姚秋菊 常曉軻 程志芳 韓婭楠 張玉樂(lè) 王彬 劉衛(wèi)

摘 要：?jiǎn)伪扼w育種是當(dāng)前非常重要的育種技術(shù)之一。辣椒單倍體育種技術(shù)包括：花藥培養(yǎng)技術(shù)和小孢子培養(yǎng)技術(shù)。單倍體通過(guò)自然加倍和人工加倍，為新品種培育、DH群體構(gòu)建和遺傳分析、遺傳圖譜構(gòu)建提供了重要的材料。筆者論述了辣椒花藥培養(yǎng)和小孢子培養(yǎng)2種單倍體誘導(dǎo)技術(shù)的研究進(jìn)展、存在的問(wèn)題以及存在的潛在價(jià)值，旨在為辣椒育種提供參考，促進(jìn)辣椒單倍體育種技術(shù)的進(jìn)一步發(fā)展和完善。

關(guān)鍵詞：辣椒;單倍體;花藥培養(yǎng);小孢子培養(yǎng);育種

中圖分類號(hào)：S641.3 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A 文章編號(hào)：1673-2871（2021）07-001-06

Advances of the haploid induction technology in pepper

YAO Qiuju1， CHANG Xiaoke1， CHENG Zhifang1， HAN Yanan1， ZHANG Yule2， WANG Bin1， LIU Wei1

（1. Horticultural Institute Henan Academy of Agricultural Sciences， Zhengzhou 450000， Henan， China; 2. Zhengzhou Agricultural Technology Extension Center， Zhengzhou 450000， Henan， China）

Abstract： Haploid breeding is one of the most important techniques. Capsicum haploid breeding technology includes anther culture technology and microspore culture technology. By natural and artificial doubling， haploid is important for breeding， DH group building and genetic analysis， genetic map construction. The paper summarized the research progress， problems and the potential application of the induction technology of anther culture and microspore culture， aiming to provide reference for pepper breeders and promote the further development and improvement of haploid breeding technology in pepper.

Key words： Pepper; Haploid; Anther culture; Microspore culture; Breeding

單倍體育種技術(shù)已成為當(dāng)前植物生物技術(shù)領(lǐng)域令人矚目的技術(shù)之一。單倍體植株在轉(zhuǎn)基因中有很重要的作用，轉(zhuǎn)化后的植株不存在顯性和隱性問(wèn)題，能夠穩(wěn)定遺傳。單倍體培育成的雙單倍體不存在等位基因的顯隱性關(guān)系，隱性基因可以得到充分的利用。獲得單倍體有2種方式：一是自然突變，自然界自然形成的單倍體概率極低，僅有0.002%～0.02%[1];二是人工誘變，包括小孢子培養(yǎng)法和花藥離體培養(yǎng)法、未受精子房離體培養(yǎng)法、輻射花粉誘導(dǎo)法、著絲粒介導(dǎo)法等。近年來(lái)，小孢子培養(yǎng)、花藥培養(yǎng)啟動(dòng)胚胎發(fā)育的方法成為各國(guó)科學(xué)工作者的研究熱點(diǎn)。單倍體育種廣泛應(yīng)用于十字花科、玉米、小麥、林木等作物上[2-5]。獲得辣椒單倍體的途徑主要有辣椒花藥培養(yǎng)、辣椒小孢子培養(yǎng)。其中，花藥培養(yǎng)技術(shù)研究比較深入系統(tǒng)，選育了?；ㄏ盗衃6-7]、海豐系列 [8-9]、塞花一號(hào)[10]、豫07-01[11]等一系列優(yōu)異的品種，并被廣泛推廣，備受市場(chǎng)歡迎，推動(dòng)了辣椒市場(chǎng)的發(fā)展。筆者總結(jié)了辣椒單倍體育種技術(shù)在國(guó)內(nèi)外的最新研究進(jìn)展，從單倍體技術(shù)中存在的問(wèn)題、DH加倍和單倍體在辣椒中的應(yīng)用方面做了初步歸納分析，以期為研究者們提供一些參考。

1 辣椒單倍體誘導(dǎo)技術(shù)

1.1 花藥培養(yǎng)技術(shù)

辣椒花藥培養(yǎng)單倍體育種技術(shù)是1973年開(kāi)始發(fā)展起來(lái)的一種新型育種方法[12-13]，是指用花藥培養(yǎng)技術(shù)得到單倍體株系，隨后加倍獲得雙單倍體（Double Haploid，簡(jiǎn)稱DH系），直接獲得純系。辣椒花藥培養(yǎng)技術(shù)具有縮短育種時(shí)間、快速獲得純系和創(chuàng)造變異等特點(diǎn)，成為研究的熱點(diǎn)，在理論研究方面獲得了很大的進(jìn)展，同時(shí)逐步進(jìn)入實(shí)際應(yīng)用階段，配置獲得的雜交種很具優(yōu)勢(shì)，形成了一個(gè)相對(duì)完整的辣椒育種技術(shù)體系。仍有一些影響因素阻礙了辣椒花藥培養(yǎng)技術(shù)的發(fā)展，比如基因型、植株生長(zhǎng)狀態(tài)、預(yù)處理、培養(yǎng)條件、污染率等等，其中，影響最大的是基因型依賴、污染率高等問(wèn)題，使該技術(shù)的發(fā)展受到了阻礙，也限制了辣椒花藥培養(yǎng)技術(shù)的推廣應(yīng)用。

影響辣椒花藥培養(yǎng)的第一個(gè)重要因素是基因型。Ali等[14-19]研究表明，同樣的培養(yǎng)條件，不同辣椒基因型的單倍體誘導(dǎo)率差異很大。外國(guó)學(xué)者[20]對(duì)500個(gè)不同基因型辣椒材料進(jìn)行花藥培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)其單倍體誘導(dǎo)率介于0～76%之間。李怡裴等[21]研究13個(gè)加工型辣椒的花藥誘導(dǎo)，其中能夠成功誘導(dǎo)出胚狀體的基因型占供試材料的92.31%，胚狀體的誘導(dǎo)率差異比較大，在0.17%～25.31%之間。王仲慧等[22]誘導(dǎo)13個(gè)不同基因型辣椒，8個(gè)基因型能夠獲得健康的再生植株，13個(gè)基因型的出胚率差異明顯。黃亞杰等[23]發(fā)現(xiàn)大果甜椒類型極易出胚。王立浩等[24]對(duì)不同基因型優(yōu)化培養(yǎng)基配方，能夠提高胚狀體的誘導(dǎo)率?；蛐筒粌H影響辣椒花藥培養(yǎng)胚狀體的誘導(dǎo)率，而且基因型不同，誘導(dǎo)產(chǎn)生單倍體或二倍體的比例也可能會(huì)存在差異;若供體植株是經(jīng)加倍的單倍體系，則花藥培養(yǎng)時(shí)雄核誘導(dǎo)率高，但是原始育種材料為異源的情況則難以預(yù)測(cè)。

大量文獻(xiàn)表明，污染率是影響辣椒花藥培養(yǎng)成苗的另外一個(gè)重要因素。有關(guān)報(bào)道指出，辣椒花藥培養(yǎng)中污染率為50%～100%，是辣椒花藥培養(yǎng)能否成功的關(guān)鍵因素之一，因此，辣椒花藥培養(yǎng)首先需要解決組織培養(yǎng)中的污染問(wèn)題。除了人為操作不當(dāng)，培養(yǎng)材料的徹底滅菌是植物組培工作中的重要環(huán)節(jié)，它既要求將外植體表面的微生物徹底被殺死，又要求盡可能減少外植體組織和表面細(xì)胞受到傷害[25]。梁寶萍等[26]用0.1% HgCl2的消毒效果比5% NaCl的好，0.1% HgCl2滅菌10 min效果最好，花藥的存活率最高。張?zhí)煜璧萚27]先用75%酒精消毒1 min，然后用0.1% HgCl2消毒10? min，可以有效降低污染率，提高花藥存活率。張曉芬等[28]在甜椒抑菌試驗(yàn)中，用山農(nóng)一號(hào)Ⅲ的效果最好。在許多作物上的研究表明，抗生素可以有效控制作物組織培養(yǎng)過(guò)程中發(fā)生的細(xì)菌性或者真菌性污染。但是很少在辣椒花藥培養(yǎng)中應(yīng)用，抗生素的類別、使用濃度等對(duì)外植體的生長(zhǎng)發(fā)育都會(huì)產(chǎn)生不同的影響，使用濃度不合適會(huì)顯著抑制植物體的正常生長(zhǎng)發(fā)育，因此需要科技工作者深入研究抗生素在辣椒花藥培養(yǎng)中的抑菌作用。楊博智等[29]通過(guò)添加抑菌劑進(jìn)行辣椒開(kāi)放式花藥培養(yǎng)，可以簡(jiǎn)化培養(yǎng)程序、減少污染源。另一種方法是用鑷子輕輕剝?nèi)セɡ夙敳?/4的花萼，露出青綠色的花瓣時(shí)再滅菌，結(jié)果表明這樣更易殺死花蕾表面細(xì)菌和內(nèi)生菌，花藥污染率能降低至5%以下[30]。

1.2 小孢子培養(yǎng)技術(shù)

小孢子培養(yǎng)技術(shù)是一種在花藥培養(yǎng)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的高效再生技術(shù)體系，與屬于器官培養(yǎng)的花藥培養(yǎng)不同，屬于單細(xì)胞培養(yǎng)，小孢子的單倍性和單細(xì)胞特性為遺傳轉(zhuǎn)化提供了便利條件。小孢子培養(yǎng)主要是通過(guò)胚胎發(fā)生途徑發(fā)育成植株，沒(méi)有經(jīng)過(guò)愈傷組織階段，減少了因孢子體變異而引起的農(nóng)藝性狀退化，與花藥培養(yǎng)相比，顯著提高單倍體產(chǎn)生頻率。因此，國(guó)內(nèi)外都開(kāi)展了此項(xiàng)研究，并且在甘藍(lán)型油菜、馬鈴薯、大麥、水稻、玉米、小麥、亞麻等糧食和經(jīng)濟(jì)作物以及眾多蕓薹屬蔬菜上獲得成功[2-5]。但是辣椒小孢子培養(yǎng)起步較晚，目前技術(shù)體系還不健全，培養(yǎng)方法不完善，誘導(dǎo)率不高，小孢子游離后會(huì)快速地大量死亡[31-32]，需要解決的問(wèn)題有很多。亟需解決的問(wèn)題一個(gè)是優(yōu)化小孢子培養(yǎng)方法，另外一個(gè)是提高小孢子誘導(dǎo)率。

韓國(guó)研究者Kim等[33]2007年第一次成功地應(yīng)用了辣椒游離小孢子培養(yǎng)技術(shù)，獲得了較高的胚狀體發(fā)生率，最終獲得健康的再生株系。李春玲等[34]2008年采用固液結(jié)合的方法，先花藥預(yù)培養(yǎng)，再用液體培養(yǎng)基上振蕩培養(yǎng)游離小孢子的方法，成功獲得胚狀體，并成功移栽再生株系。國(guó)內(nèi)外學(xué)者[35-43]成功誘導(dǎo)辣椒小孢子胚狀體。Supena等[37]用印度尼西亞辣椒，用看護(hù)培養(yǎng)的方法，成功誘導(dǎo)出辣椒再生株系，這是第一次報(bào)道成功的案例。成妍等[44]對(duì)比了小孢子看護(hù)培養(yǎng)、機(jī)械游離培養(yǎng)、兩者相結(jié)合培養(yǎng)3種方法的效果，結(jié)果表明看護(hù)培養(yǎng)和機(jī)械游離相結(jié)合的胚胎誘導(dǎo)最好，說(shuō)明辣椒小孢子最初的脫分化對(duì)花藥壁有依賴作用，花藥壁組織在小孢子培養(yǎng)前期的作用十分重要，不僅能保持適當(dāng)?shù)臐B透壓，還能從培養(yǎng)基中獲取營(yíng)養(yǎng)，供小孢子生長(zhǎng)發(fā)育。劉凡等[45]通過(guò)培養(yǎng)辣椒游離小孢子細(xì)胞團(tuán)獲得了單倍體及雙單倍體植株。目前，主要有3種辣椒小孢子培養(yǎng)方法：第一種是自然游離法?；ㄋ幵谝后w培養(yǎng)基中經(jīng)過(guò)一段時(shí)間的培養(yǎng)，藥室自然開(kāi)裂，小孢子從花藥里散落出來(lái)，把花藥取出，制成小孢子懸浮液進(jìn)行培養(yǎng)。第二種是機(jī)械游離法。采用擠壓法使小孢子游離出來(lái)，經(jīng)過(guò)過(guò)濾，用液體培養(yǎng)基制成小孢子懸浮液。第三種是先花藥培養(yǎng)再機(jī)械游離法。將花藥接種于固體培養(yǎng)基，在33 ℃下暗培養(yǎng)7 d后，選取無(wú)污染無(wú)褐化且膨大的花藥進(jìn)行機(jī)械游離。目前，研究者使用最多的是自然游離方法，固液雙層分離，既減少了機(jī)械對(duì)小孢子的損傷，也避免了花藥培養(yǎng)過(guò)程中愈傷組織易褐化的問(wèn)題。

近幾年來(lái)，研究者[46-47]嘗試不同的方法來(lái)提高辣椒胚誘導(dǎo)率，不同預(yù)處理、不同生長(zhǎng)環(huán)境、不同培養(yǎng)溫度等都會(huì)對(duì)誘導(dǎo)率產(chǎn)生影響。王燁等[31]研究了5種預(yù)處理（低溫、高溫、無(wú)碳源、秋水仙素和甘露醇）對(duì)辣椒小孢子誘導(dǎo)率的影響，結(jié)果呈現(xiàn)出不規(guī)律態(tài)勢(shì)。小孢子培養(yǎng)中，激素是必不可少的重要成分。且經(jīng)常使用的有生長(zhǎng)素（如2，4-D、IAA、NAA等），以及細(xì)胞分裂素（如ZT、6-BA、KT等）。生長(zhǎng)素主要用來(lái)誘導(dǎo)根分化以及細(xì)胞分裂，而細(xì)胞分裂素在促使細(xì)胞分裂、胚狀體形成和愈傷組織生根生芽方面應(yīng)用較廣。Cheng Yan等[48]在研究辣椒小孢子培養(yǎng)時(shí)，添加不同量的活性炭和激素來(lái)提高小孢子胚的誘導(dǎo)率。添加適量的活性炭能夠提高小孢子胚的誘導(dǎo)率，李怡斐等[21]研究發(fā)現(xiàn)加入活性炭的加工型辣椒胚狀體誘導(dǎo)率最高可達(dá)22.92%。因?yàn)榛钚蕴磕軌蛭脚囵B(yǎng)基中、空氣中和試驗(yàn)材料中的抑制物質(zhì)，而且活性碳能吸附和清除小孢子脫分化時(shí)產(chǎn)生的有毒物質(zhì)。越來(lái)越多的研究者通過(guò)嘗試添加不同的誘導(dǎo)劑來(lái)提高胚狀體的誘導(dǎo)率，如Heidari-Zefreh等[49]用適量的腐胺和抗壞血酸來(lái)提高甜椒小孢子培養(yǎng)胚狀體的誘導(dǎo)率。因此，隨著國(guó)內(nèi)外研究的不斷深入、辣椒材料的不斷積累和更新，以及培養(yǎng)條件的不斷完善，辣椒小孢子培養(yǎng)技術(shù)正向著克服技術(shù)難關(guān)、克服不同限制因素的方向發(fā)展。

2 辣椒單倍體加倍技術(shù)

花藥培養(yǎng)和小孢子培養(yǎng)選育出來(lái)的單倍體育種材料，因含有一套染色體，因此單倍體的植株生長(zhǎng)一般比較弱小，葉片短而窄小，并且高度不育，不能直接應(yīng)用于辣椒遺傳育種，只有經(jīng)過(guò)加倍，形成正常的雙單倍體才能應(yīng)用在育種和生產(chǎn)中。目前，單倍體加倍的主要方法是自然加倍法和人工加倍法。

2.1 辣椒自然加倍法

花藥、小孢子培養(yǎng)得到的單倍體植株都具有自然加倍的現(xiàn)象，作物不同自然加倍率不盡相同，同一作物不同基因型的自然加倍率也不完全相同。辣椒自然加倍率為30%～70%[50];可以看到自然加倍不成功的單倍體株系還有相當(dāng)大一部分，為了充分利用這部分材料，找到優(yōu)良的純系，研究者采用單倍體植株葉片等外植體進(jìn)行離體培養(yǎng)，使其再次自然加倍，在小麥上已經(jīng)取得了成功[4]。

2.2 辣椒人工加倍法

自然加倍現(xiàn)象主要發(fā)生在花藥、小孢子培養(yǎng)過(guò)程中，在再生植株生長(zhǎng)階段的自然加倍概率很小，因此，運(yùn)用人工加倍方法對(duì)單倍體進(jìn)行規(guī)模加倍顯得尤為重要。人工加倍中主要應(yīng)用化學(xué)試劑誘導(dǎo)方法，目前，加倍試劑應(yīng)用最多的是秋水仙素，它會(huì)阻礙紡錘絲的形成，使減數(shù)分裂不能正常發(fā)生，使染色體停滯在分裂中期，促使染色體加倍。基于植物細(xì)胞具有全能性的原理，利用植物器官或組織作為外植體進(jìn)行離體培養(yǎng)，采用秋水仙素誘導(dǎo)染色體加倍具有加倍效果好、嵌合率低等優(yōu)越性。在離體加倍培養(yǎng)中，外植體的類型是影響加倍效果的主要因素之一，在小苗期用秋水仙素處理根尖或者莖尖，可使單倍體基因組二倍化。用秋水仙素加倍率在50%～75%，用0.04%秋水仙素處理1個(gè)月苗齡的再生植株6 d，加倍率可高達(dá)95%[51]。賴?yán)棼惖萚52]用0.25%的秋水仙素處理成株，處理12 h加倍效果最佳。秋水仙素對(duì)外植體的作用時(shí)間直接影響著再生植株的加倍效果，處理的時(shí)間越長(zhǎng)，加倍的效果就越顯著，同時(shí)秋水仙素對(duì)外植體的毒害作用也會(huì)越嚴(yán)重，比如引起外植體褐化等[53]。

因?yàn)榍锼伤囟拘源?，基因之間重組率比較低，人工誘變畸形率高，研究者嘗試了用不同的方法進(jìn)行辣椒單倍體加倍。已有報(bào)道指出甲基胺草磷、氟樂(lè)靈和炔苯酰草胺等除草劑對(duì)單倍體植株具有良好的加倍作用，同時(shí)毒性較低，長(zhǎng)時(shí)間的磺胺樂(lè)靈處理，可能會(huì)誘導(dǎo)大量的二倍體化細(xì)胞，減少嵌合體植株的出現(xiàn)[54]。

3 單倍體技術(shù)的應(yīng)用

3.1 新品種培育

采用常規(guī)育種方法獲得純合品系需要連續(xù)4～5年的自交選擇，并且不能實(shí)現(xiàn)所有性狀的絕對(duì)的純合，而雙單倍體技術(shù)只需1～2代即可獲得遺傳上100%的純合品系，而且加倍單倍體的隱性基因不會(huì)受顯性基因遮蓋而能夠正常表達(dá)，可以顯著提高基因型選擇效率和選擇的準(zhǔn)確性，有利于多基因重組和隱性基因的選擇。辣椒單倍體技術(shù)能夠分離獲得一些具有特殊性狀的育種材料，并通過(guò)加倍處理快速獲取純合的育種材料，是一種快速、經(jīng)濟(jì)、有效的育種手段。自1973年王玉英等[12]和George等[13]報(bào)道獲得辣椒單倍體植株開(kāi)始，隨著單倍體技術(shù)和染色體加倍方法的不斷完善，國(guó)內(nèi)外研究者陸續(xù)培育成功一批辣椒品種。北京市海淀區(qū)組培技術(shù)實(shí)驗(yàn)室1979年獲得辣椒單倍體幼苗，自此開(kāi)始了單倍體在辣椒育種中的研究應(yīng)用，相繼培育出了?；ㄏ盗小⒑ＸS系列[6]品種。匈牙利對(duì)辣椒單倍體的研究比較深入，相繼獲得了Sláger、Délibáb、Bolero等品種[55-57]。用花藥或者小孢子培養(yǎng)出的雙單倍體作為雙親或者是親本之一的雜交種，更加穩(wěn)定和純合[58]。

3.2 DH群體構(gòu)建和遺傳分析

DH群體與分子標(biāo)記輔助選擇（molecular assisted selection， MAS）相結(jié)合定向選擇目標(biāo)植株，減少了田間工作和世代年數(shù)。李怡斐等[21]通過(guò)花藥培養(yǎng)與MAS相結(jié)合，培育了抗疫病加工型辣椒品種，快速創(chuàng)制特異育種新種質(zhì)，加速了育種進(jìn)程。張樹(shù)根等[59]研究103個(gè)雙單倍體（DH）系的DH群體的果實(shí)性狀的遺傳規(guī)律，其群體由花藥培養(yǎng)技術(shù)得來(lái)。因?yàn)榇巳后w的每一個(gè)品系都是完全同質(zhì)純合的，所含信息量小，無(wú)遺傳變異，遺傳信息可以繼代保留，是數(shù)量性狀位點(diǎn)分析的良好群體。于進(jìn)步[60]利用8個(gè)辣椒DH系分析主要性狀的配合力和遺傳力，顯示了更強(qiáng)的說(shuō)服力。

3.3 遺傳圖譜構(gòu)建

辣椒雙單倍體群體是完全純合的，遺傳性質(zhì)穩(wěn)定，遺傳背景一致，是遺傳作圖的理想材料。利用遺傳圖譜對(duì)控制目標(biāo)性狀的基因進(jìn)行定位、連鎖分析以及克隆是開(kāi)展分子標(biāo)記輔助選擇育種、驗(yàn)證基因功能及其作用機(jī)制的基礎(chǔ)。Lefebvre等[61]用來(lái)自于種內(nèi)雜種F1代的3個(gè)DH群體，用RAPD和RFLP標(biāo)記技術(shù)，構(gòu)建了一張14個(gè)連鎖群的遺傳圖譜。從1995年法國(guó)研究者Lefebvre等[62]構(gòu)建并使用DH的第一張遺傳圖譜開(kāi)始，至2016年已有12張使用DH群體構(gòu)建的圖譜，占辣椒遺傳圖譜總數(shù)的22%。DH群體遺傳作圖已成功應(yīng)用于多種重要作物，例如小麥、油菜、大麥和水稻等[63]。DH群體已被廣泛用于QTL作圖，例如大麥抗赤霉病，水稻砷富集、產(chǎn)量相關(guān)性狀、株高和蒸煮品質(zhì)，以及小麥株高、抽穗期、面粉顏色、磷利用效率、缺鋅和抗黑穗病等QTL的研究[64]。尤其在水稻育種中，DH系群體已用于產(chǎn)量、品質(zhì)等農(nóng)藝性狀的QTL定位。

4 展 望

近年來(lái)，辣椒單倍體育種技術(shù)研究有了一定的進(jìn)展，但仍然不能完全滿足辣椒育種工作者的需求。辣椒單倍體培養(yǎng)技術(shù)中存在的基因型依賴性強(qiáng)、污染嚴(yán)重、培養(yǎng)方法不夠優(yōu)化、胚狀體誘導(dǎo)率低等問(wèn)題，導(dǎo)致該技術(shù)應(yīng)用不是十分廣泛和深入。

目前，辣椒單倍體育種技術(shù)還不夠完善，科學(xué)工作者應(yīng)當(dāng)深入研究胚狀體的調(diào)控機(jī)制，以最終達(dá)到人為調(diào)控單倍體培養(yǎng)的目的，可以與遺傳學(xué)方法、分子生物學(xué)方法等有機(jī)結(jié)合。小孢子胚胎發(fā)生是由多種信號(hào)通路所介導(dǎo)的，并且這些信號(hào)通路之間存在著交叉互作，或者是不同的脅迫信號(hào)導(dǎo)致了相同的下游反應(yīng)。因此，相關(guān)研究應(yīng)整合基因組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)和代謝組學(xué)，從系統(tǒng)生物學(xué)角度揭示不同信號(hào)級(jí)聯(lián)的相互關(guān)系，才能最終弄清小孢子胚胎發(fā)生的機(jī)制。目前掌握了一些有關(guān)小孢子胚胎誘導(dǎo)和胚胎形成的細(xì)胞學(xué)及分子學(xué)信息[65-66]，但從配子體到胚胎形成途徑的機(jī)制仍不明確，仍需深入研究花粉發(fā)育過(guò)程，研究小孢子發(fā)育機(jī)制，以實(shí)現(xiàn)對(duì)小孢子發(fā)育的主動(dòng)調(diào)控。

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