潘婷婷 李林峰 呂玉卓 劉光偉

1.商洛學院生物醫(yī)藥與食品工程學院，陜西商洛 726000；2.商洛市旭初農(nóng)林開發(fā)有限公司，陜西商洛 726000

牡丹餅粕是壓榨法制備牡丹籽油的過程中產(chǎn)生的副產(chǎn)物[1-2]，牡丹餅粕中粗蛋白、粗脂肪含量較高，含有機體必需的礦物質(zhì)元素及氨基酸，可以作為非常規(guī)飼料替代部分蛋白飼料飼喂畜禽[3-5]。單寧是自然界植物中廣泛存在的酚類次生代謝產(chǎn)物，可與唾液蛋白、糖蛋白等物質(zhì)相互作用產(chǎn)生苦澀味，還可對畜禽消化道多個位點的消化酶產(chǎn)生抑制作用，進而降低畜禽的采食量[6-7]。目前，單寧的去除方法主要有物理方法、化學方法及微生物降解法[8]。本研究應(yīng)用物理、化學等方法對牡丹餅粕進行改良，對牡丹餅粕中產(chǎn)生苦澀味、影響適口性的多酚成分（尤其是單寧）進行去除，降低單寧含量、降低毒性，改善其適口性，以期為牡丹餅粕開發(fā)成為保健型飼料提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 儀 器

UV-1780 紫外-可見分光光度計購自濟南歐萊博科學儀器有限公司，KH5200E 超聲波清洗器購自昆山禾創(chuàng)超聲儀器有限公司，HHS 型電熱恒溫水浴鍋購自上海博訊實業(yè)有限公司。

1.2 試 劑

牡丹餅粕，牡丹籽初榨后的副產(chǎn)物，商洛市旭初農(nóng)林開發(fā)有限公司提供；Folin 酚，沒食子酸對照品（≥98%，149-91-7），購自合肥博美生物公司；鎢酸鈉、磷鉬酸、85%磷酸、碳酸鈉均為分析純，購自福晨天津化學試劑有限公司。

1.3 試驗方法

1）牡丹餅粕中單寧的粗提取。取粉碎后的牡丹餅粕粉末1 g，精密稱定，置入150 mL錐形瓶中，以料液比為1∶24加入無水乙醇，超聲提取15～20 min，過濾得乙醇粗提液。

2）常溫水浸處理。取牡丹餅粕粉末1 g，加入適量水室溫浸泡24 h，隨即真空抽濾，取得濾餅備用。

3）熱處理。取牡丹餅粕粉末1 g，在100 ℃水中熱浸30 min，真空抽濾，取得濾餅備用。

4）堿液處理。①NaOH 溶液處理。取牡丹餅粕粉末1 g 于燒杯中，用0.2%NaOH 溶液浸泡，溶液溫度30 ℃為宜，浸泡時間24 h，隨即真空抽濾，取得濾餅備用。②Na2CO3溶液處理。用0.53%Na2CO3溶液浸泡，同溫即可，浸泡24 h。

5）氧化劑處理。取牡丹餅粕粉末1 g 于燒杯中，用0.79%高錳酸鉀溶液浸泡，常溫下浸泡3 h，隨即真空抽濾，取得濾餅備用。

6）藥物轉(zhuǎn)化。取牡丹餅粕粉末1 g 于燒杯中，用0.3%福爾馬林浸泡，常溫下浸泡3 h，抽濾，取得濾餅備用。

7）沒食子酸標準品的制備以及標準曲線建立。精密稱取沒食子酸標準品0.011 0 g，用蒸餾水溶解并定容至100 mL，配制質(zhì)量濃度為0.11 mg/mL 的標準液。準確吸取0、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6 mL置于25 mL容量瓶中，加蒸餾水6.0 mL，分別加入Folin酚試劑0.5 mL混勻，在0.5～8 min內(nèi)加入1.5 mL 20%碳酸鈉溶液，充分混合后定容，30 ℃避光放置30 min；以不加標準液的6.0 mL 蒸餾水為空白對照，760 nm 下測定吸光值，每個樣品平行測定3次，取平均值。以沒食子酸在反應(yīng)體系中的質(zhì)量濃度C為橫坐標，吸光度值A(chǔ) 為縱坐標，繪制標準曲線如下：Y=0.386 3X–0.046 1，R2=0.999，結(jié)果表明，線性關(guān)系良好。

8）供試品溶液的制備。按1.3 中2）～5）處理牡丹餅粕后，如1.3 中1）進行超聲提取，得乙醇粗提液。按本文“1.3”中6）所述進行供試品溶液中單寧含量測定，每組設(shè)置3個平行。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同的物理化學方法處理后牡丹餅粕中單寧含量

表1顯示的是經(jīng)不同的物理化學方法處理后牡丹餅粕中單寧含量。由表1可知，未處理牡丹餅粕中單寧含量為0.145 8 mg/g；常溫水浸處理組牡丹餅粕中單寧含量為0.054 6 mg/g；熱處理組牡丹餅粕中單寧含量為0.036 4 mg/g；0.2%NaOH 堿液處理組牡丹餅粕中單寧含量為0.040 7 mg/g；0.53% Na2CO3堿液處理組牡丹餅粕中單寧含量為0.084 4 mg/g；高錳酸鉀氧化處理組牡丹餅粕中單寧含量為0.090 8 mg/g；福爾馬林處理組牡丹餅粕中單寧含量為0.109 9 mg/g。

表1 經(jīng)不同的物理化學方法處理后牡丹餅粕中單寧含量

2.2 不同的物理化學方法對牡丹餅粕中單寧的降解效能

以對照組樣品的單寧含量為參考，對各試驗組單寧的去除效果進行評價，結(jié)果如圖1所示。由圖1可知，試驗組2、3 單寧去除率相差不大，即熱處理和氫氧化鈉溶液處理后的樣品單寧去除率均在70%以上；試驗組4、5單寧去除率相差不大，碳酸鈉和高錳酸鉀處理的樣品單寧去除率為35%～45%。試驗組1常溫水處理的樣品單寧去除率介于兩者之間，而試驗組6 藥物轉(zhuǎn)化處理的樣品單寧去除率最低，僅有24.62%。

圖1 樣品處理效能

3 討 論

本研究采用了6 種處理方法，其中熱處理和氫氧化鈉溶液處理后的樣品單寧去除率均在70%以上；碳酸鈉和高錳酸鉀處理的樣品單寧去除率均在35%～45%；常溫水處理單寧去除率介于兩者之間；而藥物轉(zhuǎn)化單寧去除率最低，僅有24.62%。

物理處理中常溫水浸和熱處理降解效果均較好，考慮到過高的處理溫度所產(chǎn)生的能耗過高及營養(yǎng)成分的破壞，更傾向于常溫水處理；受所配試劑濃度、處理溫度及時間的影響，結(jié)果可能有所偏差，但能看出化學試劑處理的幾個方法均能對牡丹餅粕中的單寧起到一定的降解作用，其中氫氧化鈉處理能力最強。綜合以上，在實際應(yīng)用過程中，可選用常溫水進行預(yù)處理，期間可多更換幾次水，再用堿液處理，最終在保證去除力度的前提下，營養(yǎng)物質(zhì)得到保留，同時縮短了處理時限。