姜 銳

（德州市食品藥品檢驗(yàn)檢測(cè)中心，山東 德州 253015）

中醫(yī)藥是中華民族傳統(tǒng)文化中的一塊璀璨瑰寶。中藥學(xué)中對(duì)多種藥材之間是否能夠混合使用有著明確的規(guī)定，部分藥材放在一起使用會(huì)產(chǎn)生很強(qiáng)的毒副作用，進(jìn)而使患者產(chǎn)生不良反應(yīng)，甚至?xí)?dǎo)致其死亡[1]。中藥十八反是中藥配伍禁忌理論的重要內(nèi)容之一,是中藥藥性理論的重要組成部分,也是歷代醫(yī)家爭(zhēng)論的焦點(diǎn)之一[2]。藜蘆是中醫(yī)臨床上常用的藥材之一，具有排除體內(nèi)毒素、清除體內(nèi)虛熱、解除毒性等功效。在中藥十八反理論中有“諸參辛芍叛藜蘆”之說(shuō)，但目前臨床上對(duì)藜蘆的配伍禁忌缺乏相關(guān)的藥理學(xué)試驗(yàn)數(shù)據(jù)。本文主要是分析藜蘆與人參、太子參、細(xì)辛、白芍配伍時(shí)的毒副作用。

1 材料與方法

1.1 研究材料

1）試驗(yàn)動(dòng)物：55只小白鼠（由宜昌明德農(nóng)業(yè)開(kāi)發(fā)有限公司提供），清潔級(jí)，雌雄不限，體重約為18～22 g，均為健康小鼠。2）試驗(yàn)藥品：藜蘆（由武漢柔博醫(yī)藥化工有限公司提供），人參和太子參（由陽(yáng)春市信德星洲制藥有限公司提供），細(xì)辛（由亳州市承輝藥業(yè)銷售有限公司提供），白芍（由亳州市春源堂藥材站提供），甘草（由保定仙德中藥銷售有限公司提供），甘遂（由河北福君堂藥業(yè)有限公司提供）。3）試驗(yàn)儀器：電子天平（型號(hào)為5AX324ZH型，由奧豪斯儀器常州有限公司提供），八兩裝高速中藥粉粹機(jī)（型號(hào)為L(zhǎng)G-08A型，由浙江溫州瑞安市百信藥機(jī)械廠提供），電熱恒溫水浴鍋（型號(hào)為WB-2000型，由鄭州長(zhǎng)城工貿(mào)有限公司提供），電磁爐（型號(hào)為C21-SC007型，由東莞市捷客迅實(shí)業(yè)有限公司提供），低速離心機(jī)（型號(hào)為L(zhǎng)D4-2，由北京醫(yī)用離心機(jī)廠提供），循環(huán)水式多用真空泵（型號(hào)為SHB-B95A，由上海豫康科教儀器設(shè)備有限公司提供）。

1.2 研究方法

1.2.1 制備試驗(yàn)藥材

1.2.1.1 藜蘆提取液的制備 1）用電子天平稱取110 g的干燥藜蘆，將其用LG-08A型粉粹機(jī)粉碎，使用10目篩網(wǎng)對(duì)粉碎好的藜蘆粉末進(jìn)行篩選。2）用電子天平精密稱定100 g篩選好的藜蘆粉末，將其放在燒杯內(nèi)，加入500 mL的蒸餾水浸泡1 h。3）將浸泡好的藜蘆藥液放在電磁爐上進(jìn)行加熱，持續(xù)煎煮1 h（保持微沸狀態(tài)）。4）用紗布對(duì)煮好的藜蘆藥液進(jìn)行過(guò)濾，然后將濾液放在1個(gè)新的燒杯內(nèi)備用。5）將殘留的濾渣放入燒杯內(nèi)，添入500 mL的水，然后再次將其放在電磁爐上進(jìn)行煎煮，持續(xù)煎煮1 h（保持微沸狀態(tài)）。用紗布濾出濾渣后，保留濾液備用。6）將兩次煎煮出的濾液合并，然后對(duì)其進(jìn)行離心處理，去掉上清液，將剩下的濾液濃縮至100 mL（需保證每毫升的濾液中含有1 g生藥）。將濾液放在小燒杯內(nèi)貼上標(biāo)簽備用。

1.2.1.2 單味藥材提取液的制備 分別稱取100 g的人參、太子參、細(xì)辛、白芍，然后按照1.2.1.1的方法制備上述藥材的提取液。

1.2.1.3 配伍藥材提取液的制備 稱取4份50 g的藜蘆，將其分別與等量的人參、太子參、細(xì)辛、白芍進(jìn)行配伍，再按照1.2.1.1的方法制備提取液。

1.2.1.4 陽(yáng)性對(duì)照溶液的制備 稱取50 g的甘草和50 g的甘遂，按照1.2.1.1的方法制備陽(yáng)性對(duì)照溶液。

1.2.2 藥理試驗(yàn)

1.2.2.1 試驗(yàn)分組 按照給藥的不同將這55只小白鼠分為空白對(duì)照組（n=5）、陽(yáng)性對(duì)照組（n=5）、藜蘆組（n=5）、人參組（n=5）、太子參組（n=5）、細(xì)辛組（n=5）、白芍組（n=5）、藜蘆與人參配伍組（n=5）、藜蘆與太子參配伍組（n=5）、藜蘆與細(xì)辛配伍組（n=5）和藜蘆與白芍配伍組（n=5）。

1.2.2.2 試驗(yàn)方法 1）將11組小鼠逐個(gè)用電子天平進(jìn)行稱重，并記錄結(jié)果。2）使用苦味酸液在小鼠的頭部、四肢、背部、尾部等處進(jìn)行標(biāo)記。3）對(duì)空白對(duì)照組小鼠使用生理鹽水進(jìn)行灌胃，對(duì)陽(yáng)性對(duì)照組小鼠使用甘草與甘遂提取液進(jìn)行灌胃，對(duì)藜蘆組小鼠使用藜蘆提取液進(jìn)行灌胃，對(duì)人參組小鼠使用人參提取液進(jìn)行灌胃，對(duì)太子參組小鼠使用太子參提取液進(jìn)行灌胃，對(duì)細(xì)辛組小鼠使用細(xì)辛提取物進(jìn)行灌胃，對(duì)白芍組小鼠使用白芍提取液進(jìn)行灌胃，對(duì)藜蘆與人參配伍組小鼠使用藜蘆與人參提取液進(jìn)行灌胃，對(duì)藜蘆與太子參配伍組小鼠使用藜蘆與太子參提取液進(jìn)行灌胃，對(duì)藜蘆與細(xì)辛配伍組小鼠使用藜蘆與細(xì)辛提取液進(jìn)行灌胃，對(duì)藜蘆與白芍配伍組小鼠使用藜蘆與白芍提取液進(jìn)行灌胃，給藥劑量均為0.15 mL/10 g，每天給藥1次，連續(xù)給藥7天。4）在每次給藥后15 min、30 min、60 min，觀看小鼠的生理變化，并準(zhǔn)確記錄其出現(xiàn)不良反應(yīng)的時(shí)間。5）連續(xù)給藥1周后，將小鼠處死。對(duì)小鼠的尸體進(jìn)行解剖，觀察其內(nèi)臟是否有充血或出血的現(xiàn)象。

1.3 觀察指標(biāo)

觀察11組小鼠藥理試驗(yàn)的結(jié)果。小鼠消化系統(tǒng)和神經(jīng)系統(tǒng)生理反應(yīng)的判斷依據(jù)見(jiàn)表1。

表1 小鼠消化系統(tǒng)和神經(jīng)系統(tǒng)生理反應(yīng)判斷依據(jù)表

2 結(jié)果

2.1 使用單味藥對(duì)小鼠進(jìn)行藥理試驗(yàn)的結(jié)果

2.1.1 使用單味藥后小鼠消化系統(tǒng)反應(yīng)的比較 空白對(duì)照組小鼠均未發(fā)生嘔吐、腹瀉、便血、厭食等消化系統(tǒng)生理反應(yīng)。陽(yáng)性對(duì)照組小鼠嘔吐、腹瀉、便血反應(yīng)的發(fā)生率均為100%，其厭食反應(yīng)的發(fā)生率為80%。藜蘆組小鼠嘔吐、腹瀉、厭食反應(yīng)的發(fā)生率均為20%，其未發(fā)生便血反應(yīng)。人參組小鼠嘔吐、腹瀉、厭食反應(yīng)的發(fā)生率均為20%，其未發(fā)生便血反應(yīng)。太子參組小鼠嘔吐、腹瀉、厭食反應(yīng)的發(fā)生率均為20%，其未發(fā)生便血反應(yīng)。細(xì)辛組小鼠腹瀉、厭食反應(yīng)的發(fā)生率均為20%，其未發(fā)生嘔吐、便血反應(yīng)。白芍組小鼠嘔吐、腹瀉、便血、厭食反應(yīng)的發(fā)生率均為20%。空白對(duì)照組小鼠與藜蘆組小鼠、人參組小鼠、太子參組小鼠、細(xì)辛組小鼠、白芍組小鼠嘔吐、腹瀉、便血和厭食反應(yīng)的發(fā)生率相比，P＞0.05；與陽(yáng)性對(duì)照組小鼠相比，藜蘆組小鼠、人參組小鼠、太子參組小鼠、細(xì)辛組小鼠和白芍組小鼠嘔吐、腹瀉、便血和厭食反應(yīng)的發(fā)生率均更低，P＜0.05。這說(shuō)明，單獨(dú)使用藜蘆、人參、太子參、細(xì)辛、白芍對(duì)小鼠嘔吐、腹瀉、便血、厭食等生理反應(yīng)的影響較小，對(duì)其消化系統(tǒng)無(wú)明顯影響，毒副作用較小。詳見(jiàn)表2。

2.1.2 使用單味藥后小鼠神經(jīng)系統(tǒng)反應(yīng)的比較 空白對(duì)照組小鼠均未發(fā)生嗜睡、昏迷、翻正反射消失、躁動(dòng)、器官充血或充血反應(yīng)。陽(yáng)性對(duì)照組小鼠昏迷、翻正反射消失、躁動(dòng)反應(yīng)的發(fā)生率均為100%，其器官充血或充血反應(yīng)的發(fā)生率為80%，其嗜睡反應(yīng)的發(fā)生率為60%。藜蘆組小鼠嗜睡、昏迷、翻正反射消失、器官充血或充血反應(yīng)的發(fā)生率均為20%，其未發(fā)生躁動(dòng)反應(yīng)。人參組小鼠躁動(dòng)反應(yīng)的發(fā)生率為20%，其未發(fā)生嗜睡、昏迷、翻正反射消失、器官充血或出血反應(yīng)。太子參組小鼠昏迷反應(yīng)的發(fā)生率為20%，其未發(fā)生嗜睡、翻正反射消失、躁動(dòng)、器官充血或出血反應(yīng)。細(xì)辛組小鼠翻正反射消失、嗜睡反應(yīng)的發(fā)生率均為20%，其未發(fā)生昏迷、躁動(dòng)、器官充血或出血反應(yīng)。白芍組小鼠嗜睡反應(yīng)的發(fā)生率為40%，其昏迷反應(yīng)的發(fā)生率為20%，其未發(fā)生翻正反射消失、躁動(dòng)、器官充血或出血反應(yīng)?？瞻讓?duì)照組小鼠與藜蘆組小鼠、人參組小鼠、太子參組小鼠、細(xì)辛組小鼠和白芍組小鼠嗜睡、昏迷、翻正反射消失、躁動(dòng)和器官充血或出血反應(yīng)的發(fā)生率相比，P＞0.05；與陽(yáng)性對(duì)照組小鼠相比，藜蘆組小鼠、人參組小鼠、太子參組小鼠、細(xì)辛組小鼠、白芍組小鼠嗜睡、昏迷、翻正反射消失、躁動(dòng)和器官充血或出血反應(yīng)的發(fā)生率均更低，P＜0.05。這說(shuō)明，單獨(dú)使用藜蘆、人參、太子參、細(xì)辛、白芍對(duì)小鼠嗜睡、昏迷、翻正反射消失、躁動(dòng)、器官充血或出血等生理反應(yīng)的影響較小，對(duì)其神經(jīng)系統(tǒng)無(wú)明顯影響，毒副作用較小。詳見(jiàn)表3。

表3 使用單味藥后小鼠神經(jīng)系統(tǒng)反應(yīng)的比較[只(%)]

2.2 使用配伍藥對(duì)小鼠進(jìn)行藥理試驗(yàn)的結(jié)果

2.2.1 使用配伍藥后小鼠消化系統(tǒng)反應(yīng)的比較 空白對(duì)照組小鼠均未發(fā)生嘔吐、腹瀉、便血、厭食反應(yīng)。陽(yáng)性對(duì)照組小鼠嘔吐、腹瀉、便血反應(yīng)的發(fā)生率均為100%，其未發(fā)生厭食反應(yīng)。藜蘆組小鼠嘔吐、腹瀉、厭食反應(yīng)的發(fā)生率均為20%，其未發(fā)生便血反應(yīng)。藜蘆與人參配伍組小鼠嘔吐、腹瀉反應(yīng)的發(fā)生率均為100%，其便血反應(yīng)的發(fā)生率為80%，其厭食反應(yīng)的發(fā)生率為60%。藜蘆與太子參配伍組小鼠嘔吐反應(yīng)的發(fā)生率為100%，其腹瀉反應(yīng)的發(fā)生率為80%，其便血、厭食反應(yīng)的發(fā)生率均為60%。藜蘆與細(xì)辛配伍組小鼠腹瀉反應(yīng)的發(fā)生率為100%，其嘔吐反應(yīng)的發(fā)生率為80%，其厭食反應(yīng)的發(fā)生率為60%，其便血反應(yīng)的發(fā)生率為40%。藜蘆與白芍配伍組小鼠腹瀉反應(yīng)的發(fā)生率為80%，其嘔吐、厭食反應(yīng)的發(fā)生率均為60%，其便血反應(yīng)的發(fā)生率為40%。陽(yáng)性對(duì)照組小鼠與藜蘆與人參配伍組小鼠、藜蘆與太子參配伍組小鼠、藜蘆與細(xì)辛配伍組小鼠、藜蘆與白芍配伍組小鼠嘔吐、腹瀉、便血、厭食反應(yīng)的發(fā)生率相比，P＞0.05；與空白對(duì)照組小鼠和藜蘆組小鼠相比，藜蘆與人參配伍組小鼠、藜蘆與太子參配伍組小鼠、藜蘆與細(xì)辛配伍組小鼠、藜蘆與白芍配伍組小鼠嘔吐、腹瀉、便血、厭食反應(yīng)的發(fā)生率均更高，P＜0.05。這說(shuō)明，將藜蘆與人參、太子參、細(xì)辛、白芍配伍使用會(huì)對(duì)小鼠嘔吐、腹瀉、便血、厭食等生理反應(yīng)產(chǎn)生一定的影響，可損傷其消化系統(tǒng)功能，具有一定的毒副作用。詳見(jiàn)表4。

表4 使用配伍藥后小鼠消化系統(tǒng)反應(yīng)的比較[只(%)]

2.2.2 使用配伍藥后小鼠神經(jīng)系統(tǒng)反應(yīng)的比較 空白對(duì)照組小鼠均未發(fā)生嗜睡、昏迷、翻正反射消失、躁動(dòng)、器官充血或出血反應(yīng)。陽(yáng)性對(duì)照組小鼠昏迷、翻正反射消失、躁動(dòng)反應(yīng)的發(fā)生率均為100%，其器官充血或出血反應(yīng)的發(fā)生率為80%，其嗜睡反應(yīng)的發(fā)生率為60%。藜蘆組小鼠嗜睡、昏迷、翻正反射消失、器官充血或充血反應(yīng)的發(fā)生率均為20%，其未發(fā)生躁動(dòng)反應(yīng)。藜蘆與人參配伍組小鼠昏迷、翻正反射消失反應(yīng)的發(fā)生率均為80%，其嗜睡反應(yīng)的發(fā)生率為60%，其躁動(dòng)反應(yīng)的發(fā)生率為40%，其器官充血或出血反應(yīng)的發(fā)生率為20%。藜蘆與太子參配伍組小鼠嗜睡反應(yīng)的發(fā)生率為100%，其翻正反射消失反應(yīng)的發(fā)生率為80%，其器官充血或出血反應(yīng)的發(fā)生率為60%，其昏迷反應(yīng)的發(fā)生率為40%，其躁動(dòng)反應(yīng)的發(fā)生率為20%。藜蘆與細(xì)辛配伍組小鼠嗜睡反應(yīng)的發(fā)生率為80%，其昏迷反應(yīng)的發(fā)生率為60%，其翻正反射消失、躁動(dòng)反應(yīng)的發(fā)生率均為40%，其器官充血或出血反應(yīng)的發(fā)生率為20%。藜蘆與白芍配伍組小鼠嗜睡反應(yīng)的發(fā)生率為80%，其昏迷反應(yīng)的發(fā)生率為60%，其翻正反射消失、躁動(dòng)、器官充血或出血反應(yīng)的發(fā)生率均為40%。陽(yáng)性對(duì)照組小鼠與藜蘆與人參配伍組小鼠、藜蘆與太子參配伍組小鼠、藜蘆與細(xì)辛配伍組小鼠、藜蘆與白芍配伍組小鼠嗜睡、昏迷、翻正反射消失、躁動(dòng)、器官充血或出血反應(yīng)的發(fā)生率相比，P＞0.05；與空白對(duì)照組小鼠和藜蘆組小鼠相比，藜蘆與人參配伍組小鼠、藜蘆與太子參配伍組小鼠、藜蘆與細(xì)辛配伍組小鼠、藜蘆與白芍配伍組小鼠嗜睡、昏迷、翻正反射消失、躁動(dòng)、器官充血或出血反應(yīng)的發(fā)生率均更高，P＜0.05。這說(shuō)明，將藜蘆與人參、太子參、細(xì)辛、白芍配伍使用會(huì)對(duì)小鼠嗜睡、昏迷、翻正反射消失、躁動(dòng)、器官充血或出血等生理反應(yīng)產(chǎn)生影響，損傷其神經(jīng)系統(tǒng)功能，具有一定的毒副作用。詳見(jiàn)表5。

表5 使用配伍藥后小鼠神經(jīng)系統(tǒng)反應(yīng)的比較[只(%)]

3 討論

中藥十八反是中藥配伍禁忌理論的重要內(nèi)容之一,是中藥藥性理論的重要組成部分,也是歷代醫(yī)家爭(zhēng)論的焦點(diǎn)之一。藥典中強(qiáng)調(diào)藥效相反的兩味藥材不能放在一起使用，但并沒(méi)有真正的試驗(yàn)結(jié)果證實(shí)相關(guān)理論[3]。章晶晶等[4]的研究表明，配伍試驗(yàn)研究是確定混在一起的兩味中藥材是否會(huì)對(duì)人體產(chǎn)生不好的影響及是否會(huì)發(fā)生毒副作用或不良反應(yīng)的有效手段。十八反理論的相關(guān)藥物主要是烏頭、藜蘆和甘草三味中藥，其中的烏頭和藜蘆均屬于生物有害性很強(qiáng)的藥物，甘草雖沒(méi)有生物有害性但將其與甘遂、芫花和大戟等藥物配伍均會(huì)產(chǎn)生生物有害性[5-6]。藜蘆中含有甾體生物堿類，具有降低血壓、防止血塊凝結(jié)形成血栓、增強(qiáng)心功能、興奮心肌、改善腦部血液流通及預(yù)防各種感染等作用。但是，藜蘆不僅對(duì)機(jī)體的呼吸系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)等系統(tǒng)具有較大的生物有害性，其中含有的多種生物活性物質(zhì)還會(huì)對(duì)機(jī)體鼻腔、腸道等處的黏膜造成很大的損傷。中草藥基礎(chǔ)理論認(rèn)為，人參具有大補(bǔ)元?dú)獾墓π?，但將其與藜蘆合用，不僅會(huì)使其維持機(jī)體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定及增強(qiáng)機(jī)體對(duì)物理性、化學(xué)性、生物性等有害刺激抵抗能力作用的喪失，還可增加藜蘆的生物有害性；將藜蘆與玄參、苦參合用，會(huì)使機(jī)體的血壓水平下降；細(xì)辛、白芍均具有麻痹神經(jīng)的作用，將藜蘆與這兩味藥合用，可降低細(xì)辛、白芍的療效[7-8]。有研究指出，藜蘆會(huì)對(duì)呼吸器官、消化器官等產(chǎn)生毒副作用，進(jìn)而使患者發(fā)生不良反應(yīng)[9]。大量的研究資料顯示，十八反理論中的諸參應(yīng)為人參、南沙參、丹參、玄參和苦參五種[10]。相關(guān)的研究指出，臨床上在應(yīng)用十八反理論時(shí)需清楚其原理和作用機(jī)制[11-12]。對(duì)中藥十八反理論進(jìn)行研究不僅要注重本草學(xué)的考證，還要運(yùn)用現(xiàn)代科技手段進(jìn)行藥理試驗(yàn)研究，以便做到去偽存真[13-14]。本次研究將中藥十八反理論中的“諸參辛芍叛藜蘆”作為依據(jù)，用藜蘆、人參、太子參、細(xì)辛、白芍、甘草、甘遂七種藥材為主要研究材料，經(jīng)粉碎、提取后獲得單味藥和配伍藥物的水煎液，使用上述藥液對(duì)小鼠進(jìn)行灌胃，然后觀察其消化系統(tǒng)和神經(jīng)系統(tǒng)的生理反應(yīng)。結(jié)果顯示，將藜蘆與人參、太子參、細(xì)辛、白芍配伍使用會(huì)對(duì)小鼠消化系統(tǒng)和神經(jīng)系統(tǒng)的功能產(chǎn)生一定的損害，具有較大的毒副作用，可使其發(fā)生多種不良反應(yīng)。本次試驗(yàn)對(duì)中藥十八反理論中的“諸參辛芍叛藜蘆”進(jìn)行了初步的藥理試驗(yàn)驗(yàn)證，豐富了相關(guān)的藥理學(xué)數(shù)據(jù)，希冀此研究結(jié)果能夠?yàn)槭朔磁湮榻蓛?nèi)涵的科學(xué)詮釋提供一份參考。