楊 敏，孫鵬艷，金曉媚，陳會超，戴 潔，董莉娟，曾志君，楊朝軍，楊 莉，陳 敏

（云南省疾病預防控制中心性病艾滋病防制所，云南 昆明 650022）

HIV抗體檢測是艾滋病實驗室的核心檢測技術(shù)，在艾滋病的篩查和確證中起著關(guān)鍵的作用。為加強云南省艾滋病確證實驗室的質(zhì)量管理，確保檢測質(zhì)量，根據(jù)《全國艾滋病檢測工作管理辦法》[1]，云南省疾控中心艾滋病確證中心實驗室每年組織全省艾滋病確證實驗室進行艾滋病血清學檢測質(zhì)量考核，分析查找云南省艾滋病確證實驗室在血清學檢測方面存在的問題。筆者對云南省艾滋病確證實驗室（2015—2020）年血清學檢測考核成績進行分析，現(xiàn)將結(jié)果報告如下。

1 對象和方法

1.1 組織實施 云南省疾病預防控制中心艾滋病確證中心實驗室組織全省除出入境檢驗檢疫系統(tǒng)以外的所有艾滋病確證實驗室進行HIV血清學檢測考核。使用商品化的考核盲樣，每套考核盲樣包含5份樣品，考核項目包括HIV抗體快速試驗、酶聯(lián)免疫/化學發(fā)光試驗、免疫印跡試驗（WB試驗）以及條帶判讀。根據(jù)考核通知，要求在指定時間內(nèi)完成檢測并回報結(jié)果。

1.2 結(jié)果分析 艾滋病確證中心實驗室匯總各實驗室反饋的結(jié)果進行統(tǒng)計分析。根據(jù)所有參加考核的實驗室的檢測結(jié)果確定預期值（采取所有實驗室80%的一致性）[2]，每個考核項目滿分100分，每個樣品20分。WB試驗及條帶判讀結(jié)論錯誤扣20分，結(jié)論正確，條帶判讀錯誤一個（p17，p24，p31，gp41，p51，p55，p66，gp120，gp160，HIV2/gp36）扣2分。以應參加考核實驗室數(shù)、實際參加實驗室數(shù)、滿分實驗室數(shù)、參加率、最低分、平均分和滿分實驗室比例以及條帶判讀符合率對（2015—2020）年云南省艾滋病確證實驗室所參加的6次考核成績進行分析。

2 結(jié)果

2.1 實驗室分布 （2015—2020）年，云南省分別有41家、64家、72家、96家、114家 和118家 艾 滋病確證實驗室參加考核。包括省級、州（市）級和縣（區(qū)）級實驗室，覆蓋疾控中心、醫(yī)療機構(gòu)、婦幼計生、監(jiān)管場所和采供血機構(gòu)。詳見表1。

表1 2015—2020年云南省艾滋病確證實驗室分布情況

2.2 實驗室考核結(jié)果

2.2.1 HIV抗體快速試驗 各實驗室均參加HIV抗體快速試驗考核，6次考核參加率均為100%，滿分率均為100%。

2.2.2 HIV抗體酶聯(lián)免疫/化學發(fā)光試驗 各實驗室均參加HIV抗體酶聯(lián)免疫/化學發(fā)光試驗考核，6次考核參加率均為100%，滿分率均為100%。

2.2.3 免疫印跡試驗和條帶判讀 免疫印跡試驗和條帶判讀的參加率為100%。全省確證實驗室6次WB試驗和條帶判讀考核的平均分在（98.9～99.6）分，分別為99.6分、99.6分、99.3分、99.5分、99.0分、98.9分。2016年1家實驗室出現(xiàn)1個樣品結(jié)論錯誤，2019年1家實驗室有2個樣品結(jié)果填報錯誤，其余扣分均是因為部分特異性條帶判讀錯誤，未出現(xiàn)結(jié)論性差錯。2016年考核中滿分實驗室比例最高，達96.9%，2020年滿分實驗室比例最低，為71.2%。（2015—2020）年云南省艾滋病確證實驗室WB試驗及條帶判讀考核成績詳見表2。

表2 2015—2020年云南省艾滋病確證實驗室HIV確證試驗及條帶判讀考核情況

對條帶判讀結(jié)果的分析發(fā)現(xiàn)，p17、p51、p55條帶判讀的符合率低于98.0%，（2015—2020）年云南省艾滋病確證實驗室條帶判讀符合率詳見表3。

表3 2015—2020年云南省艾滋病確證實驗室條帶判讀符合率

3 討論

到2016年底，云南省已成為艾滋病確證實驗室最多的省份。近5年來，艾滋病檢測實驗室網(wǎng)絡(luò)建設(shè)進展較快[3]，到2020年底，云南省已建成各類艾滋病檢測實驗室共6 781個，其中艾滋病確證實驗室123個，并且覆蓋了各級疾控中心、醫(yī)療機構(gòu)、婦幼計生、采供血、監(jiān)管場所、出入境檢驗檢疫等系統(tǒng)，形成了一個較為完善的艾滋病檢測實驗室網(wǎng)絡(luò)。如此龐大的實驗室規(guī)模在適應云南省日益增長的艾滋病防制任務的同時，也給艾滋病檢測實驗室的質(zhì)量管理帶來了嚴峻的挑戰(zhàn)。檢測工作質(zhì)量直接影響實驗結(jié)果的準確性，每年的室間質(zhì)評作為評價檢測結(jié)果質(zhì)量的重要手段之一[4]，可以及時發(fā)現(xiàn)問題，及時改進，保證各實驗室間的結(jié)果具有可比性。通過室間質(zhì)評，將考評結(jié)果及時反饋給各參評實驗室，各參評實驗室通過結(jié)果對比可以衡量自身的水平，以達到不斷完善、共同進步的目的[5]。因此，為加強云南省艾滋病檢測實驗室的管理，根據(jù)《全國艾滋病檢測工作管理辦法》[1]和《云南省艾滋病檢測工作規(guī)范（試行）》[6]的要求，云南省艾滋病確證中心實驗室每年對轄區(qū)內(nèi)的所有艾滋病檢測實驗室進行質(zhì)量考核，發(fā)現(xiàn)并及時反饋實驗室檢測工作過程中存在的問題，加強云南省艾滋病檢測網(wǎng)絡(luò)實驗室的管理。

（2015—2020）年，云南省參加血清學考評的艾滋病確證實驗室從41家增長到118家，包括了疾控、醫(yī)療機構(gòu)、監(jiān)管場所、婦幼計生、采供血機構(gòu)的實驗室。縣（市、區(qū)）級艾滋病確證實驗室所占比例由2015年的51.22%（21/41）增長到2020年的73.73%（87/118）。艾滋病確證實驗室主要設(shè)立在各級疾控中心，到2020年抗病毒治療定點醫(yī)療機構(gòu)的確證實驗室增長的17家。目前大部分的感染者是在醫(yī)療機構(gòu)發(fā)現(xiàn)的，為實現(xiàn)從發(fā)現(xiàn)到治療的“一站式”服務，對醫(yī)療機構(gòu)的確證檢測能力也提出了新的要求。（2015—2020）年組織的6次考核中，云南省艾滋病確證實驗室的HIV抗體快速試驗、HIV抗體、確證試驗和條帶判讀的參加率均為100%，HIV抗體快速試驗、HIV酶聯(lián)免疫/化學發(fā)光的滿分率為100%，WB試驗和條帶判讀的滿分率在71.2%～96.9%，反映了各確證檢測實驗室較好地保持了檢測能力。

從表2和表3可以看出，云南省部分艾滋病確證實驗室的條帶判讀能力還有待提高，從2015年到2020年，WB試驗和條帶判讀的平均分在98.9～99.6，波動不大，但是從滿分率來看，2017年、2019年、2020年滿分率低于80%。對條帶判讀的考核結(jié)果分析發(fā)現(xiàn)，p17、p51、p55條帶的錯判率較高，符合率低于98%，可能原因是p17條帶前后非特異性條帶較多，且條帶的分子量小，電泳的位置不固定，而p55條帶與p51條帶距離較近，條帶顏色較淺，肉眼判讀不易區(qū)分，這與陳會超[2]、郭志宏等[7]的分析結(jié)果一致。除了對特異性條帶的特征和位置掌握不全面之外，結(jié)果填報時不認真也是造成結(jié)果錯判的原因，例如2019年有的實驗室WB試驗考核僅得60分，2019年、2020年還出現(xiàn)了HIV-2條帶的錯判，相關(guān)實驗室自查之后發(fā)現(xiàn)，這些差錯均是由于填報結(jié)果時粗心大意導致的。

從（2015—2020）年云南省艾滋病確證實驗室確證試驗及條帶判讀考核情況還可以看出，與前幾年相比，2019年和2020年的考評結(jié)果滿分率和平均分都有一定程度的降低，原因可能是自2018年云南省開展HIV快速檢測替代策略以來，隨著替代策略在云南省的推廣應用，WB檢測的頻率減少，因此檢測人員對WB試驗和條帶判讀的熟練程度降低。而且云南省確證實驗室建設(shè)速度快，（2015—2020）年，確證實驗室的數(shù)量大約翻了3倍，且縣級占比較大，現(xiàn)場指導的覆蓋面下降。因此，在今后的工作中，一方面要定期組織人員進行條帶判讀的復訓，提高判讀水平，另一方面要加強實驗室人員的管理，充分發(fā)揮州（市）艾滋病中心實驗室的作用，加強對縣級確證實驗室的技術(shù)指導。