韋先梅 韓毓 杜就舊

1.?？谑械谒娜嗣襻t(yī)院婦產(chǎn)科，海南 ?？?571100

2.?？谑械谒娜嗣襻t(yī)院產(chǎn)科，海南 海口 571100

近年來，催產(chǎn)素在骨重建中的作用已被提出[1]。催產(chǎn)素是一種神經(jīng)肽，主要在下丘腦的大細(xì)胞神經(jīng)元中合成，認(rèn)為是下丘腦特異性mRNAs[2]；它還存在于一些外周組織，包括生殖系統(tǒng)、心臟和骨骼[2]。催產(chǎn)素及其受體受到雌激素的正向調(diào)節(jié)，口服雌激素會(huì)在12 h內(nèi)誘導(dǎo)血清催產(chǎn)素水平的增加[3]。皮下注射催產(chǎn)素可逆轉(zhuǎn)去卵巢小鼠的骨丟失，增強(qiáng)骨的微結(jié)構(gòu)和生物力學(xué)強(qiáng)度[4]。催產(chǎn)素受體基因敲除小鼠通過減少成骨細(xì)胞分化導(dǎo)致骨形成減少而出現(xiàn)骨質(zhì)疏松癥(osteoporosis, OP)，這種骨損傷效應(yīng)可通過腹腔注射催產(chǎn)素來緩解[5]。在一項(xiàng)對(duì)20名至少有過一次骨折經(jīng)歷的絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松婦女與16名健康對(duì)照組的初步研究中，低催產(chǎn)素血清水平與嚴(yán)重骨質(zhì)疏松癥顯著相關(guān)，獨(dú)立于其他與OP相關(guān)或已知的調(diào)節(jié)催產(chǎn)素血清水平的因素，如年齡、雌二醇或瘦素[6]。這些研究表明催產(chǎn)素可能參與了絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥的病理生理學(xué)。但是，關(guān)于催產(chǎn)素在絕經(jīng)后女性骨質(zhì)疏松中的作用研究有限。因此，本研究的目的是評(píng)估催產(chǎn)素和絕經(jīng)后婦女骨密度之間的關(guān)系。

1 材料和方法

1.1 材料

本研究納入2018年1月至2020年4月在海口市第四人民醫(yī)院進(jìn)行體檢且需要進(jìn)行骨密度 (bone mineral density, BMD)檢測(cè)的絕經(jīng)后漢族女性。納入標(biāo)準(zhǔn)：年齡為45～65歲的女性，絕經(jīng)時(shí)間超過12個(gè)月，平素健康，根據(jù)腰椎T值或者股骨頸部位T值診斷是否患有骨質(zhì)疏松癥：T值> -1為正常骨密度，T值< -2.5為骨質(zhì)疏松。排除標(biāo)準(zhǔn)：嚴(yán)重腎功能衰竭(EPI< 30 ml/min)；缺乏完整的資料；嚴(yán)重肝功能衰竭；中度和重度心力衰竭(NYHA III和IV)；缺血性心臟病病史；結(jié)節(jié)病、炎癥性腸病；風(fēng)濕性疾病，如系統(tǒng)性紅斑狼瘡和類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎;骨質(zhì)疏松癥以外的肌肉骨骼疾病;腫瘤;嚴(yán)重肺部疾病，體質(zhì)量指數(shù)(body mass index, BMI) > 30 kg/m2；使用過雙膦酸鹽、特立帕肽、雌激素、皮質(zhì)類固醇、芳香酶抑制劑或其他可能干擾骨代謝的藥物。

每位參與者都完成了一般資料的問卷調(diào)查，包括骨質(zhì)疏松癥的家族史、自我報(bào)告的病史、繼往骨折史以及是否服用過已知影響骨代謝的藥物，并檢測(cè)受試者身高和體重。所有受試者在納入研究之前均簽署知情同意書，本研究得到了?？谑械谒娜嗣襻t(yī)院倫理委員會(huì)的批準(zhǔn)(20192665)。

1.2 方法

1.2.1骨密度檢測(cè):采用雙能X線骨密度儀(DXA，LUNAR Expert Devices；GE Lunar)測(cè)量受試者腰椎(L1-4)和左側(cè)股骨頸區(qū)域的骨密度。腰椎(L1-4)和左側(cè)股骨頸的測(cè)量之間進(jìn)行矯正。骨密度根據(jù)世界衛(wèi)生組織(WHO)定義，根據(jù)腰椎T值或者股骨頸部位T值進(jìn)行確定：正常骨密度(T值>-1)、骨量減少(-1< T值< -2.5)和骨質(zhì)疏松癥(T值<-2.5)。

1.2.2血清指標(biāo)檢測(cè)：禁食過夜后，第二天空腹抽取受試者靜脈血，室溫凝結(jié)30 min后離心。將血清上清液等分于-80 ℃冰箱中保存，直至測(cè)定。催產(chǎn)素檢測(cè)使用催產(chǎn)素EIA試劑盒[OTR (Oxytocin Receptor) BioAssay ELISA Kit (Human)]按制造商說明書進(jìn)行檢測(cè)，批內(nèi)和批間變異系數(shù)分別為5.1%和7.1%。根據(jù)制造商的說明，使用瘦素ELISA試劑盒(TECO Medical Group)檢測(cè)血清瘦素血清水平，批內(nèi)和批間變異系數(shù)分別為6.1%和7.6%。雌二醇的測(cè)定采用ADVIACentaur XP(西門子),檢出下限為11.8 pg/mL，批內(nèi)和批間變異系數(shù)分別為10%和6.7%。使用iSYS(IDS)免疫分析儀檢測(cè)血清骨吸收標(biāo)志物I型膠原C端肽(CTX)、骨形成標(biāo)志物I型前膠原N端肽(PINP)和骨堿性磷酸酶(BALP)。在一天中的同一時(shí)間采集血樣，以減小日時(shí)間對(duì)檢測(cè)指標(biāo)水平的影響。變異系數(shù)分別小于8.1% ( CTX)、1.1% (PINP)和3.5% (BALP)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

檢測(cè)結(jié)果使用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示；用Pearson或者Spearman相關(guān)系數(shù)評(píng)價(jià)血清水平與BMD的相關(guān)性，以及骨轉(zhuǎn)換指標(biāo)與血清催產(chǎn)素水平及各部位BMD的相關(guān)性。偏相關(guān)分析用于調(diào)整年齡和BMI。通過多元回歸分析確定骨密度與其他變量之間的獨(dú)立關(guān)系。在雙變量相關(guān)分析中，所選擇的自變量與BMD有顯著的相關(guān)性。采用逐步多元回歸分析，在校正其他自變量后，確定一個(gè)自變量對(duì)血清催產(chǎn)素濃度的影響。用F的概率選擇要納入模型的變量，輸入P值小于0.10的變量，將P值大于0.11的變量從模型中剔除。使用SPSS 19.0執(zhí)行所有統(tǒng)計(jì)分析，P<0.05表示比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 一般臨床資料

本研究最終納入317位受試者，根據(jù)骨密度檢測(cè)結(jié)果分為正常骨密度組(n=185)及骨質(zhì)疏松癥組(n=132)；兩組受試者一般參數(shù)如表1所示。骨質(zhì)疏松組的年齡、絕經(jīng)年限和體質(zhì)量指數(shù)均高于正常骨密度組(P均<0.001)。骨質(zhì)疏松癥組血清催產(chǎn)素、雌激素和瘦素濃度低于正常骨密度組(P均<0.001)。骨質(zhì)疏松癥組PINP、BALP和β-CTX 濃度高于正常骨密度組(P均<0.001)。

表1 一般臨床資料

2.2 血清催產(chǎn)素與一般參數(shù)相關(guān)分析

表2顯示了血清催產(chǎn)素濃度與人體測(cè)量學(xué)和生化變量之間的關(guān)系。骨質(zhì)疏松癥組中血清催產(chǎn)素濃度與年齡、絕經(jīng)年限、BMI和血清PINP、BLAP、CTX濃度呈負(fù)相關(guān)；與瘦素和雌激素具有明顯正相關(guān)性；在正常骨密度組中，血清催產(chǎn)素濃度和各種指標(biāo)未發(fā)現(xiàn)明顯的相關(guān)性。

表2 血清催產(chǎn)素濃度與年齡、人體測(cè)量學(xué)和生化變量之間的相關(guān)性分析

2.3 骨密度與血清催產(chǎn)素濃度等指標(biāo)相關(guān)分析

腰椎和股骨頸骨密度與年齡、絕經(jīng)年限、BMI和血清PINP、BLAP、CTX濃度呈負(fù)相關(guān)，與雌激素、瘦素和催產(chǎn)素濃度呈正相關(guān)。調(diào)整年齡和BMI后，腰椎和股骨頸骨密度仍然與絕經(jīng)年限以及血清PINP、BLAP和CTX濃度呈負(fù)相關(guān)，與雌激素、瘦素和催產(chǎn)素濃度呈正相關(guān)。見表3。

表3 調(diào)整年齡和BMI前后骨密度與參數(shù)相關(guān)性

2.4 多元回歸分析

對(duì)年齡和BMI進(jìn)行調(diào)整后，進(jìn)行多元回歸分析以確定BMD的預(yù)測(cè)因子(表4)。絕經(jīng)年限和血清PINP、BLAP、CTX、雌激素、瘦素和催產(chǎn)素濃度為自變量時(shí)，絕經(jīng)年限、血清催產(chǎn)素、PINP和CTX是腰椎和股骨頸骨密度的顯著預(yù)測(cè)因子。

表4 絕經(jīng)后婦女骨密度(因變量)與相關(guān)變量(因變量)之間相關(guān)性的多元回歸分析

3 討論

長(zhǎng)期以來，神經(jīng)垂體激素催產(chǎn)素一直被認(rèn)為是泌乳的唯一調(diào)節(jié)器；然而，近期有學(xué)者[1]研究認(rèn)為它對(duì)骨代謝具有潛在影響。在發(fā)現(xiàn)骨細(xì)胞上的催產(chǎn)素受體之后，體外和體內(nèi)研究[5]表明催產(chǎn)素具有促進(jìn)骨形成的效果。目前關(guān)于催產(chǎn)素在骨代謝中作用的人類數(shù)據(jù)有限，且這部分研究都是選擇在特定小群體上進(jìn)行的[6]。本研究結(jié)果表明，在絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥婦女中，催產(chǎn)素血清水平與腰椎和股骨頸部位骨密度呈正相關(guān)。

眾所周知，BMD有多個(gè)決定因素，在調(diào)整了大多數(shù)決定因素后，催產(chǎn)素和BMD之間的關(guān)聯(lián)仍然顯著。絕經(jīng)后婦女骨密度的一個(gè)主要決定因素是雌激素的血清水平[7]；血清雌二醇水平較低的婦女患骨質(zhì)疏松性骨折的風(fēng)險(xiǎn)更高[8]。此外，雌激素和催產(chǎn)素在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中關(guān)系密切，已知催產(chǎn)素及其受體受雌激素的正向調(diào)節(jié)；在外周水平，已有研究[9]表明成骨細(xì)胞受到催產(chǎn)素產(chǎn)生的影響，這種結(jié)果是由雌激素通過非基因組機(jī)制控制的。在小鼠模型中，骨髓催產(chǎn)素介導(dǎo)雌激素在骨骼中具有合成代謝作用[10]。由于這些原因，本研究同時(shí)檢測(cè)血清雌激素的水平，結(jié)果表明血清雌激素以及催產(chǎn)素水平與股骨頸、腰椎骨密度均呈現(xiàn)顯著正相關(guān)，即使進(jìn)行BMI和年齡調(diào)整后也是如此。本研究發(fā)現(xiàn)與Lawson等[11-12]得出的數(shù)據(jù)一致，他們研究了兩種類型的女性催產(chǎn)素水平，這些女性的特點(diǎn)是雌激素水平低。對(duì)閉經(jīng)運(yùn)動(dòng)員控制雌二醇后，夜間催產(chǎn)素分泌的減少與骨骼結(jié)構(gòu)的改變密切相關(guān)；在患有神經(jīng)性厭食癥的女性中，夜間催產(chǎn)素水平的減少與DXA在所有測(cè)量位點(diǎn)進(jìn)行的低BMD評(píng)估有關(guān)。本研究結(jié)果提示，當(dāng)主要調(diào)節(jié)因子即雌激素水平很低時(shí)，催產(chǎn)素對(duì)骨代謝的影響尤為關(guān)鍵，提示催產(chǎn)素可能起到拯救作用。

催產(chǎn)素對(duì)骨代謝的作用機(jī)制尚不完全清楚，主要是通過雌激素間接作用和雌激素非依賴性作用于骨代謝。事實(shí)上，有學(xué)者最近認(rèn)為[13]，催產(chǎn)素介導(dǎo)雌激素對(duì)骨骼的合成代謝效應(yīng)。本研究結(jié)果和他人結(jié)果不一致，在進(jìn)行多元回歸分析以確定BMD的預(yù)測(cè)因子時(shí)，發(fā)現(xiàn)催產(chǎn)素是顯著預(yù)測(cè)因子，而雌激素不是。研究表明催產(chǎn)素在體外和體外對(duì)成骨細(xì)胞和破骨細(xì)胞均有直接作用[14]。此外，在去卵巢小鼠中，催產(chǎn)素能夠恢復(fù)雌激素缺乏引起的骨丟失，這是催產(chǎn)素對(duì)骨細(xì)胞直接作用的一個(gè)論點(diǎn)，而不依賴于雌激素的合成代謝作用。瘦素既是下丘腦催產(chǎn)素分泌的負(fù)性調(diào)節(jié)因子，又是骨代謝的復(fù)雜調(diào)節(jié)因子[14]。本研究中發(fā)現(xiàn)催產(chǎn)素與瘦素呈正相關(guān)，同時(shí)觀察到血清催產(chǎn)素和瘦素水平與所有部位的BMD呈正相關(guān)，在多變量分析仍有顯著相關(guān)性。這些發(fā)現(xiàn)提示催產(chǎn)素和瘦素對(duì)絕經(jīng)后婦女的骨代謝可能起相同的作用。

新近發(fā)現(xiàn)[15]催產(chǎn)素具有促進(jìn)成骨細(xì)胞分化、促進(jìn)破骨細(xì)胞形成和抑制成熟破骨細(xì)胞骨吸收活性的雙重作用。在本研究中，通過對(duì)骨轉(zhuǎn)換標(biāo)志物評(píng)估，高催產(chǎn)素血清水平與低骨重塑相關(guān)。不能將本研究的結(jié)果與任何其他關(guān)于催產(chǎn)素和骨轉(zhuǎn)換標(biāo)志物之間關(guān)系的人類研究進(jìn)行比較。催產(chǎn)素與BMD之間的關(guān)聯(lián)可能是通過催產(chǎn)素對(duì)骨重建的影響來介導(dǎo)的；因?yàn)樵谡{(diào)整其他指標(biāo)后，催產(chǎn)素與BMD之間的關(guān)系(在髖部顯著)仍然顯著。

這項(xiàng)在絕經(jīng)后婦女中進(jìn)行的研究表明，催產(chǎn)素血清水平與BMD呈正相關(guān)，其機(jī)制可能與催產(chǎn)素對(duì)骨轉(zhuǎn)換的影響有關(guān)，高催產(chǎn)素水平與骨代謝指標(biāo)呈負(fù)相關(guān)。這些結(jié)果強(qiáng)化了催產(chǎn)素在絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥的病理生理學(xué)中起作用的概念。但是由于研究樣本量較小，且均是女性，因此需要擴(kuò)大樣本量、加入其他年齡段及不同性別的人群開展進(jìn)一步的研究。