空白組(P<0.01)，柴胡加龍骨牡蠣湯高劑量組、中劑量組、低劑量組及丙戊酸鈉組大鼠體重明顯高于模型組(P<0.01)，柴胡加龍骨牡蠣湯中劑量組、低劑量組及丙戊酸鈉組大鼠體重均明顯低于高劑量組(P<0.05或0.01)，丙戊酸鈉組大鼠體重明顯高于柴胡加龍骨牡蠣湯低劑量組(P<0.05)。見表1。

表1 各組大鼠體重變化(g)

2.3 各組大鼠海馬組織病理學(xué)改變 HE染色結(jié)果顯示：空白組大鼠海馬結(jié)構(gòu)中顆粒細(xì)胞和錐體細(xì)胞分布均勻、層次分明、細(xì)胞之間的排列也比較緊密、飽滿，胞漿透明顏色淡紅，胞核呈橢圓形分布；模型組大鼠海馬細(xì)胞腫脹、輪廓分布不均，細(xì)胞數(shù)量減少，細(xì)胞核破碎，出現(xiàn)細(xì)胞凋亡現(xiàn)象；與模型組相比，中藥高、中、低劑量組和丙戊酸鈉組顆粒細(xì)胞和錐體細(xì)胞數(shù)量較多，形態(tài)完整、邊界清晰，分布較緊密(圖1)。

2.4 各組大鼠血清炎癥因子白介素6(IL-6)以及腫瘤壞死因子(TNF-α)表達(dá)情況 灌胃治療4周后，抽取各組大鼠血清采用ELISA法測定IL-6和TNF-α水平，實驗結(jié)果顯示：與空白組相比，造模后各組大鼠血清中IL-6 及TNF-α水平均明顯升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)；與模型組相比，柴胡加龍骨牡蠣湯高、中組和丙戊酸鈉組的IL-6和TNF-α表達(dá)均明顯降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)，與柴胡加龍骨牡蠣湯高劑量組相比，中劑量組和低劑量組IL-6和TNF-α水平明顯升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)，與柴胡加龍骨牡蠣湯中劑量組相比，低劑量組IL-6和TNF-α水平均明顯升高，丙戊酸鈉組IL-6和TNF-α水平均明顯降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)，與柴胡加龍骨牡蠣湯低劑量組相比，丙戊酸鈉組IL-6和TNF-α均水平明顯降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。見表2。

A：空白組；B：模型組；C：高劑量組；D：中劑量組；E：低劑量組；F：丙戊酸鈉組

表2 各組大鼠血清IL-6和TNF-α表達(dá)情況

2.5 各組癲癇大鼠海馬組織NF-κBp65與IκBa蛋白表達(dá)情況 灌胃治療4周后，剝離各組大鼠海馬組織，采用Western blot法測定NF-κBp65、IκBa相對表達(dá)水平。結(jié)果顯示：與空白組比較各組大鼠IκBa相對表達(dá)水平均明顯降低(P<0.05或P<0.01)；與模型組比較高劑量組、中劑量組、低劑量組與丙戊酸鈉組IκBa相對表達(dá)水平明顯升高(P<0.05或P<0.01)(圖2) 。與空白組比較各組大鼠NF-κBp65相對表達(dá)水平明顯升高(P<0.05或P<0.01)；與模型組比較高劑量組、中劑量組和丙戊酸鈉組NF-κBp65相對表達(dá)水平均明顯降低(P<0.05或P<0.01)。NF-κBp65、IκBa蛋白表達(dá)在高劑量組、中劑量組、低劑量組與丙戊酸鈉組之間比較，無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)(圖3、4)。

注：與空白組比較，▲P<0.05，▲▲P<0.01；與模型組比較，*P<0.05，**P<0.01

注：與空白組比較，▲▲P<0.01；與模型組比較，*P<0.05，**P<0.01

圖4 各組大鼠海馬IκBa、NF-κBp65蛋白電泳圖

3 討 論

癲癇是一種突發(fā)性，短暫性大腦神經(jīng)功能失調(diào)的疾病，以突然撲倒，兩目上視，口吐涎沫，口中發(fā)出豬羊叫聲，甚則昏不知人的一種發(fā)作性疾病。中醫(yī)認(rèn)為本病的病機(jī)與突受驚恐、痰濁阻竅、血瘀、氣機(jī)郁滯等有關(guān)。治法多以行氣開郁，化痰逐瘀，鎮(zhèn)心安神為主。裴新軍[3]認(rèn)為柴胡加龍骨牡蠣湯治療癲癇的機(jī)理與通膽腑調(diào)氣機(jī)有關(guān)，膽與心腦相通，膽屬陽木，肝與膽相表里，可以疏調(diào)人體氣機(jī)，柴胡加龍骨牡蠣湯以小柴胡湯為基礎(chǔ)，可以疏調(diào)少陽氣機(jī)，氣機(jī)調(diào)暢，風(fēng)火痰瘀等病理產(chǎn)物也會隨之消失，癲癇就會隨之緩解。

中醫(yī)對癲癇的認(rèn)識及柴胡加龍骨牡蠣湯應(yīng)用：柴胡加龍骨牡蠣湯出自《傷寒論》卷三辨太陽病脈證并治第107條：“傷寒八九日，下之……柴胡加龍骨牡蠣湯主之?！逼渲袩@和譫語屬于神志方面的表現(xiàn)，因此認(rèn)為柴胡加龍骨牡蠣湯具有安神定志，調(diào)達(dá)氣機(jī)的作用。本方可以看作由小柴胡湯減去甘草，加入鉛丹、桂枝、茯苓、大黃、龍骨、牡蠣而成。方中柴胡舒達(dá)少陽氣機(jī)，作為方中君藥，人參與半夏為臣藥補益中焦脾胃之氣，并具有降逆止嘔的作用，龍骨、牡蠣、鉛丹等質(zhì)重潛降之品，以斂上亢之虛陽，茯苓利小便以通陽氣，大黃通大便以瀉瘀熱，起到釜底抽薪的功效，桂枝通陽解肌發(fā)表以除身重，生姜、大棗調(diào)和陰陽，以祛在表之邪氣。本方具有調(diào)少陽樞機(jī)，鎮(zhèn)心安神，泄熱通腑的功效?！峨y經(jīng)·二十難》中認(rèn)為癲證以陰證和虛證為主，而狂證則以陽熱實證為多見。但是隨著病情的變化，癲證日久也可轉(zhuǎn)化成狂證，狂證也可轉(zhuǎn)為癲證，所以兩者常常同稱。癲狂多由先天稟賦不足，情志不遂氣機(jī)運行受阻而引起的臟腑功能逆亂阻塞腦竅，相當(dāng)于現(xiàn)代醫(yī)學(xué)說的精神分裂癥?？褡C多為痰火擾神所致，治療以瀉火滌痰為主，癲病多屬于氣滯痰結(jié)血瘀蒙蔽心竅所致，治法以行氣解郁，化痰開竅為要。柴胡加龍骨牡蠣湯可以看成是以小柴胡湯為底方來條暢少陽經(jīng)之氣機(jī)加桂枝溫陽通絡(luò)，以助膀胱氣化，茯苓健脾利濕以行水，龍骨、牡蠣蟄藏閉澀之性，安神定驚使本方泄中有斂，以防疏泄太過之弊端，鉛丹體重而性沉降，善入血分，有墜痰去怯的功效，故多用于治療驚癇癲狂類疾病，大黃泄熱通瘀，以止譫語，諸藥同用具有疏解少陽，通陽泄熱，鎮(zhèn)心安神的功效，用于治療陰陽逆亂，痰濁內(nèi)阻，神志錯亂之癥，如癲狂、癲癇、不寐、郁證等神志性疾病?！督?jīng)驗選秘》中提到：“凡癡癲、羊癲風(fēng)等癥，皆痰迷心竅所致”，肺為貯痰之器，脾為生痰之源，腎為生痰之本[4]。癲癇是由于風(fēng)、火、痰、驚、瘀、郁、虛上擾所致，臟腑失調(diào)從而造成血行失循、氣血虧損，可累及肝、脾、腎。臨床以健脾益氣、養(yǎng)心安神、化痰、補益肝腎為治理之契機(jī)[5]。顏彥武等[6]使用藥物貼服肚臍的方法，激發(fā)、疏通經(jīng)絡(luò)，調(diào)和氣血，從而調(diào)節(jié)患兒臟腑的陰陽平衡，最終達(dá)到改善腦癱兒童的預(yù)后。

柴胡加龍骨牡蠣湯現(xiàn)代藥理學(xué)研究：柴胡加龍骨牡蠣湯臨床應(yīng)用較廣泛，多用于治療癲癇、焦慮、抑郁、失眠等神志疾病[7]?，F(xiàn)代藥理研究發(fā)現(xiàn)柴胡加龍骨牡蠣湯具有鎮(zhèn)驚、催眠、抗抑郁、降血脂、防止動脈粥樣硬化等作用[8]。馬喜鳳等[9]認(rèn)為癲癇的發(fā)病與心、肝、脾三臟關(guān)系較為密切，臨床用柴胡加龍骨牡蠣湯合經(jīng)驗方平癇湯(郁金、丹參、代赭石、天麻、僵蠶、石菖蒲)治療癲癇效果較佳。梅國強教授[10]以柴胡加龍骨牡蠣湯為基礎(chǔ)方加減治療1例繼發(fā)性癲癇患者，經(jīng)兩個月治療后癲癇發(fā)作癥狀得到了完全控制。金杰教授[11]認(rèn)為癲癇的發(fā)病與情志刺激影響少陽樞機(jī)有關(guān)，臨床治療由情志刺激所引起的癲癇多用疏肝利膽法，選用柴胡加龍骨牡蠣湯加減來條暢少陽氣機(jī)效果較好。史金玉等[12]通過冠狀動脈前降支結(jié)扎法建立小鼠心肌梗死合并焦慮模型，中藥組小鼠給予柴胡加龍骨牡蠣湯灌胃治療，結(jié)果表明柴胡加龍骨牡蠣湯可以調(diào)控NF-κB信號通路，降低IL-1β、TNF-α、IL-6等炎癥因子的表達(dá)，從而改善心肌梗死小鼠的心肌損傷程度。鄒梅[13]將癲癇患者隨機(jī)分為加味組和對照組，分別給予加味柴胡加龍骨牡蠣湯合愈癇丸、愈癇丸口服治療，治療結(jié)果顯示加味組優(yōu)于對照組，有效率達(dá)93.8%。王倩等[14]實驗研究發(fā)現(xiàn)加味柴胡加龍骨牡蠣湯可以顯著降低戊四唑致癇大鼠的癲癇發(fā)作級別和發(fā)作時間，且與用藥劑量呈正相關(guān)。單萍等[15]將小鼠分為對照組、模型組、中藥大中小劑量組五組，并建立慢性癲癇小鼠模型，中藥大中小劑量組分別給予柴胡加龍骨牡蠣湯20、10、5 ml/kg灌胃治療7 d，實驗結(jié)果表明柴胡加龍骨牡蠣湯對癲癇小鼠腦組織具有保護(hù)作用。癲癇的耐藥性與多藥耐藥基因(MDR1)編碼的糖蛋白(Pgp)密切相關(guān)，癇性發(fā)作后導(dǎo)致血腦脊液屏障功能暫時受損，充當(dāng)?shù)诙榔琳?，同時也將抗癲癇藥物泵出細(xì)胞外，降低了藥效[16]。癲癇的反復(fù)發(fā)作常會導(dǎo)致腦神經(jīng)組織損傷而損傷神經(jīng)元，嚴(yán)重者可導(dǎo)致認(rèn)知功能障礙的發(fā)生[17]。癲癇患者往往伴有抑郁和焦慮，而抑郁和焦慮又進(jìn)一步降低了癲癇患者的生活質(zhì)量，增加了癲癇發(fā)作頻次[18]。

柴胡加龍骨牡蠣湯對癲癇大鼠血清炎癥因子IL-6、TNF-α的影響：癲癇在發(fā)生和發(fā)展的過程中，大腦因為過度驚厥會出現(xiàn)缺氧、水腫等情況，缺氧和水腫的神經(jīng)元及神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞會不斷的產(chǎn)生炎癥因子，炎癥因子又會導(dǎo)致神經(jīng)元興奮性增高，進(jìn)一步加劇癲癇發(fā)作。炎癥因子既是癲癇產(chǎn)生的產(chǎn)物，又是引起癲癇反復(fù)發(fā)作的病理影響因素。IL-6由星膠質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)生，TNF-α由小膠質(zhì)細(xì)胞釋放，IL-6和TNF-α能夠破壞血腦屏障，引起大量炎癥因子和細(xì)胞進(jìn)入腦內(nèi)，下調(diào)癲癇的發(fā)作閾值，引起癲癇發(fā)作。李國興[19]將65例癲癇患者分成原發(fā)性48例，繼發(fā)性17例，另選取30名健康者作為對照組，用ELISA法檢測患者血清和腦脊液中TNF-α變化，發(fā)現(xiàn)癲癇患者血清和腦脊液中TNF-α含量均明顯增高，因此認(rèn)為TNF-α為癲癇發(fā)生過程中海馬硬化的主要誘導(dǎo)因子。劉亞東等[20]用青霉素注射的方法制造癲癇大鼠模型，造模后用柴胡加龍骨牡蠣湯灌胃治療，治療結(jié)束后對腦中SOD等含量進(jìn)行測定,結(jié)果發(fā)現(xiàn)柴胡加龍骨牡蠣湯能降低癲癇大鼠腦中氧自由基含量，保護(hù)受損神經(jīng)元，發(fā)揮抗癲癇作用。故本次實驗選用IL-6和TNF-α作為癲癇炎癥指標(biāo)，治療結(jié)果顯示，與模型組相比，柴胡加龍骨牡蠣湯高、中劑量組大鼠血清中TNF-α、IL-6 表達(dá)均有明顯下降，差異有統(tǒng)計學(xué)意義；高劑量組大鼠血清TNF-α、IL-6表達(dá)下降明顯，治療效果優(yōu)于中、低劑量，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。表明柴胡加龍骨牡蠣湯治療癲癇的機(jī)制與降低癲癇大鼠血清中炎癥因子TNF-α、IL-6的表達(dá)有關(guān)。

柴胡加龍骨牡蠣湯對癲癇大鼠海馬NF-κBp65、IκBa蛋白表達(dá)的影響：在癲癇的發(fā)作過程中，會因為各種致癇因子入侵大腦損傷血腦屏障、促使膠質(zhì)細(xì)胞、神經(jīng)元興奮性增加，大量分泌IL-6、TNF-α、IL-1β，進(jìn)而影響到NF-κB、COX-2等下游炎癥通路，基因組穩(wěn)定性減弱，血管內(nèi)皮異常增生，加速神經(jīng)元凋亡和苔蘚纖維發(fā)芽的進(jìn)展過程。NF-κB參與了癲癇的炎癥進(jìn)展過程，IκB作為NF-κB的抑制蛋白，多數(shù)情況下，與NF-κB形成異源三聚體成分存在于細(xì)胞核中，一旦刺激和損傷影響到神經(jīng)元，IκB會出現(xiàn)磷酸化并發(fā)生蛋白水解，NF-κB與IκB解離并發(fā)生易位從而激活下游炎癥因子。周燕利等[21]將60只小鼠造癲癇模型，隨機(jī)分為對照組、模型組、治療組各20只，對照組給予0.9%氯化鈉注射，治療組給予姜黃素注射，治療結(jié)束取材后用Western blot檢測TLR4、NF-κB蛋白，結(jié)果顯示：與模型組相比，治療組TLR4、NF-κB蛋白顯著下降，說明TLR4/NF-κB信號通路參與了癲癇的發(fā)展過程中，姜黃素注射可以調(diào)控TLR4/NF-κB信號通路減輕癲癇的發(fā)作次數(shù)和頻率。本次實驗也選取了NF-κB作為柴胡加龍骨牡蠣湯治療癲癇的信號通路，實驗結(jié)果證明，癲癇發(fā)作時，大鼠腦內(nèi)NF-κBp65蛋白表達(dá)增高，IκBa蛋白表達(dá)降低，通過柴胡加龍骨牡蠣湯灌胃治療后，NF-κBp65蛋白表降低，IκBa蛋白表達(dá)增高，且柴胡加龍骨牡蠣湯高劑量治療效果優(yōu)于中、低劑量，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義，說明柴胡加龍骨牡蠣湯可以通過調(diào)控NF-κB信號通路治療癲癇。

本文探討了柴胡加龍骨牡蠣湯對癲癇大鼠NF-κB信號通路的影響，觀察了柴胡加龍骨牡蠣湯對炎癥因子IL-6、TNF-α的表達(dá)，分析了炎癥在癲癇發(fā)作過程中的作用，為癲癇的發(fā)病機(jī)制及治療思路提供依據(jù)。