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        外源硒處理的花生芽蛋白中五種硒形態(tài)分析

        2021-09-26 06:49:20邵志穎
        中國糧油學(xué)報 2021年8期
        關(guān)鍵詞:胚軸胚根子葉

        薛 梅 邵志穎 李 彭

        (南京財經(jīng)大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院;江蘇省糧油品質(zhì)控制及加工技術(shù)重點實驗室;江蘇省現(xiàn)代糧食流通與安全協(xié)同創(chuàng)新中心,南京 210023)

        花生是我國主要的經(jīng)濟(jì)作物和油料作物,種植面積廣泛?;ㄉ鸂I養(yǎng)價值較高,含有易被人體消化吸收的高質(zhì)量蛋白和豐富的不飽和脂肪酸,其中含有8種人體必需氨基酸,亞油酸和油酸占總脂肪含量的80%左右[1]。此外,花生中的天然多酚物質(zhì)白藜蘆醇,具有抑菌、防癌、降血脂、抗氧化等保健功能,被科學(xué)界廣泛關(guān)注[2]。經(jīng)常食用花生可以改善腦血管功能,延緩衰老,增強(qiáng)記憶,被人們稱為“長生果”[3,4]。同時,花生具有很強(qiáng)的富硒能力,它可以將70%以上從培養(yǎng)基中吸收的無機(jī)硒轉(zhuǎn)化為有機(jī)硒[5],有關(guān)花生施用硒元素達(dá)到富硒效果以及富硒花生中硒形態(tài)的研究已有廣泛報導(dǎo)[6,7]?;ㄉN子發(fā)芽過程中,貯藏物質(zhì)在水解酶的催化作用下被分解成小分子化合物,其營養(yǎng)物質(zhì)更易于吸收。詹玉婷等[8]發(fā)現(xiàn),與未發(fā)芽的花生相比,花生芽主要營養(yǎng)成分中的游離氨基酸和維生素C含量顯著升高,粗脂肪和可溶性蛋白含量顯著減少,活性成分白藜蘆醇的含量也顯著增加。花生芽作為一種新型芽菜品種,具有營養(yǎng)易吸收、風(fēng)味獨特、經(jīng)濟(jì)價值高、生產(chǎn)周期短、無污染等特點,備受中國消費者的青睞。花生芽也被稱為“長生菜”,除了含有易于被人體吸收的脂肪、植物蛋白等成分,還含有多種維生素和微量元素[9]。此外,花生芽菜中也含有豐富的白藜蘆醇,同樣具有抗氧化、抗腫瘤、抗癌等保健功效[10]。

        硒是人體必需的微量元素之一,是人體部分抗氧化酶和硒蛋白的重要組成部分[11]。該元素可以保護(hù)機(jī)體不受由自由基引起的氧化性損傷的損害,具有防癌、提高人體免疫力和抗衰老等功效[12]。硒元素?zé)o法在體內(nèi)合成,人體所需的硒元素只能從食物中攝取。在我國,除了湖北恩施等少數(shù)地區(qū)外,72%的地區(qū)都屬于貧硒地帶,全國約三分之二的人口存在不同程度的硒攝入不足[13],因此,補(bǔ)硒對于提高我國人民身體素質(zhì)顯得特別重要。由于無機(jī)硒不易被吸收,并且易對人體造成毒害[14],因此經(jīng)植物轉(zhuǎn)化后的硒是人體攝入硒的重要來源,目前常采用土壤施硒和噴硒的方式,使無機(jī)硒轉(zhuǎn)化為有機(jī)硒,通過農(nóng)作物進(jìn)入食物鏈,以供人體利用[15]。然而,土壤施硒很容易造成土壤和環(huán)境污染,富硒花生芽的生產(chǎn)可以通過硒溶液浸泡,在無土條件下完成,更加環(huán)保?;ㄉ泻胸S富的優(yōu)質(zhì)蛋白,花生芽生長周期短,加工簡單,營養(yǎng)成分更易吸收,通過花生芽來補(bǔ)充膳食中的硒元素是一種一舉兩得的方法。近年來,有學(xué)者研究了多種蔬菜芽菜富硒后的形態(tài)種類及變化[16],Wang等[17]研究了花生芽的富硒機(jī)理,發(fā)現(xiàn)通過花生幼苗生物轉(zhuǎn)化作用富集將無機(jī)硒轉(zhuǎn)化為有機(jī)硒是培育富硒花生芽的有效手段,其富硒的機(jī)理跟花生幼苗的抗氧化系統(tǒng)和次生代謝均存在密切聯(lián)系。但對花生芽富硒過程中的硒形態(tài)及其分布特征未見報道。本研究通過用Na2SeO3浸泡花生種子,使得無機(jī)硒在花生發(fā)芽過程中轉(zhuǎn)化為有機(jī)硒,觀察不同外源硒水平對花生芽生長狀況的影響,分析花生芽不同部位無機(jī)硒和有機(jī)硒的賦存形態(tài),以及不同形態(tài)的硒水平。旨在為富硒花生芽的培養(yǎng)和功能開發(fā)理論依據(jù),也為花生這一優(yōu)質(zhì)營養(yǎng)資源的深度開發(fā)和利用提供參考。

        1 材料與方法

        1.1 材料與試劑

        硒標(biāo)準(zhǔn)液(1 000 μg/mL)、硒代甲硫氨酸(SeMet,99%)、硒代胱氨酸(SeCys2,98%)、甲基硒代半胱氨酸(MeSeCys,95%)、亞硒酸鈉(Na2SeO3,98%)、硒酸鈉(Na2SeO4,98%)、α-淀粉酶、蛋白酶XIV(≥2 500 U/mg)、甲醇(色譜純)、硝酸、磷酸、草酸、氫氧化鈉、次氯酸鈉、檸檬酸、磷酸二氫鈉(均為優(yōu)級純)。

        1.2 儀器與設(shè)備

        MARS6微波消解儀,7700x電感耦合等離子體質(zhì)譜儀,1260系列高效液相色譜儀,人工氣候箱,64R冷凍離心機(jī)。

        1.3 富硒花生芽發(fā)芽工藝

        花生種子經(jīng)篩選、除雜,取100 g成熟飽滿均勻的顆粒,用1% NaClO溶液浸泡5 min,蒸餾水沖洗后,轉(zhuǎn)移至已消毒燒杯中。平均分成5份,加入100 mL不同濃度的Na2SeO3溶液(濃度分別為 0、10、20、30和40 mg/L),置于培養(yǎng)箱中25 ℃恒溫浸泡6 h后取出、超純水沖洗、瀝干,均勻鋪在鋪有2層紗布的培養(yǎng)皿(Ф=30 cm)中,均勻噴灑去離子水30 mL,置于人工氣候箱中培養(yǎng),溫度為32 ℃,濕度為70%,每12 h噴淋20 mL蒸餾水,120 h后停止發(fā)芽?;ㄉ拷?jīng)超純水沖洗后,將子葉、胚軸、胚根三部分分開,分別冷凍干燥,干燥后的樣品用粉碎機(jī)粉碎,過40目篩,冷藏備用。

        1.4 芽長、芽粗和發(fā)芽率

        芽長和芽粗:隨機(jī)選取20粒發(fā)芽花生種子,用最小刻度為0.1 cm 的軟尺對花生芽的長度進(jìn)行測量;用游標(biāo)卡尺對芽粗進(jìn)行測量。

        發(fā)芽率:按GB/T 3543.4—1995《農(nóng)作物種子檢驗規(guī)程:發(fā)芽試驗》,隨機(jī)取100粒種子進(jìn)行花生富硒發(fā)芽試驗,統(tǒng)計發(fā)芽率。

        1.5 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備

        Se元素標(biāo)曲的制備:將Se元素標(biāo)準(zhǔn)工作溶液以1%硝酸-超純水稀釋,配制成0.0、1.0、5.0、10.0、20.0、50.0、100.0 μg/L,ICP-MS調(diào)諧合格后,將標(biāo)準(zhǔn)溶液引入儀器,測定Se元素和內(nèi)標(biāo)元素的信號響應(yīng)值,以Se元素的濃度為橫坐標(biāo),待測元素與內(nèi)標(biāo)元素響應(yīng)信號值的比值為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

        硒形態(tài)標(biāo)曲的制備:將5種硒形態(tài)標(biāo)準(zhǔn)品混合并逐級稀釋,配置成濃度為0.0、1.0、5.0、10.0、20.0、50.0 μg/L的混合標(biāo)準(zhǔn)工作液,以五種硒形態(tài)峰面積-濃度做圖,得到標(biāo)準(zhǔn)曲線。

        1.6 樣品中硒蛋白的提取

        準(zhǔn)確稱取10 g凍干樣品,加入30 mL丙酮攪拌2 h,4 000 r/min離心10 min,棄上清,重復(fù)操作3次,將沉淀干燥后得到脫脂樣品。取脫脂后的樣品0.2 g,加入5 mL α-淀粉酶溶液(26.48 mg/mL),混合溶液在37 ℃水浴中超聲波(40 kHz)30 min,37 ℃下水浴振蕩2 h。再加入2 mL蛋白酶XIV溶液(7.85 mg/mL)于提取液中,在45 ℃水浴中超聲波30 min,然后45 ℃下水浴振蕩2 h提取樣品中硒的化合物。提取液在5 000 r/min下離心20 min,取上清液過孔徑為5 ku的超速離心膜,除去提取液中可能會干擾色譜分析的大分子雜質(zhì),經(jīng)0.45 μm過濾膜后上機(jī)分析。

        1.7 ICP-MS測總硒含量

        稱取0.3 g樣品于消解罐中,加入5 mL HNO3和1 mL H2O2進(jìn)行微波消解,微波消解程序見表1。消解結(jié)束后,冷卻,打開消解罐,樣品溶液轉(zhuǎn)移至10 mL容量瓶中,用超純水洗滌3次,合并洗滌液,再用超純水定容,搖勻,同樣方法做試劑空白試驗。分別測定花生芽凍干樣品和硒蛋白樣品中的硒含量。

        表1 微波消解程序

        用ICP-MS測定樣品中總硒含量,ICP-MS儀器參數(shù)見表2。

        表2 HPLC-ICP-MS分析條件

        1.8 花生發(fā)芽過程中不同部位消化后硒形態(tài)含量測定

        硒形態(tài)的測定采用HPLC-ICP-MS。ICP-MS和HPLC的工作參數(shù)見表2。

        硒形態(tài)含量計算公式:

        式中:X為試樣中每種硒形態(tài)的含量/mg/kg;C為樣品溶液中每種硒形態(tài)的濃度/μg/L;C0為空白溶液中每種硒形態(tài)的濃度/μg/L;V為樣品溶液最終定容體積/mL;M為試樣質(zhì)量/g;f為稀釋倍數(shù),計算結(jié)果保留兩位有效數(shù)字。

        1.9 數(shù)據(jù)處理

        實驗進(jìn)行5次重復(fù),每次重復(fù)6個平行。采用Origin 8.5對數(shù)據(jù)進(jìn)行處理作圖,用SPSS 22.0軟件對結(jié)果進(jìn)行分析,多重比較采用鄧肯氏新復(fù)極差法(P<0.05)。

        2 結(jié)果與討論

        2.1 外源硒對花生芽生長情況的影響

        由圖1可見,隨著Na2SeO3濃度的升高,花生芽長、芽粗和發(fā)芽率均呈下降趨勢。當(dāng)Na2SeO3濃度為30 mg/L時,芽長開始受到抑制,降低為62.5 mm,顯著低于對照和10 mg/L組。當(dāng)Na2SeO3濃度升高至40 mg/L時,花生芽生長進(jìn)一步受到抑制,芽長低至58.8 mm。此外,外源硒濃度低于30 mg/L時,各處理組芽粗沒有顯著差異,當(dāng)濃度為40 mg/L時,芽粗受到抑制,為5.29 mm,顯著低于對照、10 mg/L和20 mg/L組。發(fā)芽率是確定作物播種量的重要依據(jù),也是鑒定種子質(zhì)量好壞的主要標(biāo)志[18]。隨著Na2SeO3濃度的升高,花生發(fā)芽率呈現(xiàn)下降趨勢。未經(jīng)硒處理的花生發(fā)芽率最高,為96.7%,Na2SeO3濃度低于20 mg/L時,花生發(fā)芽率沒有顯著變化。隨著外源硒濃度繼續(xù)升高,發(fā)芽率顯著降低。綜上指標(biāo)可見,高濃度外源硒對花生芽的生長具有明顯的抑制作用。胡婷等[19]研究了外源硒對綠豆發(fā)芽情況的影響,發(fā)現(xiàn)綠豆在Na2SeO3濃度為0.5~5.0 mg/L時發(fā)芽率達(dá)到最高100.0%,Na2SeO3濃高于10.0 mg/L時,種子發(fā)芽率低于對照組。彭誠等[20]研究發(fā)現(xiàn),白菜種子發(fā)芽率在較高質(zhì)量濃度Na2SeO3溶液下表現(xiàn)出抑制作用。王玉鳳等[21]通過研究番茄種子發(fā)現(xiàn),在外源硒質(zhì)量濃度為4.0 mg/L時,其發(fā)芽率最大,種子萌發(fā)第7天時的芽鮮質(zhì)量、根鮮質(zhì)量、芽長、根長、芽干質(zhì)量和根干質(zhì)量也達(dá)到最大值;而高質(zhì)量濃度的硒處理(>4.0 mg/L)則表現(xiàn)為一定的抑制作用。綜合以上研究,高濃度外源硒會不同程度抑制糧食和蔬菜種子的發(fā)芽,這與本實驗中花生種子發(fā)芽率研究結(jié)果一致。

        注:同一系列不同字母表示差異顯著(P<0.05)。圖1 不同濃度硒浸泡的花生發(fā)芽5 d后的芽長、芽粗和發(fā)芽率

        2.2 色譜和質(zhì)譜條件優(yōu)化

        2.2.1 五種硒形態(tài)色譜分離條件優(yōu)化

        本實驗選用Hamilton PRP X-100(250 mm×4.1 mm,10 μm)陰離子交換柱進(jìn)行5種硒形態(tài)化合物的分離,比較了磷酸二氫銨和檸檬酸2種流動相,結(jié)果表明,用40 mmol/L磷酸二氫銨作為流動相時,所測5種硒形態(tài)化合物并不能良好的分開,MeSeCys和SeIV形態(tài)峰出現(xiàn)重疊。選用6 mmol/L檸檬酸所為流動相時,能夠?qū)崿F(xiàn)5種不同的硒形態(tài)化合物的完全分離,此外,檸檬酸作為流動相,無毒、成分單一易于配置,因此選用檸檬酸作為流動相。有學(xué)者在進(jìn)行硒形態(tài)分離時發(fā)現(xiàn),在不同的酸度條件下,硒的不同形態(tài)會以陽離子、陰離子或者兩性離子的形式存在,因此,流動相pH值是影響5種硒形態(tài)的保留時間和分離效果的主要因素[22]。本實驗比較了檸檬酸pH為4.5、5.0和5.5時的分離效果,結(jié)果表明,當(dāng)pH為4.5時,SeMet和SeIV形態(tài)峰出現(xiàn)重疊,不能完全分開;當(dāng)pH值達(dá)到5.0時,SeIV形態(tài)峰保留時間縮短,與SeMet峰完全分開,實現(xiàn)了5種硒形態(tài)化合物的完全分離,同時,SeVI保留時間明顯縮短,提高了分離效率;當(dāng)pH值增大至5.5時,MeSeCys和SeIV峰無法完全分開,而SeMet和SeVI峰幾乎重疊。通過優(yōu)化梯度洗脫發(fā)現(xiàn),當(dāng)檸檬酸濃度逐漸增大時,SeVI保留時間縮短,當(dāng)濃度為15 mmol/L時,既可以縮短SeVI的保留時間,又可以實現(xiàn)5種硒形態(tài)化合物的完全分離,當(dāng)濃度大于15 mmol/L時,SeMet和SeVI形態(tài)峰重疊。綜合考慮保留時間和分離度,優(yōu)化5種硒形態(tài)化合物混合標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖見圖3。

        圖2 五種硒形態(tài)的HPLC-ICP-MS色譜圖

        2.2.2 質(zhì)譜條件優(yōu)化

        質(zhì)譜干擾包括同量異位素重疊干擾、多原子離子干擾、難熔氧化物離子干擾和雙電荷離子干擾[23]。Se元素的同量異位素中,78Se和80Se會受到40Ar38Ar+、40Ar40Ar+、HBr+等多原子離子干擾,背景值太高不能獲得很好的靈敏度。本研究采用高氦分析模式(HEHe)消除多原子離子干擾,并對儀器條件進(jìn)行優(yōu)化,通過7Li、89Y和205Tl矯正儀器,使其分辨率在0.65~0.080 u,氧化物(CeO+/Ce+)≤3%,雙電荷≤2%,確保消除雙電荷、同位素、氧化物、氫化物及多原子離子等物質(zhì)對結(jié)果的干擾。同時,為了消除非質(zhì)譜干擾,降低基體效應(yīng)的影響,減少分析信號的漂移,本研究通過內(nèi)標(biāo)加入進(jìn)行定量校正?;跍y定同位素豐度最大原則和譜線干擾最少原則,選擇72Ge作為內(nèi)標(biāo),對78Se進(jìn)行定量測定。

        2.3 外源硒對花生芽不同部位硒含量的影響

        Se元素標(biāo)準(zhǔn)曲線為y=2.403x+0.999 1,校正曲線線性相關(guān)系數(shù)為0.999 6,元素的檢出限為0.014 μg/kg。分別測得花生芽各部位總硒含量見表3。

        表3 花生芽各部位總硒含量

        結(jié)果表明,隨著Na2SeO3濃度的升高,各部位硒含量均顯著增加。由各部位硒的分布百分比可見,當(dāng)Na2SeO3濃度低于10 mg/L,花生芽各部位富硒能力為胚根>胚軸>子葉;當(dāng)Na2SeO3濃度為20 mg/L,各部位富硒能力為胚根>子葉>胚軸,當(dāng)Na2SeO3濃度升高至30和40 mg/L,花生芽各部位富硒能力為子葉>胚根>胚軸。Wang等[17]研究發(fā)現(xiàn),Na2SeO3濃度低于10 mg/L時,花生幼苗子葉中的總硒含量顯著低于胚軸和胚根,表明幼苗的根部和下胚軸對硒的富集能力強(qiáng)于子葉。該研究與本實驗結(jié)果一致,這可能跟幼苗通過根部吸收和轉(zhuǎn)化無機(jī)硒有密切關(guān)系。然而,隨著外源硒濃度升高,子葉中的硒含量比例逐漸升高,胚根和胚軸中硒含量比例逐漸降低,說明高濃度的外源硒抑制了花生發(fā)芽過程中硒元素由子葉向胚軸和胚根的轉(zhuǎn)移。

        2.4 外源硒對花生芽各部位硒形態(tài)及其含量的影響

        2.4.1 HPLC-ICP-MS測定硒形態(tài)的線性方程和檢出限

        按儀器工作條件對5種硒形態(tài)化合物標(biāo)準(zhǔn)溶液系列進(jìn)行測定,將樣品處理過程的空白溶液連續(xù)測定10次,以標(biāo)準(zhǔn)偏差的3倍計算儀器檢出限。5種硒形態(tài)的保留時間、線性方程和檢出限,見表4。在0~50 μg/L范圍內(nèi),各硒形態(tài)校正曲線呈良好的線性關(guān)系,線性相關(guān)系數(shù)為0.999 1~0.999 7,檢出限為0.4~2.2 μg/kg。結(jié)果表明,該方法具有較高的靈敏度。

        表4 五種硒形態(tài)的保留時間、線性方程和檢出限

        2.4.2 花生芽蛋白中硒形態(tài)及含量

        不同濃度外源硒浸泡的花生發(fā)芽5 d后,運用HPLC-ICP-MS法分別測定子葉、胚軸、胚根中的硒形態(tài)及分布特征,測定圖譜及數(shù)據(jù)結(jié)果分別見圖3和表5。

        表5 花生芽蛋白中五種硒形態(tài)含量和百分比

        圖3 花生芽子葉、胚軸和胚根中的硒形態(tài)HPLC-ICP-MS色譜圖

        結(jié)果表明,當(dāng)Na2SeO3濃度低于10 mg/L時,3個部位中的硒形態(tài)均為SeCys2、SeIV和SeMet 3種,其中SeCys2含量最高,子葉中有機(jī)硒百分比為63.72%和63.05%,胚軸和胚根中有機(jī)硒則達(dá)到75.42%~81.14%,說明在該濃度范圍,花生經(jīng)過5d發(fā)芽,大多數(shù)無機(jī)硒轉(zhuǎn)化為有機(jī)硒,并且,胚軸和胚根部位有機(jī)硒轉(zhuǎn)換能力高于子葉。當(dāng)Na2SeO3濃度為20 mg/L時,胚軸和胚根中,除了SeCys2、SeIV和SeMet 3種硒形態(tài)外,出現(xiàn)了MeSeCys,含量較低;該濃度下子葉有機(jī)硒降低為57.46%,胚軸和胚根中有機(jī)硒占比為73.98%和75.21%,說明有機(jī)硒轉(zhuǎn)化率胚根>胚軸>子葉。當(dāng)Na2SeO3濃度為30 mg/L時,3個部位中的硒形態(tài)均為SeCys2、MeSeCys、SeIV和SeMet 4種,其中,子葉部位的SeIV含量最高,占49.01%,顯著高于低濃度處理組,MeSeCys含量最少,占2.78%;胚根和胚軸中4種硒形態(tài)含量均為SeCys2>SeIV>SeMet>MeSeCys,且有機(jī)硒占比顯著高于子葉,說明胚軸和胚根的有機(jī)硒轉(zhuǎn)化能力高于子葉。當(dāng)Na2SeO3濃度為40 mg/L時,3個部位均出現(xiàn)5種硒形態(tài),SeVI只有在該濃度下出現(xiàn),含量最低,占總硒形態(tài)的2.97%~4.08%,SeVI的出現(xiàn)可能是大量的SeIV長時間未被吸收而氧化后的結(jié)果;各部位有機(jī)硒占比為胚軸>胚根>子葉。此外,外源硒濃度為10和20 mg/L時,各部位有機(jī)硒所占比例較高,且花生芽生長情況不受影響,適宜作為食用和生產(chǎn)研究參考。

        五種硒形態(tài)中,有機(jī)硒對人體健康均具有積極作用。SeMet被認(rèn)為是硒的最易吸收的形式,能顯著抑制前列腺癌的患病率;SeCys2最常見于含硒蛋白質(zhì),例如谷胱甘肽過氧化物酶、碘甲狀腺原氨酸脫碘酶和硫氧還蛋白還原酶,具有抗氧化和調(diào)節(jié)甲狀腺功能的作用[24];MeSeCys具有化學(xué)預(yù)防作用[25]。隨著外源硒濃度升高,SeCys2在各部位中占比逐漸降低,MeSeCys、SeIV和SeVI逐漸增加,SeMet變化沒有規(guī)律,各部位形態(tài)組成的變化說明無機(jī)硒向有機(jī)硒的轉(zhuǎn)化方式發(fā)生了變化。Bodnar等[16]研究了SeVI在西藍(lán)花、蘿卜、紅甘藍(lán)、芥菜等6種芽菜中的轉(zhuǎn)化,發(fā)現(xiàn)Na2SeO3浸泡的蔬菜種子發(fā)芽后,MeSeCys含量增加,該結(jié)果與本實驗結(jié)果一致。此外,花生芽中總有機(jī)硒占比隨著外源硒濃度升高,由75.18%降至50.48%,富硒能力受到顯著抑制。無論是子葉還是胚軸與胚根,都能檢測到無機(jī)硒和有機(jī)硒兩種形態(tài)同時存在,這說明亞硒酸鈉被花生種子吸收后,一部分以無機(jī)硒的形式輸送到花生芽的不同部位后再轉(zhuǎn)化為有機(jī)硒,也可能有一部分無機(jī)硒在子葉轉(zhuǎn)化成有機(jī)硒后再運輸?shù)狡渌课?。該結(jié)果與先前學(xué)者報導(dǎo)結(jié)果一致[26,27]。但也有可能涉及植物吸收硒元素以后在植物體內(nèi)存在無機(jī)硒與有機(jī)硒的互相轉(zhuǎn)化過程[28]。

        3 結(jié)論

        無機(jī)硒可以通過花生幼苗的生物轉(zhuǎn)化作用轉(zhuǎn)化為有機(jī)硒富集在花生芽各個部位,是培育富硒花生芽的有效手段。隨著Na2SeO3浸泡濃度的升高,花生芽長、芽粗和發(fā)芽率均呈降低趨勢,高濃度外源硒抑制花生芽生長;高濃度的外源硒抑制了花生發(fā)芽過程中硒元素由子葉向胚軸和胚根的轉(zhuǎn)移;未經(jīng)硒浸泡的花生發(fā)芽后,三個部位均檢測到三種硒形態(tài),其中SeCys2占比最高,隨著硒濃度升高,各部位硒形態(tài)種類增加,無機(jī)硒(SeIV和SeVI)占比逐漸升高,SeCys2和MeSeCys占比逐漸降低,SeMet占比沒有規(guī)律性變化,各部位有機(jī)硒總量占比降低,無機(jī)硒向有機(jī)硒轉(zhuǎn)化率收到抑制。

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