馬聰

【摘要】目的：探討羊水細胞熒光原位雜交技術(shù)與核型檢測結(jié)果的分析。方法：選取2019年6月至2020年6月，運用熒光原位雜交技術(shù)檢測的120例19-29周孕婦的未培養(yǎng)羊水細胞，并對其進行核型檢測結(jié)果分析。結(jié)果：120例未培養(yǎng)羊水細胞運用熒光原位雜交技術(shù)檢測成功119例，其中檢出正常106例，數(shù)目異常13例，與常規(guī)細胞培養(yǎng)核型分析結(jié)果一樣。此外3例正常變異，1例嵌合體，還有1例21三體沒有被該項技術(shù)檢測出來。結(jié)論：運用熒光原位雜交技術(shù)檢測未培養(yǎng)羊水細胞染色體數(shù)目異常，不僅操作簡單快讀，而且所運用的樣本數(shù)量也較少，其能有效補充羊水細胞染色體核型分析。因此熒光原位雜交技術(shù)聯(lián)合羊水細胞培養(yǎng)，能夠好地服務于產(chǎn)前診斷。

【關(guān)鍵詞】羊水細胞;熒光原位雜交技術(shù);核型檢測;結(jié)果

【中圖分類號】R714.15 【文獻標識碼】A 【DOI】10.12332/j.issn.2095-6525.2021.03.251

出生缺陷對人類的健康造成了非常嚴重的威脅，同時也為社會及患者的家庭到來了極大的經(jīng)濟負擔。因為遺傳原因致使出生缺陷占七成左右，而最為常見的遺傳因素就是染色體畸形[1]。因為染色體疾病沒有辦法治療，因此產(chǎn)前診斷染色體疾病，對于防止出生缺陷至關(guān)重要。經(jīng)過產(chǎn)前的有效篩查和診斷，降低該類新生兒出生的概率，能有效為社會及患兒家庭減輕一定的負擔[2]?；诖耍驹捍舜窝芯糠治隽搜蛩毎麩晒庠浑s交技術(shù)與核型檢測結(jié)果，詳細報告如下。

1 資料與方法

1.1臨床資料

本研究以2019年6月至2020年6月的120例人員將其作為研究對象?；颊咦钚∧挲g為19歲，最大年齡為39歲，平均年齡為（28.89±9.12）歲。孕周為19-29周。對所有患者同時做羊水細胞培養(yǎng)及熒光原位雜交技術(shù)。產(chǎn)前診斷指征包括：（1）孕中期母血清篩查高風險50例;（2）孕婦年齡高于35歲的患者25例;（3）不良孕產(chǎn)史6例;（4）超聲產(chǎn)前篩查4例，其中有1例胎兒脖頸后透明帶變厚;（5）孕婦外周血無創(chuàng)胎兒DNA檢測存在高風險的患兒2例;（6）其他原因?qū)е?0例。患者全部已簽署了產(chǎn)前診斷知情同意書。

1.2方法

1.2.1常規(guī)羊水細胞培養(yǎng)，在B超的指引下，將淡黃色的清亮羊水抽取25毫升，將其分為兩份，運用熒光原位雜交技術(shù)檢測的患者使用5毫升，運用常規(guī)細胞染色體核型分析的患者使用20毫升，在培養(yǎng)8-10天以后添加秋水仙素，在5小時以后收獲，并制片，G顯帶以后，對其進行染色體核型分析，計數(shù)為30個細胞，對5個核型進行分析。

1.2.2熒光原位雜交技術(shù)檢測未培養(yǎng)羊水細胞染色體非整倍體，運用國產(chǎn)的該技術(shù)探針。未培養(yǎng)羊水細胞對照公司提供的操作步驟處理之后進行熒光原位雜交技術(shù)分析。對每組探針進行有效觀察，隨機技術(shù)不能少于50個細胞。整倍體樣本熒光原位雜交技術(shù)檢測結(jié)果應有大于90%的間期核計數(shù)為整倍體;不是整倍體樣本熒光原位雜交技術(shù)檢測必須不能少于60%的間期合計數(shù);如果計數(shù)結(jié)果接近10%，不能將嵌合體情況排除，所以必須添加計數(shù)到200個細胞核。

2 結(jié)果

2.1熒光原位雜交技術(shù)的檢測結(jié)果

120例羊水細胞成功股119例，有1例因為細胞太少沒有辦法進行判讀。

2.2對比羊水培養(yǎng)染色體核型分析及熒光原位雜交技術(shù)結(jié)果

羊水培養(yǎng)一次成功119例，成功率高達99.17%。1例經(jīng)唐氏篩查21三體高風險標本，因孕期大于23周，導致羊水培養(yǎng)失敗，之后進行了無創(chuàng)產(chǎn)前基因檢測，結(jié)果呈低風險狀態(tài)，熒光原位雜交技術(shù)檢測結(jié)果正常。

培養(yǎng)成功的檢測出正常核型為101例，21三體9例，18三體2例，47，XXX1例，47XXY1例，45，X1例。還有1例21三體運用熒光原位雜交技術(shù)沒有檢測出來，但羊水培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)其核型為46，XN，rob（21;21）（q10;q10）。有1例染色體嵌合體核型，并不在熒光原位雜交技術(shù)的檢測范圍里，經(jīng)B超檢查之后最終停止妊娠。

3 討論

綜上所述，當前已經(jīng)有很多技術(shù)在產(chǎn)前診斷中被運用，但是都有一定的局限性，并且價格昂貴，同時也沒有辦法確定多少基因拷貝數(shù)的變異能致使胎兒異常。但自從熒光原位雜交技術(shù)檢測出未培養(yǎng)羊水間期細胞染色體數(shù)目異常開始，該技術(shù)已經(jīng)逐漸成為產(chǎn)前診斷的主要方法[3]。其主要運用熒光標記探針對21三體、18三體、13三體及性染色體非整倍體等常見染色體畸形進行快速檢測。其不僅技術(shù)診斷快速，而且具有較高的成功率，是傳統(tǒng)核型分析非常重要的一個補充。

在以往羊水細胞培養(yǎng)的模型分析中，最少要有20毫升羊水才能有效進行雙培養(yǎng)體系[4]。此外，羊水細胞培養(yǎng)核型分析能不能成功與細胞培養(yǎng)過程中，克隆細胞、收獲細胞及分裂細胞等多少有非常直接的聯(lián)系，并且操作步驟較多，非常有可能導致失敗，而且等報告的時間也相對較長，一般要3周左右。而熒光原位雜交技術(shù)檢測，相對常規(guī)檢測而言，不僅需要的羊水樣本量少[5]，而且不需要對羊水細胞進行培養(yǎng)，雜交信號簡單直觀，計數(shù)相對也比較容易，報告也能快速出來。一般48小時以內(nèi)就能出報告，操作步驟簡單，極易辨別結(jié)果。

但是熒光原位雜交技術(shù)在染色體數(shù)目及性染色異常的診斷過程中，可取代部分，但不能完全取代以往的染色體核型分析。伴隨著產(chǎn)前篩查及診斷的不斷發(fā)展，提供了更多的檢測技術(shù)。而熒光原位雜交技術(shù)已然成為非常重要的產(chǎn)前診斷方式之一，可與多種檢測手段相結(jié)合，進而有效提升產(chǎn)前診斷的準確率及效率，并更高效地滿足臨床需要。

參考文獻：

[1]周靜，周冉，王玉國，等.不同檢測方法在羊水細胞性染色體嵌合產(chǎn)前診斷中的應用比較[J].現(xiàn)代婦產(chǎn)科進展，2021，30（2）：92-95.

[2]郭芬芬，楊紅，徐盈，等.324例性染色體非整倍體產(chǎn)前診斷分析及遺傳咨詢[J].現(xiàn)代婦產(chǎn)科進展，2021，30（2）：137-140.

[3]李顯箏，許玲，胡晶晶，等.熒光原位雜交技術(shù)在產(chǎn)前診斷染色體嵌合體中的應用價值[J].國際生殖健康/計劃生育雜志，2020，39（2）：104-108.

[4]侯東霞，侯麗青，董弘，等.聯(lián)合應用染色體核型分析、微陣列分析和熒光原位雜交技術(shù)診斷Pallister-Killian綜合征胎兒一例[J].中華醫(yī)學遺傳學雜志，2020，37（11）：1276-1279.

[5]李一平，任華.細菌人工染色體微球技術(shù)對微缺失/微重復綜合征的產(chǎn)前診斷[J].海南醫(yī)學，2020，31（2）：221-223.