徐煒 丁少坤 石露露

乳腺癌是女性發(fā)病率最高的惡性腫瘤，該病起病隱匿，早期診斷困難，導(dǎo)致病情持續(xù)進(jìn)展[1,2]。資料顯示，5%～12%的乳腺癌患者確診時已轉(zhuǎn)移至肝、腦等組織器官，治療難度大，預(yù)后差[3]。目前，吉西他濱、順鉑組成的GP化療方案是臨床治療晚期乳腺癌的常用措施，雖然能夠在一定程度上延緩病情進(jìn)展，但長期用藥不良反應(yīng)大[4]。本研究采用西黃丸聯(lián)合GP方案治療晚期乳腺癌，觀察聯(lián)合治療方案對患者血清炎性因子、氧化應(yīng)激及病灶組織增殖、侵襲基因表達(dá)的影響，報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2017年1月至2019年4月我院收治的110例晚期乳腺癌患者，隨機(jī)分為對照組和觀察組，每組55例。對照組年齡33～64歲，平均(42.75±5.48)歲：病程2～6年，平均(5.00±0.62)年；TNM分期：Ⅲ期30例，Ⅳ期25例。觀察組年齡35～66歲，平均(43.12±5.56)歲：病程2～8年，平均(5.09±0.68)年；TNM分期：Ⅲ期32例，Ⅳ期23例。2組基線資料比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。

1.2 納入與排除標(biāo)準(zhǔn)

1.2.1 納入標(biāo)準(zhǔn)[5,6]：①符合晚期乳腺癌診斷標(biāo)準(zhǔn)，均經(jīng)臨床癥狀、實(shí)驗(yàn)室檢查、病理學(xué)檢查確診；②TNM分期均為Ⅲ、Ⅳ期者；③預(yù)計生存時間≥3個月；④未發(fā)生遠(yuǎn)處組織器官轉(zhuǎn)移者；⑤近1個月內(nèi)未接受其他抗腫瘤治療者；⑥患者及家屬均簽署知情同意書。

1.2.2 排除標(biāo)準(zhǔn)：①已發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移者；②預(yù)計生存時間<3個月；③合并心腦血管病或肝腎等重要臟器功能不全者；④依從性差者；⑤過敏體質(zhì)或?qū)κ褂盟幬镞^敏者。

1.3 治療方法 2組均給予GP化療方案：吉西他濱(山東羅欣藥業(yè))1 000 mg/m2，第1、8天，靜脈滴注；順鉑(云南植物藥業(yè))20 mg/m2，第2～5天，靜脈滴注。觀察組在化療基礎(chǔ)上加用西黃丸(北京同仁堂)治療，3 g/次，2次/d。21 d為1個周期，2組均持續(xù)2個療程。

1.4 觀察指標(biāo)

1.4.1 標(biāo)本采集:分別于治療前后采集患者清晨空腹肘靜脈血4 ml，3 000 r/min離心5 min，留取血清標(biāo)本，-80℃冰箱保存。

1.4.2 炎性因子、氧化應(yīng)激:采用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)測定血清炎性因子[腫瘤壞死因子α(TNF-α)、超敏C-反應(yīng)蛋白(hs-CRP)]、氧化應(yīng)激[丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)]。

1.4.3 增殖、侵襲基因表達(dá):Trizol提取病灶組織總RNA，反轉(zhuǎn)錄試劑盒合成cDNA第一鏈，于7500型熒光定量PCR儀進(jìn)行擴(kuò)增反應(yīng)，設(shè)β-actin為內(nèi)參照基因，根據(jù)擴(kuò)增曲線計算增殖基因(Bad、Beclin、PKM2、ZIC1)、侵襲基因(RSK4m1、PDK4、TMEM158、Wnt1)mRNA表達(dá)量。

1.4.4 生活質(zhì)量:采用SF-36量表評分評估2組治療前后生活質(zhì)量，該量表包括軀體運(yùn)動、生理功能、心理功能、社會功能等8個維度，分值越高表示生活質(zhì)量越好。

2 結(jié)果

2.1 2組炎性因子比較 2組治療前TNF-α、hs-CRP比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；2組治療后TNF-α、hs-CRP均較治療前降低(P<0.05)，且觀察組TNF-α、hs-CRP低于對照組(P<0.05)。見表1。

表1 2組炎性因子比較

2.2 2組氧化應(yīng)激比較 2組治療前MDA、SOD、GSH-Px比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；2組治療后MDA均較治療前降低，SOD、GSH-Px均較治療前升高(P<0.05)，且觀察組MDA低于對照組，SOD、GSH-Px高于對照組(P<0.05)。見表2。

表2 2組氧化應(yīng)激比較

2.3 2組增殖基因表達(dá)比較 2組治療前Bad、Beclin、PKM2、ZIC1 mRNA表達(dá)比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；2組治療后Bad、Beclin mRNA表達(dá)均較治療前升高，PKM2、ZIC1 mRNA表達(dá)均較治療前降低(P<0.05)，且觀察組Bad、Beclin mRNA表達(dá)高于對照組，PKM2、ZIC1 mRNA表達(dá)低于對照組(P<0.05)。見表3。

表3 2組增殖基因表達(dá)比較

2.4 2組侵襲基因表達(dá)比較 2組治療前RSK4m1、PDK4、TMEM158、Wnt1 mRNA表達(dá)比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；2組治療后RSK4m1、PDK4 mRNA表達(dá)均較治療前升高，TMEM158、Wnt1 mRNA表達(dá)均較治療前降低(P<0.05)，且觀察組RSK4m1、PDK4 mRNA表達(dá)高于對照組，TMEM158、Wnt1 mRNA表達(dá)低于對照組(P<0.05)。見表4。

表4 2組侵襲基因表達(dá)比較

2.5 2組生活質(zhì)量比較 2組治療前SF-36量表評分比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；2組治療后SF-36量表評分均較治療前升高(P<0.05)，且觀察組SF-36量表評分高于對照組(P<0.05)。見表5。

表5 2組生活質(zhì)量比較 n=55,分,

3 討論

化療藥物在治療惡性腫瘤過程中容易誘發(fā)機(jī)體出現(xiàn)不同程度的炎性反應(yīng)，并刺激炎性因子分泌。其中TNF-α是單核巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子，能夠誘導(dǎo)其它炎性因子的合成和分泌，進(jìn)一步加重炎性反應(yīng)；hs-CRP是急性期反應(yīng)蛋白，其水平與炎性反應(yīng)程度密切相關(guān)[7,8]。此外，化療也破壞機(jī)體抗氧化系統(tǒng)，導(dǎo)致抗氧化能力下降，表現(xiàn)為MDA含量升高，SOD、GSH-Px活性降低，這對化療效果和預(yù)后均產(chǎn)生不利影響，不僅降低了患者生活質(zhì)量，也增加了復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移概率[9]。本研究結(jié)果顯示，2組治療前TNF-α、hs-CRP、MDA、SOD、GSH-Px比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；2組治療后TNF-α、hs-CRP、MDA均較治療前降低，SOD、GSH-Px均較治療前升高(P<0.05)，且觀察組TNF-α、hs-CRP、MDA低于對照組，SOD、GSH-Px高于對照組(P<0.05)，說明西黃丸聯(lián)合GP方案治療晚期乳腺癌能夠降低炎性因子和氧化應(yīng)激，從而改善患者預(yù)后。

異常增殖是腫瘤細(xì)胞的重要生物學(xué)特性，增殖基因的異常表達(dá)可作為評估腫瘤惡性程度和治療效果的可靠指標(biāo)。其中Bad是Bcl-2家族的重要成員，能夠促進(jìn)線粒體細(xì)胞色素C釋放所介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡進(jìn)程，進(jìn)而促進(jìn)細(xì)胞凋亡[10]；Beclin是調(diào)控細(xì)胞自噬的主要分子，通過啟動自噬進(jìn)程促進(jìn)細(xì)胞凋亡[11]；PKM2是細(xì)胞周期調(diào)控因子，能夠影響糖代謝途徑，相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)PKM2基因沉默能夠明顯抑制腫瘤細(xì)胞增殖并促進(jìn)其凋亡[12]；ZIC1在乳腺癌、胃癌、胰腺癌等多種惡性腫瘤組織高表達(dá)，與腫瘤分期密切相關(guān)[13]。我們分析了治療前后乳腺癌病灶組織增殖基因表達(dá)量變化，結(jié)果顯示，2組治療前Bad、Beclin、PKM2、ZIC1 mRNA表達(dá)比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；2組治療后Bad、Beclin mRNA表達(dá)均較治療前升高，PKM2、ZIC1 mRNA表達(dá)均較治療前降低(P<0.05)，且觀察組Bad、Beclin mRNA表達(dá)高于對照組，PKM2、ZIC1 mRNA表達(dá)低于對照組(P<0.05)，說明西黃丸聯(lián)合GP方案治療晚期乳腺癌能夠下調(diào)促增殖基因表達(dá)，上調(diào)促凋亡基因表達(dá)，從而抑制乳腺癌細(xì)胞異常增殖。

腫瘤細(xì)胞的侵襲性生長是導(dǎo)致病灶播散、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的重要原因，其中涉及多種侵襲基因的異常表達(dá)。RSK4m1、PDK4在多種惡性腫瘤組織表達(dá)降低，上調(diào)其表達(dá)能夠抑制腫瘤細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移[14,15]；TMEM158通過調(diào)控EMT進(jìn)程促進(jìn)腫瘤細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移[16]；Wnt1能夠激活Wnt1/β-catenin信號通路，并促進(jìn)其下游靶基因表達(dá)，參與惡性腫瘤增殖、侵襲、轉(zhuǎn)移[17]。本研究結(jié)果顯示，2組治療前RSK4m1、PDK4、TMEM158、Wnt1 mRNA表達(dá)比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；2組治療后RSK4m1、PDK4 mRNA表達(dá)均較治療前升高，TMEM158、Wnt1 mRNA表達(dá)均較治療前降低(P<0.05)，且觀察組RSK4m1、PDK4 mRNA表達(dá)高于對照組，TMEM158、Wnt1 mRNA表達(dá)低于對照組(P<0.05)，說明西黃丸聯(lián)合GP方案治療晚期乳腺癌能夠調(diào)控侵襲基因表達(dá)，從而抑制乳腺癌細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移。本研究還發(fā)現(xiàn)，2組治療前SF-36量表評分比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；2組治療后SF-36量表評分均較治療前升高(P<0.05)，且觀察組SF-36量表評分高于對照組(P<0.05)，說明西黃丸聯(lián)合GP方案治療晚期乳腺癌通過調(diào)控增殖、侵襲基因表達(dá)抑制腫瘤細(xì)胞惡性生物學(xué)行為，從而提高患者生活質(zhì)量。

綜上所述，西黃丸聯(lián)合GP方案治療晚期乳腺癌能夠明顯降低炎性因子和氧化應(yīng)激，并調(diào)控增殖、侵襲基因表達(dá)，從而改善患者生活質(zhì)量[18]。相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，西黃丸通過抑制乳腺癌荷瘤小鼠腫瘤生長，機(jī)制與激活MEKK1/SEK1信號通路，進(jìn)而促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡有關(guān)，這可能是西黃丸發(fā)揮治療作用的可能分子機(jī)制[19]。另有研究報道，西黃丸能夠抑制STAT3信號通路激活，從而降低肝癌細(xì)胞增殖和侵襲活性[20]。但西黃丸調(diào)控乳腺癌細(xì)胞增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移的具體信號通路仍需深入研究。