胡汝曉，王春暉，周 宇，黃民勇，胡素如，彭運(yùn)祥，王小艷

（湖南省食用菌研究所，湖南 長(zhǎng)沙 410013）

灰樹(shù)花 [Grifola frondosa(Dicks.)Gray]，又名舞茸，屬擔(dān)子菌亞門(mén)（Basidiomycotina） 層菌綱（Hymenomycetes） 多孔菌目 （Polyporales） 皺孔菌科（Meruliaceae） 樹(shù)花菌屬（Grifola），是一種珍稀食（藥）用菌[1-2]。近幾年，灰樹(shù)栽培技術(shù)研究在多層次展開(kāi)，探索性栽培[3]在食用菌欠發(fā)展省份仍然很有必要，木屑替代料栽培[4-7]可有效緩解菇木緊缺，精細(xì)化配方研究[8-9]不斷推進(jìn)優(yōu)質(zhì)高效栽培，工廠化栽培研究[10-11]是栽培研究的新起點(diǎn)，專用品種篩選[12-13]進(jìn)一步突顯優(yōu)勢(shì)栽培模式，關(guān)鍵生育期研究[14]是研究精細(xì)化的標(biāo)志，生理研究[15]是栽培創(chuàng)新的基礎(chǔ)積累。研究灰樹(shù)花出菇期菌包營(yíng)養(yǎng)對(duì)子實(shí)體生長(zhǎng)的影響，既具有較強(qiáng)的栽培實(shí)踐意義，又是栽培基礎(chǔ)生理研究，旨在為栽培創(chuàng)新提供一定的理論基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 供試菌株與培養(yǎng)基

1.1.1 供試菌株

供試菌株為灰樹(shù)花5號(hào)，湖南省食用菌研究所保藏菌株。原種作栽培種用。

1.1.2 培養(yǎng)基配方

母種采用PDA培養(yǎng)基，原種培養(yǎng)基配方：棉籽殼35%、木屑35%、麩皮14%、玉米粉14%、白糖1%、石膏粉1%，含水量60%。

生產(chǎn)配方：棉籽殼34%、木屑34%、麩皮10%、玉米粉10%、白糖1%、石膏粉1%、山表土10%，含水量60%。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 制棒

棉籽殼和木屑于制棒前1 d預(yù)濕，先將除山表土外的其他原料按配方拌勻，再加入山表土拌勻，菌棒采用15 cm×48 cm聚乙烯塑料袋，菌棒長(zhǎng)30 cm～32 cm，常壓滅菌，冷卻至30℃以下接種箱接種，每個(gè)菌棒單面接種2穴，20℃～30℃培養(yǎng)至菌絲滿棒。

1.2.2 并棒

挑選長(zhǎng)勢(shì)一致的菌棒進(jìn)行并棒出菇試驗(yàn)。對(duì)照組：?jiǎn)胃舫龉健Ｌ幚?：在每根菌棒的一側(cè)割出長(zhǎng)10 cm、寬1 cm的長(zhǎng)縫，然后將2根菌棒的割縫對(duì)準(zhǔn)并用膠帶捆綁在一起出菇。處理2：先將1根菌棒的兩側(cè)分別割出長(zhǎng)10 cm、寬1 cm的長(zhǎng)縫，然后將另外2根菌棒的一側(cè)也割出長(zhǎng)10 cm、寬1 cm的長(zhǎng)縫，再將后面2根菌棒的割縫與前一根菌棒的兩側(cè)割縫分別對(duì)準(zhǔn)并用膠帶捆綁在一起出菇。割縫及并棒操作參見(jiàn)圖1。

圖1 灰樹(shù)花菌棒處理Fig.1 Treating of artificial bed-log of Grifola frondosa

1.2.3 出菇管理

并棒當(dāng)天即進(jìn)行割口出菇管理，詳細(xì)操作參見(jiàn)專利“一種灰樹(shù)花袋栽割口覆瓦式催蕾方法”（專利號(hào)CN201110440050.8）[16]，其中對(duì)照處理在菌棒2個(gè)接種孔中間割口出菇，處理1在2個(gè)菌棒中的任意1個(gè)菌棒2個(gè)接種孔中間割口出菇，處理2在中間菌棒2個(gè)接種孔中間割口出菇。

1.2.4 取樣、模型假設(shè)與結(jié)果觀察

分別于割口當(dāng)天，割口后第8天、第16天及第24天，取割口處培養(yǎng)物測(cè)定培養(yǎng)物全氮、pH及水分含量。采收期為從割口出菇至菇蓋邊緣深色生長(zhǎng)帶消失的時(shí)間。于割口后第22天，測(cè)定幼菇直徑（d） 和高（h），假設(shè)幼菇為錐體，其體積計(jì)算公式（V體積，cm3）為：

式中：d表示幼菇直徑（cm）；h表示幼菇高（cm）。

碎菇為采菇時(shí)菇蓋小于1 cm且菇柄明顯短于正常菇柄的菇，碎菇率為每個(gè)處理隨機(jī)取5朵菇計(jì)算碎菇率再取平均值。

1.2.5 全氮、pH、水分含量測(cè)定方法及統(tǒng)計(jì)分析方法

全氮采用NY/T 53-1987測(cè)定[17]，pH采用三愛(ài)思精密試紙（pH為3.8～5.4） 直接測(cè)定，水分采用烘箱100℃烘干至恒重并計(jì)算水分含量。試驗(yàn)對(duì)照組及每個(gè)處理25個(gè)重復(fù)，每次取樣消耗1個(gè)重復(fù)，最后幼菇體積及計(jì)產(chǎn)每個(gè)處理20個(gè)重復(fù)。數(shù)據(jù)處理、繪圖及統(tǒng)計(jì)分析在IBM SPSS Statistics 19上完成。

2 結(jié)果與分析

2.1 出菇期培養(yǎng)物中全氮、pH及水分變化趨勢(shì)

出菇期不同處理培養(yǎng)物全氮變化情況見(jiàn)圖2。

圖2 出菇期不同處理培養(yǎng)物全氮變化趨勢(shì)曲線Fig.2 Variation trend curves of total nitrogen content of culture of different treatments in fruiting period

從圖2可以看出，出菇過(guò)程中，菌棒培養(yǎng)物中的全氮含量總體呈下降趨勢(shì)。其中，開(kāi)口后0～8 d下降幅度最大，這一時(shí)期為灰樹(shù)花原基形成期，說(shuō)明原基形成需要從培養(yǎng)物中吸收大量氮營(yíng)養(yǎng)；開(kāi)口后8 d～16 d菌棒培養(yǎng)物中全氮含量變化較小，其中對(duì)照組和處理2中氮含量甚至有所回升，這一時(shí)期是灰樹(shù)花原基分化期，說(shuō)明原基分化不需要從培養(yǎng)物中吸收大量氮營(yíng)養(yǎng)，而對(duì)照組和處理2的氮含量回升，可能是菌棒培養(yǎng)物氮營(yíng)養(yǎng)轉(zhuǎn)運(yùn)所致；開(kāi)口后16 d～24 d全氮含量變化在處理間出現(xiàn)較大差異，其中處理1和處理2變化較為一致，且為明顯下降趨勢(shì)，而對(duì)照組全氮含量變化不明顯，這一時(shí)期是灰樹(shù)花菇片展開(kāi)期，對(duì)照組菇體比處理1和處理2要小得多，這里出現(xiàn)了一個(gè)矛盾，即菌棒培養(yǎng)物全氮含量低的菇體反而長(zhǎng)的較大，但如果結(jié)合0～16 d全氮含量情況，也可能是對(duì)照前期氮營(yíng)養(yǎng)較低，限菌了灰樹(shù)花原基的發(fā)育，從而導(dǎo)致其子實(shí)體后期對(duì)菌包營(yíng)養(yǎng)的吸收能力較弱。出菇期不同處理培養(yǎng)物pH變化見(jiàn)圖3。

圖3 出菇期不同處理培養(yǎng)物pH變化趨勢(shì)曲線Fig.3 Variation trend curves of pH of culture of different treatments in fruiting period

從圖3可以看出，出菇過(guò)程中，菌棒培養(yǎng)物的pH整體呈下降趨勢(shì)。其中，開(kāi)口后0～8 d的對(duì)照組及2個(gè)處理均呈現(xiàn)下降趨勢(shì)，且處理1及處理2小于對(duì)照組，其中處理1下降最顯著；開(kāi)口后8 d～16 d，對(duì)照組與處理變化趨勢(shì)出現(xiàn)明顯不同，對(duì)照組仍呈明顯下降趨勢(shì)，處理1則出現(xiàn)明顯的回升，處理2則幾乎沒(méi)有變化。開(kāi)口后16 d～24 d，對(duì)照組與2個(gè)處理變化趨勢(shì)幾乎一致，最終對(duì)照組pH要明顯低于處理1和處理2，處理1與處理2相比pH則沒(méi)有明顯差異。出菇期不同處理培養(yǎng)物含水量變化情況見(jiàn)圖4。

圖4 出菇期不同處理培養(yǎng)物含水量變化趨勢(shì)曲線Fig.4 Variation trend curves of water content of culture of different treatments in fruiting period

從圖4可以看出，出菇過(guò)程中，菌棒培養(yǎng)物含水量總體變化不大，波動(dòng)范圍在初始含水量上下5%以內(nèi)。其中，開(kāi)口后0～8 d，對(duì)照組與處理1及處理2菌棒培養(yǎng)物含水量變化趨勢(shì)差異較大，對(duì)照組呈明顯的下降趨勢(shì)，處理1變化最小，處理2呈明顯的上升趨勢(shì)；開(kāi)口后8 d～16 d，對(duì)照組及2個(gè)處理均呈現(xiàn)明顯上升趨勢(shì)；開(kāi)口后16 d～24 d，對(duì)照組、處理1及處理2菌棒培養(yǎng)物含水量變化趨勢(shì)較為一致，呈明顯下降趨勢(shì)，這一時(shí)期是灰樹(shù)花菇體快速生長(zhǎng)期，菇體需要從培養(yǎng)物中吸收大量水分，培養(yǎng)物含水量下降與菇體快速生長(zhǎng)體現(xiàn)了明顯的一致性。

2.2 不同處理出菇效果

不同處理出菇效果及數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)見(jiàn)圖5和表1。

圖5 不同處理出菇效果Fig.5 Effects of fruiting of different treatments

表1 不同處理出菇結(jié)果Tab.1 Results of fruiting of different treatments

從圖5及表1可以看出，處理1和處理2與對(duì)照組相比，菇體顏色明顯較深，處理1與處理2之間差異不明顯，灰樹(shù)花子實(shí)體顏色一般在幼菇時(shí)較深，隨著菇體變老其顏色也會(huì)逐漸變淺，因此推測(cè)并棒可以延長(zhǎng)出菇期，這一點(diǎn)在出菇期也可看出。幼菇體積對(duì)照組與2個(gè)處理，及2個(gè)處理間均存在顯著差異，單菇重量對(duì)照組與2個(gè)處理，及2個(gè)處理間均達(dá)到極顯著差異，說(shuō)明并棒可以提高幼菇大小及單菇重量。

3 討論

3.1 菌包營(yíng)養(yǎng)與灰樹(shù)花子實(shí)體發(fā)育間的雙向影響性

菌包營(yíng)養(yǎng)對(duì)灰樹(shù)花子實(shí)體大小的影響研究更多集中在不同配方對(duì)子實(shí)體大小的影響，通過(guò)并棒研究了菌包大小對(duì)子實(shí)體大小的影響，或者說(shuō)營(yíng)養(yǎng)供給的穩(wěn)定性對(duì)子實(shí)體大小的影響。試驗(yàn)得到一個(gè)看似矛盾的結(jié)果，即并棒后，菇體積較大，產(chǎn)量較高，而最終培養(yǎng)物中氮含量反而較低，但結(jié)合出菇全過(guò)程看，出菇前期（開(kāi)口出菇前16 d） 并棒處理培養(yǎng)物全氮含量較高，這一時(shí)期可能是決定灰樹(shù)花子實(shí)體大小的關(guān)鍵時(shí)期，穩(wěn)定的營(yíng)養(yǎng)供給形成了健壯的原基、幼蕾乃至小菇，而健壯的小菇營(yíng)養(yǎng)吸收能力較強(qiáng)，從而導(dǎo)致最終培養(yǎng)物中全氮含量較低。這說(shuō)明菌包營(yíng)養(yǎng)與灰樹(shù)花子實(shí)體發(fā)育之間可能存在雙向影響。

3.2 菌包營(yíng)養(yǎng)供應(yīng)對(duì)灰樹(shù)花子實(shí)體品質(zhì)的影響

多蕾出菇品種如灰樹(shù)花、平菇、金針菇等有些菇蕾由于營(yíng)養(yǎng)供應(yīng)不足而不能完全發(fā)育，形成大小不等的幼蕾或小菇，栽培上稱之為碎菇。碎菇過(guò)多會(huì)嚴(yán)重影響商品菇的品相。研究發(fā)現(xiàn)并棒處理可極大程度的減少碎菇率，進(jìn)而提高商品菇品相。這一現(xiàn)象在以往不同規(guī)格菌包出菇試驗(yàn)中表現(xiàn)不明顯，這可能是并棒不僅改變了菌棒大小，還在于營(yíng)養(yǎng)供給上有一個(gè)時(shí)間差，即并棒前期只有一個(gè)菌棒為出菇提供營(yíng)養(yǎng)，而后才是2個(gè)或3個(gè)菌棒為出菇提供營(yíng)養(yǎng)，從而確保了出菇中后期的營(yíng)養(yǎng)供應(yīng)，因此確保了每個(gè)小菇蕾都有足夠的營(yíng)養(yǎng)完成發(fā)育，這為高效育菇提供了新思路。

4 結(jié)論

主要采用并棒構(gòu)建灰樹(shù)花子實(shí)體生理研究新模型，與配方試驗(yàn)相比，排除了營(yíng)養(yǎng)豐度差異的影響，結(jié)果表明營(yíng)養(yǎng)供應(yīng)穩(wěn)定性對(duì)多蕾出菇品種品質(zhì)及產(chǎn)量有明顯影響，同時(shí)灰樹(shù)花菌包營(yíng)養(yǎng)與子實(shí)體發(fā)育間的雙向影響亦得到體現(xiàn)，其深層影響機(jī)理還有待進(jìn)一步研究。