田剛 劉暢 王龍 劉學輝

中圖分類號：S831.2 文獻標識碼：B 文章編號：1673-1085（2021）8-0026-04

我國獸醫(yī)生物制品規(guī)程（2001年版）明確規(guī)定：禽用病毒性活疫苗的毒種、活疫苗以及病毒性滅活苗的毒種、生產(chǎn)用毒種的制備，必須使用SPF雞胚或利用SPF雞胚制備的細胞培養(yǎng)物。 SPF雞及其雞胚是進行生命科學研究和病毒學研究的標準實驗動物，是生產(chǎn)和鑒定人、畜禽等多種生物制品的高標準原材料。通過飼料、營養(yǎng)和管理等技術(shù)提高SPF種蛋的孵化率和雞胚健活率，對于提高SPF種蛋的綜合利用率、降低生產(chǎn)成本，具有十分重要的意義。筆者結(jié)合多年飼養(yǎng)SPF雞以及到疫苗生產(chǎn)廠家服務(wù)的經(jīng)驗，從SPF種蛋的選擇、飼料、營養(yǎng)、儲存、孵化、消毒等多個環(huán)節(jié)進行歸納總結(jié)，旨在提高SPF種蛋的孵化率和利用率。

1 選擇微生物和遺傳均合格的SPF雞群

首先，應(yīng)提供種蛋生產(chǎn)方SPF雞群近期微生物監(jiān)測合格的報告，雞群檢測的時間應(yīng)控制在2～4周以內(nèi)。最好既有第三方檢測報告，又有自檢的報告;其次，應(yīng)提供SPF雞群的遺傳背景。SPF雞品系的近交代次不宜過高，因為近親繁殖不僅會降低雞胚的活力，還可導致雞胚的死胚率增加。研究表明，雞群的近交系數(shù)每增加10%，孵化率就會降低4.4%，可能是因為種蛋“尿囊”合攏差，導致死胚增多，孵化率降低;第三，種蛋的外觀要合符規(guī)定。如蛋殼的顏色最好是白色，蛋形應(yīng)為橢圓形，蛋重應(yīng)在55～65 g，沙殼蛋和畸形蛋的比例不能超過2%等。

在SPF種蛋到達后，可隨機挑選1%的種蛋按照國家規(guī)定的SPF雞微生物監(jiān)測標準進行檢測，或委托有資質(zhì)的實驗室對種蛋進行全方位的質(zhì)量檢測。一旦發(fā)現(xiàn)問題，及時處理和解決。

2 提供科學合理的飼料營養(yǎng)

禽類胚胎的發(fā)育在體外發(fā)生，其發(fā)育期的營養(yǎng)則主要由種蛋內(nèi)的物質(zhì)提供，故種蛋內(nèi)充足的營養(yǎng)蓄積是確保雞胚發(fā)育良好的關(guān)鍵。SPF種雞只有飼喂優(yōu)質(zhì)、營養(yǎng)均衡的全價飼料，才能保證生產(chǎn)出營養(yǎng)充分的高質(zhì)量SPF種蛋。

如果飼料中，某種營養(yǎng)成分缺乏或不平衡，就會導致SPF種雞營養(yǎng)不良，進而使種蛋缺乏雞胚發(fā)育所必須的營養(yǎng)物質(zhì)，從而對雞胚的發(fā)育造成傷害。飼料中銅、鐵、錳、鋅、硒等礦物質(zhì)如果缺乏，會導致雞胚的畸形率增多，并且孵化后期死亡雞胚增多;飼料中如果缺乏維生素，對種蛋的孵化影響更大。如果飼料中缺乏維生素A和維生素D，不僅導致種蛋的合格率嚴重下降，而且可以導致種蛋孵化率下降約10%，出雛率降低約20%;如果維生素B和維生素E缺乏，SPF公雞精液質(zhì)量差，母雞的產(chǎn)蛋率降低約10%，并且導致受精率降低約20%，還會導致胚胎畸形、異位或孵化過程中大量死亡。因此，在整個SPF雞飼養(yǎng)周期內(nèi)，要特別注意飼料維生素A、維生素B族、微量元素鋅、碘、錳、硒及礦物質(zhì)鈣、磷等的供給與平衡，滿足SPF雞在不同飼養(yǎng)階段的營養(yǎng)需求。

必須關(guān)注的是：SPF雞飼料需要經(jīng)高壓滅菌（121 ℃、20 min），而經(jīng)過滅菌的飼料通常會造成部分氨基酸和大部分維生素的損失。因此，應(yīng)注意及時補充或改變飼料配方，在飼料高壓滅菌前添加一定的保險劑量。一般情況下，經(jīng)過高壓滅菌的飼料，其粗蛋白的損失量約為4.2%，微量元素和礦物質(zhì)變化不大;但高壓滅菌通常對維生素損失較大，其中以維生素A、維生素D、維生素E及維生素B族元素損失較大，一般在10%～60%。

為此，可根據(jù)SPF雞的生物學特性和飼料高壓滅菌導致營養(yǎng)易損耗的特點，設(shè)計專門的飼料配方，不僅要保證飼料中適宜的能量和蛋白質(zhì)，還要確保充足的微量元素和維生素。在日常飼養(yǎng)管理中可通過添加一定保險劑量（比標準提高10%～30%）的氨基酸和維生素進行補充，以便為SPF雞提供營養(yǎng)較為全面的優(yōu)質(zhì)飼料;其次，可改變飼料的滅菌方式，一般情況下，輻照滅菌對飼料的影響相對較小。無論哪種方式對飼料進行滅菌，均應(yīng)進行對飼料的無菌檢驗和營養(yǎng)成分檢測，且經(jīng)無菌檢測合格后方可使用，以確保SPF雞不被微生物污染。

3 SPF種蛋的收集和消毒

在SPF雞飼養(yǎng)過程中，應(yīng)及時收集種蛋，至少每兩小時收集一次，該方法不僅可將種蛋受到雞糞污染的可能性降至最小，還可以減少種蛋的破損率。種蛋收集后，應(yīng)立即進行表面的清潔和消毒，去除雞蛋表面的糞便。每天收集的種蛋一般應(yīng)集中表面消毒，可采用表面消毒劑、甲醛和高錳酸鉀熏蒸等方法進行消毒。進行甲醛和高錳酸鉀氣體熏蒸消毒時，應(yīng)在相對密封的環(huán)境進行，具體做法是每立方米空間用高錳酸鉀14 g加28 mL甲醛溶液熏蒸20 min。熏蒸種蛋時，熏蒸室應(yīng)保持室溫24 ℃以上，相對濕度保持在75%以上，效果最佳。

4 貯存和篩選

4.1 種蛋的貯存

SPF種蛋一般貯存不超過7 d，以一周內(nèi)為宜，3～5 d效果為最好;超過8 d，則雞胚的胚胎活力降低，孵化時間延長，孵化率降低。當SPF種蛋貯存3 d以內(nèi)時，應(yīng)將種蛋的大頭沖上、小頭向下放置，這樣有利于提高孵化率并縮短孵化時間;當種蛋貯存時間超過7 d時，應(yīng)將小頭向上放置，為避免胚盤與殼膜發(fā)生粘連，最好每天翻蛋1～2次，每次翻蛋角度為45 °。超過2周以上的SPF蛋不宜用作孵化。

溫度與濕度：1～3 d最適宜存放溫度為17～18 ℃;7 d以內(nèi)為15～17 ℃;超過一周以上貯存溫度為10～12 ℃。種蛋的保存最佳濕度為75%～80%之間，濕度太低，蛋內(nèi)水分蒸發(fā)過快，孵化率降低;濕度太高，蛋表面易產(chǎn)生霉菌，降低孵化率。

4.2 種蛋的篩選

SPF種蛋應(yīng)選擇蛋殼細致均勻，厚薄適中，剔除軟皮蛋、破蛋、沙殼蛋、畸形蛋等。種蛋一般以50～65 g之間為宜，蛋的形狀為橢圓型，蛋形指數(shù)在0.7～0.8之間（橫徑，縱徑）。如果種蛋大小不一，可按種雞蛋大小分批入孵，確保一致性。

要選擇蛋殼清潔、沒有糞便或臟物污染的SPF種蛋。如果蛋殼臟污，容易被細菌污染，引起腐敗，同時還會堵塞蛋殼的氣孔，影響氣體交換，使胚胎得不到應(yīng)有的O₂，排不出CO₂，繼而造成死胚增加，孵化率降低。

5 孵化技術(shù)要點

5.1 孵化前的消毒準備

孵化前要對孵化室、孵化設(shè)備和附屬設(shè)備要進行徹底的清洗、消毒和熏蒸。孵化前要檢查孵化室是否嚴密、有無破損、調(diào)試孵化器;檢查溫度、濕度等顯示是否正常，并進行溫度校準;檢查備用電機發(fā)電是否能正常發(fā)電等，以及最后采樣檢測微生物指標是否達到萬級凈化標準。只有當環(huán)境達到凈化指標時，方可上孵。

5.2 合適的孵化溫度和濕度

溫度和濕度是SPF雞胚孵化最重要的條件，只有在適宜的溫度和濕度下，才能保證胚胎的正常物質(zhì)代謝和生長發(fā)育，獲得健康的雞胚。

5.2.1 溫度 種蛋從庫運出后，一般情況下，種蛋的表面溫度較低，可在入孵前12 h裝盤并移室（20～25 ℃最佳），12～24 h后開機上孵。孵化時種蛋要大頭向上擺放，因雞胚絕大多數(shù)都在靠近氣室的一端，氣室大多在雞蛋的大頭，這樣有利于提高孵化率。在孵化過程中要做到看胚施溫。一般情況下，變溫孵化效果最好，即1～5 d溫度為38.2～38.3 ℃，6～12 d為38.0～37.9 ℃，13～18 d為37.4～37.8 ℃，19～21 d為37.0～37.3 ℃。如果雞胚孵化的溫度過高或偏低，均會縮短或延長孵化期，使雞胚的死亡率增加。在孵化過程中，應(yīng)注意監(jiān)測孵化期內(nèi)部的溫差，包括孵化器內(nèi)的上、下、左、右等，其溫差不能太大，應(yīng)經(jīng)常檢查并校準溫度，必要時可進行位置互換。

5.2.2 濕度 若想孵化成功，控制好濕度是關(guān)鍵。孵化期濕度控制原則是兩頭高、中間低。孵化前期（1～7 d）孵化器內(nèi)濕度為60%～70%，孵化中期（8～18 d）孵化器內(nèi)濕度50%～55%，孵化后期（19～21 d），小雞即將出殼，為防止雛雞絨毛與蛋殼粘連，應(yīng)給予較高的相對濕度，一般可提高到70%～75%。孵化室、出雛室的相對濕度保持在65%～70%之間。當濕度過低時，胚胎生長發(fā)育加快，蛋內(nèi)水分蒸發(fā)過快，氣室增大，不利于CO₂的排出和O₂的吸收;同時，啄殼部下降，雛雞干癟瘦小，絨毛干燥、發(fā)焦，有時粘殼;采取的針對性措施：可以在孵化器內(nèi)增加水盤，增加濕度。當濕度過高時，蛋內(nèi)的水分不能正常蒸發(fā)，延長雛雞出殼時間，雛雞弱，腹部大、絨毛粘連，嚴重影響雞胚的孵化率和出雛率;采取的針對性措施：加強通風使水氣散發(fā)。

疫苗生產(chǎn)廠家孵化SPF雞胚時，前面與上相同，但接種疫苗病毒后，一般應(yīng)固定在37℃，濕度控制在50%～60%，不允許翻蛋。通常以尿囊液或雞胚收獲量最大為基本原則。

5.3 通風

胚胎在發(fā)育過程中，需要不斷地吸收O₂和排出CO₂，為保持SPF雞胚胎的正常氣體代謝，必須供給充足的新鮮的O₂。通風的目的是提供O₂，排出CO2，使孵化室內(nèi)溫度均勻，促進胚胎散熱，防止雞胚的自溫超溫。因此，通風換氣十分重要。一般情況下，孵化機內(nèi)CO₂必須要控制在0.5%以內(nèi)。判斷通風是否合理，可觀察加熱指示燈，當恒溫與加熱頻繁交替時，說明通風正常。

5.4 翻蛋

孵化過程中翻蛋可使胚胎受熱均勻，有利于胚胎發(fā)育，避免胚胎和殼膜粘連在一起而造成雞胚死亡，有利于提高孵化率。一般每2 h翻蛋一次，翻蛋的角度以水平位置前俯后仰45 °為宜。孵化18 d后移入出雛器即可以停止翻蛋，以利于雛雞啄殼出雛。

5.5 晾蛋

晾蛋的目的在于驅(qū)散孵化機內(nèi)的余熱，讓雞胚胎得到更多的新鮮空氣，促進胚胎發(fā)育。尤其是孵化后期胚胎代謝加強，為防止胚體產(chǎn)熱超溫，傳統(tǒng)的孵化通常需要適當涼蛋。鑒于目前的孵化器功能比較完善，設(shè)計更加合理，該環(huán)節(jié)可以忽略。

5.6 照蛋

照蛋的目的在于觀察胚胎發(fā)育是否正常。如發(fā)現(xiàn)不正常，可及時調(diào)整孵化條件，以便獲得良好的孵化效果。整個孵化周期，一般照蛋3次，第一次在5～6 d進行，剔出無精蛋、死精蛋;第二次在11 d進行，挑選出中途死胚，以免孵化時變質(zhì)炸裂;第三次在移盤時進行，一邊落盤一邊驗蛋，剔出后期死胚。在每次照蛋的同時，檢查雞胚發(fā)育情況，并及時做好“因胎施溫”。

6 其他

6.1 孵化室溫度

孵化室的溫度控制在22～26 ℃之間效果最佳。當孵化室溫度太低時，會影響孵化器內(nèi)的溫度;當孵化室溫度太高時，會不利于孵化器內(nèi)胚胎的散熱，對雞胚后期的發(fā)育不利。

6.2 環(huán)境衛(wèi)生

加強環(huán)境衛(wèi)生管理，是提高雞胚孵化率的關(guān)鍵之一。每天應(yīng)對孵化室的地面進行清掃，對墻壁進行擦拭和消毒。落盤后對孵化室地面、蛋盤、蛋車等應(yīng)進行徹底清刷，再用消毒藥噴灑消毒。

6.3 人員管理

孵化室工作人員最好進行隔離和封閉管理，進入孵化室應(yīng)按要求進行洗澡、換鞋和更衣，進入孵化室需穿經(jīng)高壓滅菌的超凈連體工作服，佩戴口罩，手套，接觸種蛋、雞雛前用消毒液進行洗手消毒，嚴禁外來人員進入。

7 小結(jié)

SPF蛋的孵化受到諸多因素的影響，特別是與孵化期間的溫度、濕度、翻蛋和通風等孵化器密切相關(guān)。只有加強SPF雞日常飼養(yǎng)管理并且掌握每一步關(guān)鍵技術(shù)，才能提高SPF蛋的孵化率。