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        高效液相色譜法測(cè)定食品中蘇丹紅的研究

        2021-09-10 07:22:44孫雪娜
        中國(guó)食品 2021年9期
        關(guān)鍵詞:蘇丹紅有機(jī)酸檢測(cè)器

        孫雪娜

        蘇丹紅是一種化學(xué)染料,具有致癌性,不允許在食品中添加。但有些不法商販為了讓食品顏色更鮮艷,仍會(huì)使用蘇丹紅,因此加強(qiáng)對(duì)食品中蘇丹紅的檢測(cè)十分必要。本實(shí)驗(yàn)在參考國(guó)內(nèi)外檢測(cè)方案的基礎(chǔ)上,對(duì)檢測(cè)方案進(jìn)行了改善,實(shí)現(xiàn)了簡(jiǎn)單、迅速、準(zhǔn)確的目的。

        一、材料及方案

        1.儀器。高效液相色譜儀安捷倫1100(二極管陣列檢測(cè)器)和一些常用儀器。

        2.試劑和標(biāo)準(zhǔn)物。甲醇(色譜純度);乙腈(色譜純度);有機(jī)酸溶劑(CH3COOH∶HCL∶H2O=10∶2∶1);20%NAOH溶液;乙醚+石油醚(1+1)(分析純度)。量取蘇丹紅I、蘇丹紅Ⅱ、蘇丹紅Ⅲ、蘇丹紅IV、蘇丹紅G和蘇丹紅7B各10.0mg作為標(biāo)準(zhǔn)貯備液(100 μg/mL),用乙醚將其溶解后,用正己烷配制成100mL的貯備液,用于標(biāo)準(zhǔn)系列的制備。

        3.方法。(1)樣品處理。在50mL軟木管中用20mL有機(jī)酸溶液提取約10g樣品2-3次,收集并合并低酸溶液,在水浴中蒸發(fā)大約2/3的酸。接下來(lái)用20%氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)到微堿性,放入10mL乙醚+石油醚(1+1)在分液漏斗中萃取2-3次,然后將上層醚層收齊,在水浴中蒸發(fā)濃縮,甲醇定容至2.0mL,過(guò)0.45微米的濾膜,上機(jī)。(2)色譜條件。色譜柱Phenomenex cl8,250x4.60mm,5μm,流動(dòng)速度是1.0mL/min。色譜柱的溫度是30℃,流動(dòng)相內(nèi)的溶劑是酸性的水溶液(165mL的CH3COOH溶于1000mL的水)和溶劑B(乙腈)。它的梯度洗脫見(jiàn)表1。

        蘇丹橙G是432納米,蘇丹紅I是478納米,蘇丹紅Ⅱ、蘇丹紅Ⅲ、蘇丹紅IV、蘇丹紅7B是520納米;進(jìn)樣量是20微升,標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度是5.0μg/mL。峰值出現(xiàn)的時(shí)間分別是蘇丹紅G(5.704分鐘)、蘇丹紅I(7.227分鐘)、蘇丹紅Ⅲ(15.470分鐘)、蘇丹紅7B(21.510分鐘)、蘇丹紅IV(22.241分鐘)。

        4.標(biāo)準(zhǔn)曲線及計(jì)算。量取標(biāo)準(zhǔn)貯備液0.5、1.0、2.0、3.0、5.0μg/mL,根據(jù)檢測(cè)的條件制作標(biāo)準(zhǔn)曲線,計(jì)算方法為∶C*V/M=R。

        二、結(jié)果

        1.精密度實(shí)驗(yàn)。把配制完的濃度分別是1.0、2.0、5.0μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液根據(jù)測(cè)定條件,每種濃度檢測(cè)6次,計(jì)算出平均變異數(shù)據(jù)。

        2.回收率試驗(yàn)。在沒(méi)有蘇丹紅的食物內(nèi)加入1.0、2.0、5.0μg/kg的三個(gè)不同濃度開(kāi)展回收實(shí)驗(yàn),計(jì)算平均的回收率。

        3.最小檢出限度。稱取樣品10g,提取后再定容到2mL。

        4.樣品的檢測(cè)。根據(jù)該種方法,對(duì)抽檢的30種食物樣品開(kāi)始測(cè)定。

        三、討論

        1.前處理方式的對(duì)比。當(dāng)前,樣品內(nèi)的蘇丹紅的樣品前處理辦法有氧化鋁層析柱法以及甲醇直接浸提法,兩者均有優(yōu)劣。利用蘇丹紅不但易溶于有機(jī)溶劑,而且易溶于有機(jī)酸的特性,本實(shí)驗(yàn)使用有機(jī)酸萃取法對(duì)樣品開(kāi)展提取純化,解決了上述兩種方法的不妥之處,操作簡(jiǎn)便、迅速,回收率可到85%以上,重現(xiàn)性好。

        2.色譜條件的改善。本方法采用二極管陣列檢測(cè)器同時(shí)檢測(cè)蘇丹紅I等6種,所選要求應(yīng)同時(shí)滿足良好的分離效率和實(shí)用性。它可以同時(shí)被多個(gè)波長(zhǎng)測(cè)定,因?yàn)樗纳V圖是三維圖譜,可以用保留時(shí)間和光譜定性表征,相較過(guò)去的紫外-可見(jiàn)光檢測(cè)器更準(zhǔn)確。而且測(cè)定時(shí)間只有23分鐘,不但可以保證物質(zhì)的分離結(jié)果,還可以實(shí)現(xiàn)日常檢測(cè)對(duì)于迅速的需求。

        由此可見(jiàn),該方法可用于蘇丹紅I等6種物質(zhì)的同時(shí)檢測(cè),且靈活、迅速,適用于日常檢測(cè)。

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