王貝琦

摘要：目的 分析臨床下呼吸道感染患者非發(fā)酵菌分離情況及其藥物敏感性試驗(yàn)。方法 將2020.1-2020.12我院下呼吸道感染患者檢查標(biāo)本主要三種非發(fā)酵菌其臨床分離情況和藥物敏感性分析。結(jié)果 痰標(biāo)本中主要分離出銅綠假單胞菌、鮑曼不動(dòng)桿菌、嗜麥芽窄食單胞等3種非發(fā)酵菌，呈多重耐藥趨勢(shì)。結(jié)論 非發(fā)酵菌因其特殊的耐藥機(jī)制，使感染患者的耐藥性情況日益嚴(yán)重，臨床應(yīng)當(dāng)根據(jù)藥敏試驗(yàn)結(jié)果合理使用抗生素，具有重要意義。

關(guān)鍵詞：藥物敏感性;臨床分離;下呼吸道感染;非發(fā)酵菌

【中圖分類號(hào)】R373.1 ? ? ? ? ? ? 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A ? ? ? ? ? ? 【文章編號(hào)】2107-2306（2021）05-035-02

非發(fā)酵菌在臨床中是指一大群不發(fā)酵葡萄糖或僅以氧化形式利用葡萄糖的需氧或兼性厭氧、無(wú)芽胞的革蘭陰性桿菌，多為條件致病菌[1]。目前，在臨床下呼吸道感染病原菌中存在一定上升跡象，及時(shí)掌握非發(fā)酵菌分布于下呼吸道感染患者中，以及了解患者藥敏情況，對(duì)提高臨床治療效果、降低治療費(fèi)用、縮短治療時(shí)間與住院時(shí)間，便于臨床合理用藥具有重要意義[2]。本文旨在對(duì)下呼吸道感染非發(fā)酵菌患者分離情況及藥物敏感性進(jìn)行分析，內(nèi)容如下。

1資料與方法

1.1基線資料

收集我院2020.1-2020.12下呼吸道感染患者纖支鏡或痰液分泌物標(biāo)本，根據(jù)“全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作過(guò)程”判斷痰標(biāo)準(zhǔn)符合情況，培養(yǎng)分離可接受痰標(biāo)本和合格痰標(biāo)本的致病菌。

1.2方法

均采用法國(guó)梅里埃公司生產(chǎn)的細(xì)菌鑒定板卡以及干粉添加劑與培養(yǎng)基。使用ATCC27853銅綠假單胞菌、ATCC25922大腸埃希菌作為室內(nèi)質(zhì)量控制，所有菌株均來(lái)自于臨床衛(wèi)生檢驗(yàn)中心。同樣使用上述公司生產(chǎn)的細(xì)菌半自動(dòng)檢定儀對(duì)細(xì)菌進(jìn)行鑒定以及根據(jù)CLSI進(jìn)行藥物敏感性試驗(yàn)。

2結(jié)果

2.1非發(fā)酵菌分離情況

在2020.1-2020.12間共接收合格痰標(biāo)本與纖支鏡分泌物標(biāo)本共2534份，分離出1161株病原菌，培養(yǎng)陽(yáng)性率為45.82%。其中革蘭陽(yáng)性細(xì)菌250株（21.53%），革蘭陰性細(xì)菌911株（78.47%）。在革蘭陰性細(xì)菌中有490株（占53.79%）非發(fā)酵菌，其中分離出銅綠假單胞菌275株（56.12%），鮑曼不動(dòng)桿菌125株（25.51%），嗜麥芽窄食單胞菌46株（9.39%），其他非發(fā)酵菌株44株（8.98%）。

2.2藥物敏感性

三種非發(fā)酵菌常用藥物敏感性試驗(yàn)情況見(jiàn)表1。

3討論

非發(fā)酵菌一般具有以下特征：不發(fā)酵葡萄糖，在OF培養(yǎng)基中表現(xiàn)為氧化型或產(chǎn)堿型、氧化酶陽(yáng)性（除不動(dòng)桿菌屬和窄食單胞菌外）、生長(zhǎng)要求低、動(dòng)力陽(yáng)性（除不動(dòng)桿菌屬和莫拉菌屬外）、無(wú)芽孢的革蘭陰性桿菌，廣泛存在于自然界的水、土壤和空氣中，有的是人體皮膚黏膜表面的正常菌群組成成分，一般是條件致病菌。由于非發(fā)酵菌生長(zhǎng)營(yíng)養(yǎng)要求低，在水及潮濕環(huán)境中極易生長(zhǎng)，并對(duì)抗生素和消毒劑有天然耐藥質(zhì)粒。此外，侵入性醫(yī)學(xué)治療、抗生素、化療的廣泛使用等非發(fā)酵菌已成為醫(yī)院內(nèi)感染的主要致病菌。人類非發(fā)酵菌感染中，假單胞菌占70%～80%，主要為銅綠假單胞菌，此外，不動(dòng)桿菌屬、嗜麥芽窄食單胞菌等也是常見(jiàn)的病原菌[3]。

從表1可統(tǒng)計(jì)出，銅綠假單胞菌對(duì)替卡西林/克拉維酸的耐藥率為61.45%，對(duì)碳青霉烯類、對(duì)頭孢吡肟、頭孢他定、阿米卡星等比較敏感，對(duì)多粘菌素E罕見(jiàn)耐藥;鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦、氨芐西林/舒巴坦、替卡西林/克拉維酸的耐藥率達(dá)74% 以上，對(duì)第三、四代頭孢及碳青霉烯類耐藥率達(dá)72% 以上，對(duì)慶大霉素、妥布霉素、阿米卡星的耐藥率達(dá)72% 以上，對(duì)環(huán)丙沙星、左氧氟沙星的耐藥率達(dá)76% 以上，對(duì)多粘菌素E罕見(jiàn)耐藥;嗜麥芽窄食單胞菌對(duì)頭孢他啶、替卡西林/克拉維酸的耐藥率各為63.04%、52.17%，對(duì)復(fù)方新諾明、米諾環(huán)素及左氧氟沙星比較敏感。

銅綠假單胞菌和不動(dòng)桿菌屬主要產(chǎn)生以下耐藥機(jī)制：①產(chǎn)β-內(nèi)酰胺酶，兩者均可產(chǎn)生染色體介導(dǎo)的頭孢菌素酶（AmpC酶），某些抗生素的應(yīng)用可能選擇出去抑制高產(chǎn)AmpC酶的突變株導(dǎo)致銅綠假單胞菌對(duì)哌拉西林、第三代頭孢菌素等多種抗生素耐藥。此外，該兩種菌尚可產(chǎn)生多種其他β-內(nèi)酰胺酶以及絲氨酸或金屬碳青霉烯酶（IMP、VIM酶）等。②細(xì)菌外膜蛋白改變使抗生素進(jìn)入細(xì)菌體內(nèi)的量減少。③氨基糖苷類化酶導(dǎo)致此兩種細(xì)菌對(duì)多種氨基苷類抗生素耐藥。④喹諾類耐藥，兩種細(xì)菌均可發(fā)生拓?fù)洚悩?gòu)酶ⅡgyrA或拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅳ的parC突變，導(dǎo)致對(duì)喹諾酮類耐藥。⑤外排泵，位于細(xì)菌細(xì)胞膜上的外排泵可將β-內(nèi)酰類、喹諾酮類，有時(shí)甚至氨基糖苷類等抗菌藥排出，導(dǎo)致細(xì)菌耐藥。由于嗜麥芽窄食單胞菌外膜低滲透性而對(duì)多種抗生素天然耐藥，并產(chǎn)生一種可引起亞胺培南耐藥、染色體介導(dǎo)的B類β-內(nèi)酰胺酶（Bush3），即一種含鋅離子金屬β-內(nèi)酰胺酶。該細(xì)菌對(duì)頭孢菌素類、碳青霉烯類、單環(huán)β-內(nèi)酰胺類和氨基糖苷類抗生素均耐藥[4]。

銅綠假單胞菌由于其特殊的耐藥機(jī)制及膜孔蛋白的突變，所有抗菌藥物在延長(zhǎng)治療期間可致該菌發(fā)展為耐藥，初代敏感菌株在開(kāi)始治療后3～4天內(nèi)可發(fā)展為耐藥株[5]，測(cè)試重復(fù)分離菌株的藥敏試驗(yàn)具有重要意義，對(duì)碳青霉烯類的耐藥率已經(jīng)超過(guò)20%，臨床治療目前提倡聯(lián)合用藥。鮑曼不動(dòng)桿菌作為ICU院內(nèi)感染和定植的主要菌，其多重耐藥性亦呈明顯上升趨勢(shì)。近年來(lái)，在ICU、燒傷、急診監(jiān)護(hù)室及呼吸內(nèi)科等病房的危重病人不斷出現(xiàn)的泛耐藥銅綠假單胞菌和不動(dòng)桿菌，使得治療變得非常棘手，多粘菌素成為目前泛耐菌治療的最后一道防線。

綜上所述，對(duì)于臨床中的非發(fā)酵菌感染標(biāo)本，微生物實(shí)驗(yàn)室確定菌種后，應(yīng)及時(shí)與臨床溝通進(jìn)行藥物敏感性試驗(yàn)，為臨床早期治療提供用藥依據(jù)，合理選擇用藥，延緩細(xì)菌耐藥，為患者爭(zhēng)取有利的治療時(shí)機(jī)。同時(shí)，通過(guò)藥物敏感試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)細(xì)菌耐藥機(jī)制，對(duì)其進(jìn)行流行病學(xué)追蹤監(jiān)測(cè)，為臨床經(jīng)驗(yàn)治療調(diào)整用藥，針對(duì)細(xì)菌耐藥表型進(jìn)行目標(biāo)性藥物治療，定期修訂臨床抗菌譜內(nèi)容，為醫(yī)院制訂預(yù)防措施提供依據(jù)[6]。根據(jù)不同的藥物敏感性及MIC值來(lái)聯(lián)合藥物治療等，具有重要的指導(dǎo)意義。

參考文獻(xiàn)：

[1]辜依海，張微，侯軒，等.2010-2019年某三級(jí)甲等醫(yī)院非發(fā)酵革蘭氏陰性桿菌的分布及耐藥性分析[J].中國(guó)藥房，2020，31（23）：2889-2894.

[2]孫艷婷，吳大瑋，王曉斐， 等.新建醫(yī)院ICU臨床分離菌的分布及耐藥變遷[J].山東大學(xué)學(xué)報(bào)（醫(yī)學(xué)版），2020，58（2）：64-71.

[3]叢玉隆，尹一兵，陳瑜.《檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)高級(jí)教程》[M].第一版.中華醫(yī)學(xué)電子音像出版社，2016.891

[4]張秀珍，朱徳妹.《臨床微生物檢驗(yàn)問(wèn)與答》[M].第2版.人民衛(wèi)生出版社，2014.892

[5]倪語(yǔ)星，尚紅.《臨床微生物學(xué)檢與檢驗(yàn)》[M].第4版.人民衛(wèi)生出版社.2007.155

[6]張秀珍，朱徳妹.《臨床微生物檢驗(yàn)問(wèn)與答》[M].第2版.人民衛(wèi)生出版社，2014.265