劉慧 劉靜 劉聰 黨晶藝 王海燕

摘要 目的：探討丹七片對缺血性心臟病大鼠模型能量代謝的調(diào)節(jié)作用。方法：通過結(jié)扎左前降支冠狀動脈建立缺血性心臟大鼠模型，將48只大鼠分為假手術(shù)組、模型組、丹七片組和曲美他嗪組，每組12只。丹七片組大鼠以500.0 mg/kg的劑量灌胃丹七片溶液，曲美他嗪組大鼠以6.0 mg/kg的劑量灌胃曲美他嗪溶液，其他組大鼠灌胃生理鹽水。治療1個月后評價各組大鼠的心臟功能、心肌組織和細胞病理改變、心肌ATP水平及AMPK/SIRT1/PGC-1α信號通路及其下游分子表達水平。結(jié)果：超聲心動圖顯示，與模型組比較，丹七片組大鼠的LVIDs和LVIDd分別減少了26.35%和20.73%，而EF和FS分別增加了31.61%和42.82%，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。HE染色結(jié)果顯示，丹七片組的心肌細胞排列較為整齊，細胞水腫減輕，細胞間隙減小，炎性細胞減少。與模型組比較，丹七片組大鼠的心肌ATP水平顯著增加（P<0.05）。免疫組織化學(xué)染色結(jié)果顯示，與模型組比較，丹七片組大鼠PGC-1α的陽性染色評分顯著升高（P<0.05）。Western Blotting結(jié)果顯示，與模型組比較，丹七片組大鼠的AMPK、SIRT1、PGC-1α、MFN1、MFN2和SOD2蛋白表達均顯著升高（P<0.05）。結(jié)論：丹七片可以在缺血性心臟病大鼠模型中發(fā)揮心臟保護功能，并上調(diào)ATP的產(chǎn)生。丹七片可激活A(yù)MPK/SIRT1/PGC-1α信號通路及其下游分子，改善能量代謝并還調(diào)節(jié)線粒體的生物合成，從而改善大鼠心臟功能并防止心肌損傷。

關(guān)鍵詞 丹七片;缺血性心臟病;能量代謝;線粒體;心肌損傷;三磷酸腺苷;AMPK/SIRT1/PGC-1α信號通路

Regulatory Effect of Danqi Tablet on Energy Metabolism in a Rat Model of Ischemic Heart Disease

LIU Hui，LIU Jing，LIU Cong，DANG Jingyi，WANG Haiyan

（Department of Cardiology，the Second Affiliated Hospital，Air Force Medical University

of People′s Liberation Army of China，Xi′an 710032，China）

Abstract Objective：To investigate the regulation of energy metabolism with Danqi Tablet in a rat model of ischemic heart disease.Methods：A rat model of ischemic heart was established by ligation of the left anterior descending coronary artery.A total of 48 rats were divided into a sham an operation group，a Danqi tablet group and trimetazidine group，with 12 rats in each group.Rats in the Danqi Tablets were given a solution of Danqi Tablets at a dose of 500.0 mg/kg.Rats in the trimetazidine group were given a solution of trimetazidine at a dose of 6.0 mg/kg.The other groups were given normal saline.After 1 month of treatment，cardiac function，myocardial tissue cytopathological changes，myocardial ATP levels，and AMPK/SIRT1/PGC-1α signaling pathway and downstream molecular expression were evaluated.Results：Echocardiography showed that compared with the model group，LVIDs and LVIDd in the Danqi tablet group were reduced by 26.35% and 20.73%，while EF and FS increased by 31.61% and 42.82%，and the difference was significant（P<0.05）.The results of HE staining showed that the cardiomyocytes in the Danqi tablet group were arranged neatly，the cell edema was reduced，the cell gap was reduced，and the inflammatory cells were decreased.Compared with the model group，the myocardial ATP level of the Danqi tablet group increased significantly（P<0.05）.Immunohistochemical staining showed that the PGC-1α positive staining score of rats in the Danqipian group was significantly higher than that of the model group（P<0.05）.Western Blotting showed that the expression levels of AMPK，SIRT1，PGC-1α，MFN1，MFN2 and SOD2 were significantly increased in the Danqi Tablets group compared with the model group（P<0.05）.Conclusion：Danqi Tablet can play a cardioprotective function in the rat model of ischemic heart disease and up-regulate ATP production.Danqi Tablets activate the AMPK/SIRT1/PGC-1α signaling pathway and its downstream molecules，improve energy metabolism and also regulate mitochondrial biogenesis，thereby improving rat cardiac function and preventing myocardial damage.

Keywords Danqi tablets; Ischemic heart disease; Energy metabolism; Mitochondrial; Myocardial damage; ATP; AMPK/SIRT1/PGC-1α signaling pathway

中圖分類號：R289.5;R542文獻標(biāo)識碼：Adoi：10.3969/j.issn.1673-7202.2021.15.019

心血管疾病是世界范圍內(nèi)引起人類死亡的主要疾病類型，而急性缺血誘發(fā)的心肌梗死又是心血管疾病患者死亡的主要原因之一[1-3]。心肌細胞的收縮需要三磷酸腺苷（ATP）持續(xù)提供能量。在缺血條件下，由于氧氣和營養(yǎng)供應(yīng)不足，心肌能量代謝會受到干擾[4-5]。因此，能量代謝的調(diào)節(jié)是提高心肌梗死治療效果的關(guān)鍵途徑。

心肌細胞所需的大部分能量是通過氧化磷酸化在線粒體內(nèi)產(chǎn)生的。線粒體的動態(tài)平衡和能量代謝受到多種因子調(diào)節(jié)。幾個轉(zhuǎn)錄因子在代謝相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄中起關(guān)鍵作用。過氧化物酶體增殖物激活受體-γ輔激活因子-1α（Peroxlsome Proliferator-activated Receptor Gamma Coactivator-1α，PGC-1α）是控制能量代謝的主要轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子[6]。PGC-1α調(diào)節(jié)多種過程，包括線粒體的生物合成、呼吸作用、糖異生作用和氧化磷酸化等[7]。然而，目前對PGC-1α活性的調(diào)節(jié)機制尚待完全了解。最近的研究表明，AMP激活的蛋白激酶（AMP-activated Protein Kinase，AMPK）和Sirtuin 1（SIRT1）在代謝調(diào)節(jié)中起主要作用，并影響PGC-1α轉(zhuǎn)錄調(diào)控能量代謝[8-9]。AMPK是主要的代謝能量傳感器之一，能量不足時，AMP/ATP比值增加，AMPK被激活并增強與葡萄糖轉(zhuǎn)運、糖酵解和線粒體呼吸有關(guān)的基因表達[10]。AMPK還可以通過增加細胞中NAD+水平來增強NAD+依賴性脫乙?；窼IRT1的活性[11]。此外，AMPK的激活會導(dǎo)致PGC-1α的表達增加。SIRT1是哺乳動物的沉默調(diào)節(jié)蛋白之一，其參與調(diào)節(jié)能量代謝、細胞增殖和成活[12]。SIRT1的激活可能增加線粒體功能和能量生成[13]。此外，據(jù)報道，SIRT1通過與PGC-1α相互作用以增加PGC-1α的表達水平和線粒體生物合成[14]。有研究報道，AMPK/SIRT1/PGC-1α通路在缺血條件下會發(fā)生異常，因此該通路可能會成為治療心血管疾病的藥理靶標(biāo)[15]。

丹七片是一種著名的中成藥，主要由中藥丹參和三七組成，已廣泛用于心血管疾病治療[16]。目前，丹七片已被2010年《中華人民共和國藥典》收錄。研究表明，丹七片可以調(diào)節(jié)缺血性心臟病動物模型中脂肪酸和葡萄糖的代謝[17]。但是，丹七片對能量代謝上游轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子的影響仍然未知。本研究通過結(jié)扎左前降支（LAD）冠狀動脈建立了缺血性心臟大鼠模型，并探討了丹七片對AMPK/SIRT1/PGC-1α途徑的作用機制，并探討了丹七片對參與了線粒體的生物合成和抗氧化過程的PGC-1α的下游靶標(biāo)的影響，旨在進一步揭示丹七片治療心血管疾病的藥理機制。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 動物 選取無特定病原體（SPF）級的60只雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠由第四軍醫(yī)大學(xué)唐都醫(yī)院功能性腦疾病研究所提供，大鼠體質(zhì)量為212～228 g，平均體質(zhì)量為（218.32±9.90）g，將大鼠飼養(yǎng)在23～25 ℃、55%相對濕度、12 h光照黑暗循環(huán)照明的實驗室內(nèi)，給予大鼠實驗室自制蒸餾水和標(biāo)準(zhǔn)大鼠飼料（南通特洛菲飼料科技有限公司）。本研究經(jīng)過醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會審核通過（倫理審批號：201901180039）。

1.1.2 藥物 丹七片（福州閩海藥業(yè)有限公司，國藥準(zhǔn)字Z35020175），曲美他嗪（施維雅（天津）制藥有限公司，國藥準(zhǔn)字H20055465）。

1.1.3 試劑與儀器 蘇木精-伊紅（HE）染色試劑盒（上海碧云天生物技術(shù)有限公司，貨號：C0105S），PGC-1α一抗（免疫組織化學(xué)）（Abcam公司，英國，貨號：ab118603），生物素化的二抗（北京博奧森生物技術(shù)有限公司，貨號：SP-0024），ATP分析試劑盒（南京建成生物科技有限公司，貨號：A095-1-1），RIPA裂解緩沖液（Sigma公司，美國，貨號：R0278），蛋白質(zhì)定量試劑盒（南京建成生物科技有限公司，貨號：A045-1），PGC-1α一抗（Abcam公司，英國，貨號：ab176328），mitofusin 1一抗（MFN1）（Abcam公司，英國，貨號：ab221661），mitofusin 2一抗（MFN2）（Abcam公司，英國，貨號：ab124773），SIRT1一抗（Abcam公司，英國，貨號：ab76039），AMPK一抗（Abcam公司，英國，貨號：ab133448），超氧化物歧化酶2（SOD2）一抗（Abcam公司，英國，貨號：ab137037）3-磷酸甘油醛脫氫酶（GAPDH）一抗（Abcam公司，英國，貨號：ab8245），辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的二抗（北京博奧森生物技術(shù)有限公司，貨號：bse-0361P），增強型ECL化學(xué)發(fā)光底物試劑盒（上海炎熙生物科技有限公司，貨號：Mqt-wen-20），微小超聲心動圖儀（Visualsonics公司，加拿大，型號：Vevo2100型）。

1.2 方法

1.2.1 分組與模型制備 結(jié)扎手術(shù)完成24 h后，在成活的大鼠中選擇48只進行后續(xù)實驗，將大鼠根據(jù)隨機數(shù)表隨機分為4組，分別為假手術(shù)組、模型組、丹七片組和曲美他嗪組，每組12只。缺血性心臟病大鼠模型的建立參考文獻[18]的方法通過結(jié)扎左前降支（LAD）冠狀動脈建立缺血性心臟大鼠模型。大鼠按照標(biāo)準(zhǔn)飼養(yǎng)條件進行1周適應(yīng)性飼養(yǎng)后，對大鼠注射50 mg/kg劑量的1%戊巴比妥進行麻醉。通過口腔氣管插管并連接到呼吸機，然而結(jié)扎LAD冠狀動脈。假手術(shù)組的大鼠進行相同的操作步驟但不結(jié)扎LAD。

1.2.2 給藥方法 丹七片組的大鼠以劑量500.0 mg/kg的丹七片溶液灌胃。曲美他嗪組的大鼠以劑量6.0 mg/kg的曲美他嗪溶液灌胃。通過參照人體和動物體表面積的當(dāng)量劑量比計算劑量，大鼠的當(dāng)量劑量是人的6倍左右。假手術(shù)組和模型組的大鼠灌胃相同體積的生理鹽水。灌胃1個月后，所有大鼠禁食24 h后進行超聲心動圖檢查，然后處死大鼠，對梗死邊界區(qū)域的心臟組織進行灌注并取出，-80 ℃保存。

1.2.3 超聲心動圖檢查 通過Vevo2100型微小超聲心動圖儀評估大鼠的心臟功能。超聲心動圖的主要指標(biāo)包括：收縮末期左心室內(nèi)徑（LVIDs）、舒張末期左心室內(nèi)徑（LVIDd）、射血分數(shù)（EF）和縮短分數(shù)（FS），通過3個心動周期記錄平均值。

1.2.4 蘇木精-伊紅（HE）染色 收集大鼠的心肌組織并用預(yù)冷的磷酸鹽緩沖液（PBS）洗滌，然后將心臟組織在4%多聚甲醛中固定72 h，將心肌組織用切片機切成4 μm切片并用HE染色。實驗步驟嚴格按照HE染色試劑盒說明進行，然后在顯微鏡下觀察病理切片。

1.2.5 免疫組織化學(xué)染色 使用細胞和組織染色試劑盒進行免疫組織化學(xué)染色。將切片在二甲苯中脫蠟，然后用梯度乙醇洗脫。室溫下用0.3% H2O2溶液封閉內(nèi)源性過氧化物酶15 min，然后將切片與PGC-1α（1∶1 000稀釋）一抗在4 ℃孵育過夜，然后在室溫下用正常山羊血清中封閉30 min。將切片用磷酸鹽緩沖液（PBS）洗滌后與生物素化的二抗在室溫孵育1 h，然后用二氨基聯(lián)苯胺（DAB）和蘇木精染色。在光學(xué)顯微鏡下觀察染色情況，陽性區(qū)域被染成棕黃色。PGC-1α陽性染色評分為陽性細胞計數(shù)評分×染色強度評分。陽性細胞計數(shù)評分：陽性細胞數(shù)為<10%、10%～25%、25%～75%和>75%分別為0、1、2和3分。染色強度評分：未染色、淡黃色、棕黃色、深棕色依次為0、1、2和3分。

1.2.6 ATP檢測 將新鮮心肌組織用500 μL熱蒸餾水勻漿并提取1 min。根據(jù)ATP分析試劑盒檢測ATP水平。通過參考相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中的水平，單位為μmol/g prot。

1.2.7 Western Blotting分析 將心肌組織在含有蛋白酶抑制劑混合物的RIPA裂解緩沖液中裂解。使用蛋白質(zhì)定量試劑盒檢測蛋白質(zhì)水平。通過煮沸15 min使蛋白質(zhì)變性，然后按照每孔50 μg蛋白（10 μL）的水平將樣品用10%十二烷基硫酸鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS-PAGE）分離，并轉(zhuǎn)移至聚偏二氟乙烯膜。5%脫脂牛奶封閉1 h后，將膜與不同的一抗在4 ℃孵育過夜，其中包括PGC-1α（1∶1 000）、mitofusin 1（MFN1，1∶1 000）、mitofusin 2（MFN2，1∶1 000）、SIRT1（1∶1 000）、AMPK（1∶1 000）、超氧化物歧化酶2（SOD2，1∶1 000）和3-磷酸甘油醛脫氫酶（GAPDH，1∶5 000）。洗滌后將膜與辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的二抗孵育1 h。室溫下用增強型ECL化學(xué)發(fā)光底物試劑盒進行顯影，然后通過Image-Lab軟件測量條帶強度，GAPDH作為內(nèi)部對照。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 18.0統(tǒng)計軟件進行分析，計量資料以均值±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，使用單因素方差分析和LSD檢驗進行組間差異比較，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 丹七片對缺血性心臟病大鼠LVIDs、LVIDd、EF和FS的影響 與假手術(shù)組比較，模型組大鼠的LVIDs和LVIDd分別增加了159.32%和69.17%，EF和FS分別降低了48.58%和61.78%，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。與模型組比較，丹七片組大鼠的LVIDs和LVIDd分別減少了26.35%和20.73%，而EF和FS分別增加了31.61%和42.82%，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。與模型組比較，曲美他嗪組的LVIDs和LVIDd明顯降低，且EF和FS也明顯升高（P<0.05）。見表1。

2.2 丹七片保護缺血性心臟病模型大鼠的心肌細胞結(jié)構(gòu) HE染色結(jié)果顯示，假手術(shù)組大鼠心肌細胞排列整齊，未出現(xiàn)病理改變，而模型組大鼠心肌細胞出現(xiàn)水腫，且間隙明顯增大，炎性細胞浸潤明顯。丹七片組和曲美他嗪組大鼠心肌細胞排列較為整齊，細胞水腫減輕，細胞間隙減小，炎性細胞減少。見圖1。

2.3 丹七片改善缺血性心臟病模型大鼠的心肌ATP的產(chǎn)生 與假手術(shù)組比較，模型組大鼠心肌ATP水平明顯降低了57.89%（P<0.05）;與模型組比較，丹七片組大鼠心肌ATP水平顯著增加了108.57%（P<0.05），曲美他嗪組大鼠心肌ATP水平顯著提高了59.29%（P<0.05）。見圖2。

2.4 丹七片調(diào)節(jié)缺血性心臟病模型大鼠心肌AMPK/SIRT1/PGC-1α信號通路 與假手術(shù)組比較，模型組大鼠PGC-1α的陽性染色評分顯著降低了58.24%（P<0.05）;與模型組比較，丹七片組大鼠PGC-1α的陽性染色評分顯著上升了76.32%（P<0.05）。Western Blotting顯示，與假手術(shù)組比較，模型組大鼠心肌組織中的AMPK、SIRT1和PGC-1α蛋白表達水平均顯著降低（P<0.05）;與模型組比較，丹七片組大鼠的AMPK、SIRT1和PGC-1α蛋白表達水平均顯著升高（P<0.05）;曲美他嗪組大鼠上述蛋白的表達水平也顯著上調(diào)（P<0.05）。見圖3、圖4。

2.5 丹七片調(diào)節(jié)PGC-1α的下游靶標(biāo) 與假手術(shù)組比較，模型組大鼠心肌組織中的PGC-1α的下游靶標(biāo)MFN1、MFN2和SOD2的蛋白表達水平均顯著降低（P<0.05）;與模型組比較，丹七片組大鼠的MFN1、MFN2和SOD2蛋白表達水平均顯著升高（P<0.05）;曲美他嗪組大鼠上述蛋白的表達水平也顯著上調(diào)（P<0.05）。見圖5。

3 討論

ATP生成速率對于心肌細胞的收縮功能至關(guān)重要。PGC-1α是轉(zhuǎn)錄共激活因子，在調(diào)節(jié)參與心肌能量代謝的基因表達中起關(guān)鍵作用。在缺血性心臟病中，心肌細胞的能量代謝能力受到不同程度的損害。目前，多種傳統(tǒng)中藥制劑已經(jīng)被廣泛應(yīng)用于心血管疾病的治療中，并且取得了較好的效果。丹七片是一種由中藥丹參和三七組成的著名中成藥，研究表明，丹七片可以調(diào)節(jié)缺血性心臟病動物模型中脂肪酸和葡萄糖的代謝，從而發(fā)揮心臟保護作用[16-18]。本研究探討了丹七片在缺血性心臟病大鼠模型能量代謝中的作用，并考察了丹七片對AMPK/SIRT1/PGC-1α信號通路相關(guān)組分的影響。

本研究通過結(jié)扎大鼠LAD冠狀動脈建立了缺血性心臟病模型，超聲心動圖檢查發(fā)現(xiàn)大鼠在經(jīng)過1個月的丹七片和陽性對照曲美他嗪治療后，LVIDs、LVIDd、EF和FS均明顯改善。HE染色結(jié)果也顯示，丹七片明顯抑制了大鼠結(jié)扎LAD冠狀動脈引起的心肌組織和細胞病理改變。上述結(jié)果說明丹七片對缺血性心臟病具有保護作用，可改善心臟功能并防止心肌損傷。丹七片具有活血化瘀、理氣止痛等功效，并且可以改善血脂代謝，糾正脂質(zhì)代謝紊亂，在佐治冠心病方面療效顯著[20]。郭淑貞等[21]研究發(fā)現(xiàn)，丹七片可有效減小小型豬心肌缺血模型的缺血范圍并改善心室重構(gòu)。目前，丹參和三七在治療缺血性心臟病方面的效果已經(jīng)得到臨床證實，而本研究結(jié)果也發(fā)現(xiàn)該2種中藥制成的丹七片在改善缺血性心臟病模型方面療效顯著，與曲美他嗪的效果相當(dāng)。曲美他嗪是一種用于治療心絞痛的成熟的代謝藥物，曲美他嗪通過阻斷長鏈3-酮?；?CoA硫解酶來提高葡萄糖利用率并抑制脂肪酸代謝[22]。

研究表明丹七片可以調(diào)節(jié)冠心病的能量代謝，而能量代謝缺陷則會促進心力衰竭等心血管疾病的發(fā)展[18]。本研究發(fā)現(xiàn)丹七片處理可提高大鼠心肌ATP水平。PGC-1α在能量代謝的轉(zhuǎn)錄調(diào)控中起著非常重要的作用。PGC-1α可誘導(dǎo)4條呼吸鏈、ATPase復(fù)合物以及三羧酸循環(huán)中所有8種酶的70%以上的亞基[23]。在本研究中，丹七片處理顯著上調(diào)了PGC-1α。這表明丹七片可能通過PGC-1α在主要代謝過程中誘導(dǎo)編碼關(guān)鍵酶的基因表達。

PGC-1α的活性和表達可以通過能量傳感器（包括AMPK和SIRT1）進行調(diào)節(jié)。本研究發(fā)現(xiàn)丹七片可以上調(diào)AMPK的表達，從而上調(diào)PGC-1α。Sirtuins是在衰老和長壽中起關(guān)鍵作用的蛋白質(zhì)家族[24]。SIRT1是NAD+依賴性脫乙?；?，可調(diào)節(jié)包括代謝在內(nèi)的多種細胞過程[25]。在本研究中，丹七片可上調(diào)SIRT1的表達水平。本研究推測丹七片可通過作用于AMPK、SIRT1和PGC-1α這3種調(diào)節(jié)劑來增加心肌細胞中ATP的產(chǎn)生。

PGC-1α不僅調(diào)節(jié)基因表達，而且還調(diào)節(jié)線粒體的生物合成[6]。維持心肌細胞的穩(wěn)定性需要線粒體裂變與融合之間的動態(tài)平衡。線粒體平衡是維持心臟代謝需求并保護心肌細胞免受凋亡刺激所必需的。線粒體穩(wěn)態(tài)的破壞可直接導(dǎo)致疾病的發(fā)生[26]。線粒體融合素（包括MFN1和MFN2）在線粒體的生物合成中起重要作用，并且MGC1和MFN2的表達受到PGC-1α的調(diào)節(jié)[27]。本研究發(fā)現(xiàn)模型組心肌組織中MFN1和MFN2的表達下調(diào)，而丹七片的處理可上調(diào)其表達，表明丹七片可以通過PGC-1α調(diào)節(jié)線粒體的生物合成。PGC-1α的另一個下游靶標(biāo)是SOD2，SOD2是清除線粒體中活性氧（ROS）的關(guān)鍵抗氧化酶之一[28]。線粒體是ROS形成的主要位點，ROS的積累可破壞細胞大分子結(jié)構(gòu)和細胞膜，對細胞功能危害非常大。本研究發(fā)現(xiàn)丹七片可以上調(diào)SOD2的表達，從而減輕缺血引起的氧化應(yīng)激損傷。

總之，本研究表明丹七片可以在缺血性心臟病模型中發(fā)揮心臟保護功能，并上調(diào)ATP的產(chǎn)生。丹七片可激活A(yù)MPK/SIRT1/PGC-1α信號通路及其下游分子，改善能量代謝并還調(diào)節(jié)線粒體的生物合成，從而改善心臟功能并防止心肌損傷。

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（2020-11-05收稿 責(zé)任編輯：楊覺雄）

基金項目：陜西省重點研發(fā)計劃項目（2018YBXM-SF-12-1）;唐都醫(yī)院創(chuàng)新發(fā)展基金資助項目（2018QYTS011）

作者簡介：劉慧（1978.09—），女，碩士，副主任醫(yī)師，研究方向：冠心病和高血壓，E-mail：JNHuLin@163.com

通信作者：王海燕（1975.05—），女，博士，副主任醫(yī)師，研究方向：冠心病和心律失常，E-mail：whyzhh@fmmu.edu.cn