余汪平 郭冬梅 孔慶龍 朱卓 李樺軍 游燕

摘 要：目的：考察三七蜜片對大鼠輔助降血脂及體內(nèi)抗氧化功效的作用。方法：參照保健食品輔助降血脂及抗氧化功能評價方法，選用健康大鼠進行混合型高脂血癥以及乙醇致大鼠氧化損傷模型構(gòu)建，給藥30 d后分別對血清 TC、TG、LDL-C、HDL-C以及肝臟GSH、MDA、蛋白質(zhì)羰基和 SOD活力進行檢測。根據(jù)保健食品評價技術(shù)規(guī)范進行最終結(jié)果判定。結(jié)果：三七蜜片樣品對混合型高血脂大鼠的血脂具有一定的降低作用;對于血脂升高相對較低的大鼠高膽固醇血癥模型，三七蜜片樣品對該模型大鼠血清中的TC、LDL-C具有顯著的降低作用，對TG無明顯降低作用;三七蜜片低、中、高劑量均能明顯提升模型大鼠肝臟GSH含量，中、高劑量均能明顯降低模型大鼠肝臟 MDA含量，低、中、高劑量均無明顯降低模型大鼠肝臟蛋白質(zhì)羰基含量，提升 SOD 活力的作用。結(jié)論：在本實驗劑量條件下三七蜜片具有一定輔助降血脂及抗氧化功效。

關(guān)鍵詞：三七蜜片;高脂血癥;降血脂;抗氧化;大鼠;模型

研究表明，三七皂苷有一定的抗脂質(zhì)過氧化作用[1]，對心腦血管疾病有良好的預防和治療作用[2]。國內(nèi)外都在積極探索調(diào)節(jié)血脂作用的生物資源，而中藥及中藥制劑在這些方面具有良好的發(fā)展空間[3]。大量研究表明，三七除具有活血補血作用外，還具有改善心肌缺血、抗心律失常、降血脂[4]、降血壓、抗炎等作用[5-6]。本文結(jié)合中藥記載及現(xiàn)在醫(yī)學研究，將三七按照飲片相關(guān)工藝結(jié)合保健食品相關(guān)技術(shù)規(guī)范[7-8]，制成三七蜜片保健食品，探討三七蜜片在大鼠血脂和抗氧化兩個水平的影響，為三七類保健食品開發(fā)提供科學依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

豹七三七，云南白藥中藥資源有限公司;油菜蜂蜜，云南白藥中藥資源有限公司;總膽固醇（TC）試劑盒，南京建成生物工程研究所;三酰甘油（TG）試劑盒，南京建成生物工程研究所;低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）試劑盒，南京建成生物工程研究所;高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）試劑盒，南京建成生物工程研究所;SOD試劑盒，南京建成生物工程研究所;丙二醛（MDA）試劑盒，南京建成生物工程研究所;GSH試劑盒，南京建成生物工程研究所;蛋白質(zhì)羰基試劑盒，南京建成生物工程研究所;考馬斯亮藍試劑盒，南京建成生物工程研究所;無水乙醇，國藥集團化學試劑廠;冰醋酸，國藥集團化學試劑廠;乙酸乙酯，國藥集團化學試劑廠;SPF級健康雄性SD大鼠[（200±20）g]：廣東省醫(yī)學實驗動物中心;實驗動物使用許可證號：SYXK（滇）2017—0004，發(fā)證單位：昆明市科技局。

1.2 儀器與設(shè)備

PL-203型電子天平，梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司;JJ2000型電子天平，美國雙杰兄弟（集團）有限公司常熟市雙杰測試儀器廠;一次性 20 μL 微量采血吸管，姜堰市健華醫(yī)療器械有限公司;3K15 型高速冷凍離心機，Sigma公司;Multiskan Go型全波長酶標儀，美國 Thermo公司;GZX-9240MBE電熱鼓風干燥箱，上海博訊醫(yī)療設(shè)備廠;組織勻漿機，南京馬內(nèi)里儀器有限公司。

1.3 實驗方法

1.3.1 輔助降血脂方法[9-10] 雄性SD大鼠87 只，取SD大鼠（12 只）作為空白對照組，給予普通飼料。75 只給予高脂飼料（配方：20.0%蔗糖、15%豬油、1.2%膽固醇、0.2%膽酸鈉，余為維持飼料）作為造模組。造模組給予高脂飼料 2 周后，空白對照組和造模組的大鼠不禁食采血（眼內(nèi)眥），采血后分離血清，按試劑盒方法測定血清 TC、TG、LDL-C、HDL-C 水平[11-12]。初步設(shè)計三七樣品為1.00 g/kg，即人臨床日服用 6 g/d的 10 倍量算;三七蜜片（包含水分）為低劑量 1.32 g/kg、中劑量 2.64 g/kg、高劑量 5.28 g/kg。根據(jù)TC水平將造模成功的大鼠隨機分成 5 組，每組 15 只，分別為模型對照組、豹七三七組（1.00 g/kg）、三七蜜片低劑量組（1.32 g/kg）、中劑量組（2.64 g/kg）、高劑量組（5.28 g/kg）。每日按 1.0 mL/100 g灌胃給予受試樣品給藥1次，空白對照組和模型對照組同時給予同體積的相應溶劑，連續(xù)給藥 30 d。各組動物間隔 3 d稱重 1 次，調(diào)整給藥劑量?？瞻讓φ战M給予普通飼料，各給藥組及模型對照組給予高脂飼料[13]。

1.3.2 抗氧化實驗方法[14-16] 選用雄性SD鼠 60 只，按體重隨機分為空白對照組、模型對照組、三七蜜片低劑量組、三七蜜片中劑量組、三七蜜片高劑量組，每組 12 只。每周稱量體重1次。除空白對照組和模型對照組大鼠灌胃給予等容量純水外，其余各組每天按劑量灌胃給予對應樣品1次，連續(xù) 30 d，給藥容積為 10 mL/kg。末次給藥后，除空白對照組外，其余各組禁食 16 h（過夜），然后 1 次性灌胃給予 50%乙醇 12 mL/kg BW，6 h后腹主動脈采血，取肝臟。全血 4 ℃靜置 3 h后使用離心機制備血清（3 500 r/min）。在肝臟相同位置處稱取約 0.5 g 肝臟組織，加定量生理鹽水，冰浴條件下用勻漿機勻漿（2 000 r/min），制備 10%勻漿液[17-19]。參照試劑盒說明書測定血清和肝組織中GSH含量、MDA含量、蛋白質(zhì)羰基含量和 SOD活力。

1.3.3 三七蜜片研制 選用云南白藥中藥資源有限公司提供的豹七三七凍干片為原料，經(jīng)過初篩厚度在1.5～2.5 mm、截面寬度3～5 mm 作為三七蜜片制備材料。先用50%油菜蜂蜜水浸泡30～60 min至三七凍干片吸水均勻，之后選用相同濃度油菜蜂蜜水按照三七凍干片∶油菜蜂蜜水=1∶10比例進行熬煮、濃縮。用折光儀及密度計進行濃縮液比重測試，濃縮至比重為1.2停止加熱熬煮。過夜12 h浸泡后撈出三七片，50 ℃條件熱風烘干2 h后30 ℃吹干，即得實驗用三七蜜片樣品。

2 結(jié)果與分析

2.1 三七蜜片對混合高脂血癥大鼠血脂的影響

如表1所示，與空白對照組比較，模型對照組的鼠血清TC、TG、LDL-C的含量均顯著升高（P<0.01）。與模型對照組比較，豹七三七組大鼠血清 TC、TG、LDL-C、HDL-C的含量均無明顯影響作用（P>0.05）。與模型對照組比較，三七蜜片低劑量組的大鼠血清中TC、TG、LDL-C、HDL-C的含量均無明顯影響作用（P>0.05）;三七蜜片中劑量組的LDL-C、高劑量組的TC、LDL-C含量有不同程度的降低，具有統(tǒng)計學差異（P<0.01、P<0.05、P<0.05）。

2.2 三七蜜片對大鼠抗氧化功效的影響

表2表明，與空白對照組比較，模型組大鼠肝臟GSH含量顯著降低（P<0.001）、MDA含量顯著升高（P<0.001）、蛋白質(zhì)羰基含量顯著升高（P<0.05）、SOD 活力顯著降低（P<0.05），表明造模成功。與模型對照組比較，三七蜜片低、中、高劑量組大鼠肝臟GSH含量顯著升高（P<0.05、P<0.001、P<0.001），中、高劑量組大鼠肝臟MDA含量顯著降低（P<0.01、P<0.01），低、中、高劑量組大鼠肝臟蛋白質(zhì)羰基含量無明顯變化，低、中劑量組大鼠肝臟SOD活力明顯降低（P<0.01、P<0.05）。

3 結(jié)論與討論

輔助降血脂實驗結(jié)果表明，三七蜜片樣品對混合型高血脂大鼠的血脂具有一定的降低作用;對于血脂升高相對較低的大鼠高膽固醇血癥模型，三七蜜片樣品對該模型大鼠血清中的TC、LDL-C具有顯著的降低作用，對TG無明顯降低作用。三七蜜片低、中、高劑量均能明顯提升模型大鼠肝臟GSH含量，中、高劑量均能明顯降低模型大鼠肝臟 MDA含量，低、中、高劑量均無明顯降低模型大鼠肝臟蛋白質(zhì)羰基含量，提升 SOD 活力的作用。

綜合功效實驗結(jié)果表明，單純的三七蜜片在輔助降血脂以及抗氧化功能方面有一定的功效作用，但整體作用效果按照保健食品評判標準均未達到要求，分析可能一是由于處方單一，按照中醫(yī)君臣佐使理論，應該進行復方設(shè)計，協(xié)同增強抗氧化功效以及輔助降血脂功效[20-21];二是可能由于單方產(chǎn)品實驗劑量未達到藥理功能評價劑量，后續(xù)可進行提高實驗劑量以及試驗周期進行考察驗證[22-23];三是可能由于在三七蜜片制備過程中工藝對三七有效成分損失較大，后期可對產(chǎn)品工藝進行改進?！?/p>

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Effect of Panax Notoginseng Honey Tablet on Lowering Blood Lipid and Anti-oxidation

YU Wang-ping，GUO Dong-mei，KONG Qing-long，ZHU Zhuo，LI Hua-jun，YOU Yan

（Yunnan Institute of MateriaMedica/Yunnan Bai Yao Group Innovation and R&D Center/3Yunnan Province Company Key Laboratory for TCM and Ethnic Drug of New Drug Creation，Kunming 650111，China）

Abstract：Objective To investigate the effect of panax notoginseng honey tablet on helping to reduce blood lipid and antioxidation in rats.Method With reference to the evaluation methods of health-food-assisted lowering blood lipid and antioxidant functions，healthy rats were selected for the establishment of a model of mixed hyperlipidemia and ethanol induced oxidative damage in rats.The activity of serum TC，TG，LDL-C and HDL-C as well as liver GSH，MDA，protein carbonyl and SOD were detected 30 days after administration.According to the health food evaluation technical specifications to determine the final results.Result The samples of panax notoginseng honey tablets had a certain effect on the reduction of blood lipid in mixed hyperlipidemia rats.As for the rat hypercholesterolemia model with relatively low increase of blood lipid，panax notoginseng tablet had significant effect on reducing TC and LDL-C in the serum of the model rats，but no significant effect on TG.The low，medium and high doses of panax notoginseng honey tablets could significantly increase the content of GSH in the liver of the model rats，while the high and medium doses could significantly reduce the content of MDA in the liver of the model rats，while the low，medium and high doses could not significantly reduce the content of carbonyl protein in the liver of the model rats and increase the activity of SOD.Conclusion In this experiment，panax notoginseng honey tablet has certain auxiliary effect of lowering blood lipid and anti-oxidation.

Keywords：panax notoginseng honey table;hyperlipidemia;lowering blood lipid;anti-oxidation;rat;model