何 平，劉 成，周寰宇，蒲澤鳳，管天冰，戴傳云

（1.重慶市璧山區(qū)現(xiàn)代農(nóng)業(yè)發(fā)展促進中心 重慶 402760；2.重慶科技學(xué)院 重慶401331）

草莓(Fragaria ananassa Duck.)是薔薇科(Rosace)草莓屬(Fragaria)多年生常綠草本植物，其漿果果實柔軟多汁，色澤鮮艷，氣味芳香濃郁，口感酸甜，營養(yǎng)豐富，享有“水果皇后”和“春天第一果”之美譽，深受廣大消費者的喜愛，市場前景廣闊[1-3]。

近年來，草莓生產(chǎn)逐年遞增，種苗供不應(yīng)求。草莓種苗生產(chǎn)傳統(tǒng)上采用匍匐莖繁殖，種苗易受病毒侵害，導(dǎo)致品種退化，生產(chǎn)減產(chǎn),嚴重阻礙了草莓生產(chǎn)的健康發(fā)展[4-6]。植物組織快繁技術(shù)不僅能快速獲得大量的生產(chǎn)苗，而且能保持品種的優(yōu)良品性，非常適合種苗的生產(chǎn)[7]。目前，該技術(shù)已經(jīng)在鐵皮石斛[8]、金線蓮[9]等多個品種上取得成功。草莓苗不耐高溫，而且在開花前需要積累一定的蓄冷量，因此傳統(tǒng)匍匐莖繁殖常在高海拔地區(qū)進行，而植物組培工廠可以通過智能控溫系統(tǒng)，還可解決草莓育種的地域限制。

草莓組織培養(yǎng)技術(shù)在“法蘭地”、“幸香”、“豐香”等品種已開展研究[10-13]。本文以“隋珠”為例，研究不同添加物對草莓組培苗不定芽生根的影響，篩選出適宜草莓不定芽生根的培養(yǎng)基，為草莓組培苗工廠化和規(guī)模化生產(chǎn)提供技術(shù)基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 材料

本實驗所需草莓（隋珠）不定芽由璧山農(nóng)業(yè)科技創(chuàng)新中心提供。

1.2 試驗方法

1.2.1 不同植物生長素對草莓（隋珠）生根的影響取長勢相同的草莓（隋珠）不定芽接種于分別添加不同劑量（0.1mg/L,0.5mg/L,1mg/L，2mg/L）萘乙酸（NAA）,吲哚丁酸（IBA）,吲哚乙酸（IAA）的MS培養(yǎng)基中，為便于觀察每瓶接種5株，每個處理類型培養(yǎng)基接種10瓶。將接種后不定芽置于無菌培養(yǎng)室培養(yǎng)觀察，30天后統(tǒng)計生根和生長情況。培養(yǎng)基加入蔗糖30g/L，瓊脂粉7g/L，調(diào)節(jié)pH值為5.8。

1.2.2 不同天然添加物對草莓（隋珠）生根的影響取長勢相同的草莓（隋珠）不定芽接種于分別添加不同劑量（50g/L,100g/L,200g/L）香蕉，土豆和椰汁的MS培養(yǎng)基中，每瓶接種5株，每個處理類型培養(yǎng)基接種10瓶。將接種后不定芽置于無菌培養(yǎng)室培養(yǎng)觀察，30天后統(tǒng)計生根和生長情況。MS培養(yǎng)基中添加IBA 0.5mg/L，蔗糖30g/L，瓊脂粉7g/L，調(diào)節(jié)pH值為5.8。

1.2.3 活性炭對草莓（隋珠）生根的影響取長勢相同的草莓（隋珠）不定芽接種于分別添加不同劑量（0.5g/L,1g/L,2g/L,4g/L）活性炭(AC)的MS培養(yǎng)基中，每瓶接種5株，每個處理類型培養(yǎng)基接種10瓶。將接種后不定芽置于無菌培養(yǎng)室培養(yǎng)觀察，30天后統(tǒng)計生根和生長情況。MS培養(yǎng)基中添加IBA 0.5mg/L，蔗糖30g/L，瓊脂粉7g/L，調(diào)節(jié)pH值為5.8。

1.2.4 培養(yǎng)條件無菌培養(yǎng)室白天的溫度控制在20±2℃，夜間不低于15℃，相對空氣濕度控制在60%～80%，光照強度為2000Lux～3000Lux，光照時間為12h/d～14h/d，黑暗時間為10h/d～12h/d。

1.2.5 數(shù)據(jù)處理將不定芽接種于不同處理的MS培養(yǎng)基培養(yǎng)30天后，測量根長，計算生根率、平均根數(shù)、平均根長，綜合判斷其生根情況。計算公式:

生根率=(生根的不定芽數(shù)/接種的不定芽總數(shù))×100%

平均根數(shù)=總根數(shù)/生根的不定芽數(shù)

平均根長=總根長/總根數(shù)

運用Excel（2010版）對以上數(shù)據(jù)進行處理。

2 結(jié)果與討論

2.1 不同植物生長素對草莓（隋珠）生根的影響

由表1可知，IAA、NAA和IBA三種植物生長素對草莓（隋珠）不定芽的生根均有明顯的促進作用。當(dāng)培養(yǎng)基中不添加植物生長素（對照）時，在統(tǒng)計時間內(nèi)，不定芽的生根率為32%，平均根數(shù)為2.31條，平均根長為0.79cm。當(dāng)在不定芽生根培養(yǎng)基中分別添加IAA，NAA和IBA后，不定芽的生根率都表現(xiàn)為增加后降低，這說明高濃度的植物生長素會抑制不定芽的生根。當(dāng)培養(yǎng)基中添加不同濃度的IAA時，最佳濃度為1 mg/L，不定芽生根率為80%，平均根數(shù)為2.48條，平均根長為1.88cm,與對照相比，生根率增長了150%，平均根長增加了137.9%。NAA的最佳添加量同樣為1 mg/L時，不定芽生根率為76%，平均根數(shù)為2.5條，平均根長為1.61cm,與對照相比，生根率增長了137.5%，平均根長增加了103.7%。以IBA為植物生長素時，濃度僅為0.5 mg/L時，不定芽生根率達到84%，平均根數(shù)為2.45條，平均根長為1.93cm,與對照相比，生根率增長了162.5%，平均根長增加了144.3%。在三種植物生長素中，IBA對草莓不定芽的促生根效果最佳。值得注意的是，分別使用三種植物生長素后，平均根數(shù)與對照相比，并無明顯差別，這是由于在統(tǒng)計時間類，隨著不定芽生根株數(shù)的增加，而多數(shù)不定芽只長出一條根，導(dǎo)致平均根數(shù)值無明顯變化。

表1 不同植物生長素對草莓（隋珠）生根的影響

2.2 不同天然添加物對草莓（隋珠）生根的影響

由表2可知，不同天然添加物對草莓（隋珠）不定芽生根影響不同。土豆和椰汁的添加對草莓不定芽的生根有一定促進作用，最大生根率都為88%，與對照相比，生根率增加了4.7%，隨著添加量的增加，生根率的增長并不明顯。然而，香蕉對草莓（隋珠）不定芽的生根卻表現(xiàn)為抑制作用，隨著添加量的增加，抑制作用越明顯。當(dāng)香蕉添加量為200g/L時，生根率為42%，平均根長為0.92cm，與對照組（添加IBA0.5mg/L,不添加天然添加物）相比，生根率降低了50%。這可能與香蕉添加后改變了適宜草莓不定芽生根的pH值有關(guān)。土豆、香蕉和椰汁等天然添加物可以提供植物生長必須的營養(yǎng)成分或者生長因子，對大多數(shù)植物而言，天然添加物的添加對其生根具有促進作用[14，15]，而本實驗中，天然添加物對草莓不定芽的生根來說是非必須的，甚至起到反作用。

表2 不同天然添加物對草莓（隋珠）生根的影響

2.3 活性炭對草莓（隋珠）生根的影響

由表3可知，在生根培養(yǎng)基中添加活性炭，可以有效提高草莓（隋珠）不定芽的生根率，在統(tǒng)計日期內(nèi)，生根率最大可達到96%，與對照組（添加IBA0.5mg/L,不添加活性炭）相比，提高14.2%。隨著培養(yǎng)基中活性炭添加量的增加，生根率呈先增加后降低的趨勢，當(dāng)添加量為2 g/L，生根率最大。同時，活性炭的添加還能提高不定芽的生根數(shù)，在添加量為2 g/L，平均生根數(shù)也最大，為3.06條?；钚蕴吭诮M織培養(yǎng)中具有廣泛的應(yīng)用[16]，由于其具有吸附性，可有效地吸附不定芽在生根過程中產(chǎn)生的有害物質(zhì)，促進植株生長；同時，當(dāng)使用量過大，也會造成植株所需的生長元素被吸附而不利于植株生長。

表3 活性炭對草莓（隋珠）生根的影響

3 結(jié)論

通過對草莓（隋珠）不定芽生根影響因素的研究發(fā)現(xiàn)：植物生長素對不定芽生根具有重要作用，試驗中三種植物生長素（IBA，NAA，IAA）均能促進草莓不定芽的生根，IBA效果較佳。天然添加物（香蕉，土豆椰汁）對草莓不定芽的生根則表現(xiàn)出不同的作用，香蕉的使用直接抑制了草莓不定芽的生根，而土豆和椰汁對草莓（隋珠）不定芽的生根促進作用不明顯，從節(jié)約生產(chǎn)成本角度出發(fā)，不考慮在生根培養(yǎng)基中添加土豆或者椰汁。添加適量的活性炭，可以有效地促進草莓（隋珠）不定芽的生根。因此，草莓（隋珠）不定芽的生根培養(yǎng)基為MS+IBA 0.5mg/L+活性炭2g/L+蔗糖30g/L+瓊脂粉7g/L，調(diào)節(jié)pH值為5.8。