廖鵬娟

（惠州市中心人民醫(yī)院 病理科，廣東 惠州 516001）

0 引言

甲狀腺乳頭狀癌（Papillary Thyroid Cancer，PTC）是臨床上較為常見(jiàn)的一種惡性程度較低的甲狀腺癌，以頸部無(wú)痛性腫塊為主要臨床表現(xiàn)，好發(fā)于兒童及40歲以下的女性，其發(fā)生發(fā)展多受激素、遺傳、環(huán)境等因素的影響[1]。該疾病具有惡性程度低、生長(zhǎng)緩慢以及預(yù)后良好的特點(diǎn)，因此合理有效的診斷于患者意義重大。病理活檢為診斷該疾病的金標(biāo)準(zhǔn)，但其創(chuàng)傷較大故不宜作為首選。超聲引導(dǎo)下細(xì)針穿刺細(xì)胞學(xué)檢查（Fine-Needle Aspiration，F(xiàn)NA）是一種近乎無(wú)創(chuàng)的檢查方式，成為現(xiàn)階段臨床診斷該疾病的主要模式，即便如此仍會(huì)有漏診、誤診的發(fā)生[2]。BRAFV600E基因突變檢測(cè)是一類(lèi)較為新穎的檢測(cè)途徑，但此檢查方式在PTC的診斷中仍需進(jìn)一步進(jìn)行探討[3]。本研究旨在探討FNA及BRAFV600E基因突變檢測(cè)PTC的價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料。經(jīng)患者及家屬同意并簽署知情同意書(shū)，選取惠州市中心人民醫(yī)院2019年10月至2020年12月200例疑似甲狀腺乳頭狀癌患者，所有患者均接受超聲引導(dǎo)下FNA和BRAFV600E基因突變檢測(cè)。男98例，女102例；年齡26～70歲，平均（42.36±13.71）歲；結(jié)節(jié)大小0.8～2.5 cm，平均（1.65±0.21）cm。納入標(biāo)準(zhǔn)：均可行超聲引導(dǎo)下FNA、BRAFV600E檢測(cè)者；初發(fā)甲狀腺結(jié)節(jié)。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并精神類(lèi)疾病，不予配合者；言語(yǔ)表達(dá)不清者；甲狀腺相關(guān)檢查指標(biāo)異常者；資料不全，且無(wú)法確認(rèn)者等。本研究已由院內(nèi)醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審核通過(guò)。

1.2 方法

1.2.1 超聲引導(dǎo)下FNA檢測(cè)：運(yùn)用超聲診斷儀（PHILIPS Sparq），探頭為L(zhǎng)5-12 MHz。穿刺前檢查是否存在穿刺禁忌證，置患者于仰臥位，充分暴露頸前區(qū)，彩色多普勒超聲掃描甲狀腺區(qū)域選定擬穿刺部位，以23 G×50 mm針尖穿刺可疑結(jié)節(jié)內(nèi)，重復(fù)提插穿刺10～15次，取得樣本后并將所得樣本送病理科進(jìn)行細(xì)胞學(xué)檢查。

1.2.2 BRAFV600E基因突變檢測(cè)：試劑盒（廈門(mén)艾德生物醫(yī)藥，國(guó)械注準(zhǔn)20143401824，規(guī)格：24測(cè)試/盒）。首先將凍存于于-20℃中的標(biāo)本取出，解凍并離心，將細(xì)胞標(biāo)本溶入GA緩沖液，加入蛋白酶混勻，于70℃環(huán)境下靜置10 min，加入無(wú)水乙醇充分混勻，離心去除水珠，將溶液加入吸附柱，離心后加入GD緩沖液，再加入Pw漂洗液，離心倒掉廢液后加入TE緩沖液洗脫，靜置約5 min后離心收集溶液；擴(kuò)增序列獲得突變信號(hào)或內(nèi)控信號(hào)Ct值，判斷是否存在基因突變，Ct值＜30為突變陽(yáng)性，Ct值≥30為無(wú)突變）。

1.3 觀察指標(biāo)和評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)。以手術(shù)病理結(jié)果作為診斷的金標(biāo)準(zhǔn)，分析超聲引導(dǎo)下FNA、BRAFV600E檢測(cè)單獨(dú)與聯(lián)合診斷對(duì)PTC的診斷價(jià)值，

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。數(shù)據(jù)錄入SPSS 22.0軟件中分析，計(jì)數(shù)資料用[n（%）]表示，采用配對(duì)χ2檢驗(yàn)，計(jì)量資料用（）表示，采用配對(duì)t檢驗(yàn)，P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同檢查方式的診斷結(jié)果。超聲引導(dǎo)下FNA顯示陽(yáng)性和陰性分別為156和44例；BRAFV600E檢測(cè)顯示陽(yáng)性和陰性分別為158和42例；兩種方式聯(lián)合檢測(cè)陽(yáng)性和陰性分別為181和19例，見(jiàn)表1。

表1 不同檢查方式的診斷結(jié)果比較

2.2 不同檢查方式的診斷效能。超聲引導(dǎo)下FNA檢測(cè)和BRAFV600E基因檢測(cè)單獨(dú)檢測(cè)靈敏度、特異度、準(zhǔn)確率均較聯(lián)合檢測(cè)低（P＜0.05），見(jiàn)表2。

表2 不同檢查方式的診斷效能對(duì)比[n（%）]

3 討論

PTC屬于惡性腫瘤的一種，其生長(zhǎng)較為緩慢，且大多數(shù)預(yù)后良好，病灶可經(jīng)腺內(nèi)淋巴管自原發(fā)部位擴(kuò)散至腺體的其他部位和頸部淋巴結(jié)，且近年來(lái)發(fā)病率呈現(xiàn)逐年增加的趨勢(shì)[4]。超聲引導(dǎo)下FNA是以往臨床上常用的檢查方式，其在診斷甲狀腺結(jié)節(jié)方面較為可靠，但仍然存在40%的誤診率，對(duì)后期治療造成不良影響[5]。

BRAFV600E突變檢測(cè)與腫瘤的不良臨床及病理表現(xiàn)關(guān)系密切，且BRAFV600E突變僅存在于甲狀腺惡性結(jié)節(jié)中，而良性結(jié)節(jié)中并未發(fā)現(xiàn)該基因的存在，同時(shí)該基因的突變可導(dǎo)致氨基酸結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，活化蛋白激酶信號(hào)通路，促使細(xì)胞發(fā)生異常性分化與增殖[6-7]。

以手術(shù)病理結(jié)果檢查為金標(biāo)準(zhǔn)，靈敏度、特異度、準(zhǔn)確率可以檢測(cè)該檢查方式的診斷價(jià)值及可靠的理論依據(jù)。本研究結(jié)果顯示超聲引導(dǎo)下FNA顯示陽(yáng)性和陰性分別為156和44例，BRAFV600E檢測(cè)顯示陽(yáng)性和陰性分別為158和42例，兩種方式聯(lián)合檢測(cè)陽(yáng)性和陰性分別為181和19例；超聲引導(dǎo)下FNA檢測(cè)和BRAFV600E基因檢測(cè)單獨(dú)檢測(cè)靈敏度、特異度、準(zhǔn)確率均較聯(lián)合檢測(cè)低（P＜0.05），這提示FNA及BRAFV600E基因突變檢測(cè)均可檢測(cè)PTC且聯(lián)合檢測(cè)對(duì)PTC的診斷價(jià)值更高，進(jìn)而可降低漏診率與誤診率，為后續(xù)的治療提供了可靠的影像學(xué)及分子學(xué)依據(jù)。分析其原因可能與FNA及BRAFV600E基因突變檢測(cè)具有操作簡(jiǎn)便、降低手術(shù)傷害等優(yōu)勢(shì)，且BRAFV600E檢測(cè)可有效鑒別甲狀腺疾病類(lèi)型，同時(shí)還利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR法擴(kuò)增序列，獲得突變信號(hào)，提高了檢出的靈敏度和特異度，進(jìn)而提高了準(zhǔn)確率[8]。

綜上所述，超聲引導(dǎo)下FNA和BRAFV600E基因突變檢測(cè)均可檢出PTC，但聯(lián)合檢測(cè)診斷價(jià)值更高。