和 嵐，劉 青，譚雅楠

（1北京大學(xué)第三醫(yī)院海淀院區(qū)兒科 北京 100080）

（2北京大學(xué)第三醫(yī)院海淀院區(qū)檢驗(yàn)科 北京 100080）

傳染性單核細(xì)胞增多癥(IM)是一種由EB病毒感染引起的急性或亞急性全身性疾病，其臨床癥狀復(fù)雜多樣，包括發(fā)熱、咽峽炎、頸部淋巴結(jié)腫大、肝脾腫大等[1]。IM在小兒與青少年中好發(fā)，主要傳播途徑為經(jīng)口密切接觸，比如共用餐具、親吻等，且該病早期臨床癥狀不典型，早期鑒別診斷較為困難，易造成誤診[2]。孫洪運(yùn)[3]認(rèn)為，IM發(fā)病機(jī)制、人體細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)及細(xì)胞免疫應(yīng)答之間存在密切相關(guān)性，若免疫功能紊亂、潛伏感染反復(fù)激活，IM患兒的相關(guān)癥狀可能持續(xù)存在，且呈反復(fù)發(fā)作。因此，本研究通過(guò)檢測(cè)IM患兒急性期細(xì)胞免疫變化情況，分析EB病毒-DNA載量與T淋巴細(xì)胞亞群間的相關(guān)性；對(duì)IM患兒實(shí)施更昔洛韋聯(lián)合還原型谷胱甘肽治療，觀察期對(duì)T淋巴細(xì)胞亞群的變化，為臨床治療提供參考方案。

1.資料與方法

1.1 一般資料

選取2017年1月—2019年12月本院收治的80例傳染性單核細(xì)胞增多癥患兒(IM)為觀察組，均符合《諸福棠實(shí)用兒科學(xué)》[4]中關(guān)于傳染性單核細(xì)胞增多癥的診斷標(biāo)準(zhǔn)，其中男48例，女32例；年齡1.5～12歲，平均(4.95±1.32)歲；3歲 以 下21例(26.25%)，3～6歲27例(33.75%)，6歲 以 上32例(40.00%)；病 程5～15d，平均(7.26±2.13)d；首診發(fā)熱62例。另選取同期住院其他疾病兒童80例為對(duì)照組，男50例，女30例；年齡0.4～12歲，平均(5.02±1.41)歲；年齡分布：3歲 以 下23例(28.75%)，3～6歲26例(32.50%)，6歲以上31例(38.75%)。兩組一般資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 治療方法：觀察組患兒給予更昔洛韋靜脈滴注，5 mg/(kg·次)，2次/d；還原型谷胱甘肽靜脈滴注，30 mg/(kg·次)，1次/d。連續(xù)治療7～14 d后比較臨床療效。

1.2.2 EB病毒-DNA載量檢測(cè)：采集患兒空腹外周靜脈血2 mL，以EDTA抗凝，采用熒光定量PCR檢測(cè)EB病毒-DNA載量，試劑盒購(gòu)自上海之江生物科技有限公司，所有操作均嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行，以EB病毒-DNA載量≥5×102copies/μL為陽(yáng)性。

1.2.3 T淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)：采集IM患兒治療前后及同期住院其他疾病兒童治療前空腹外周靜脈血2 mL，以EDTA抗凝，采用流式細(xì)胞儀對(duì)T淋巴細(xì)胞亞群進(jìn)行檢測(cè)，包括CD3+、CD4+、CD8+，計(jì)算CD4+/CD8+比值。所用試劑含有FITC標(biāo)記的CD3，克隆SK7；PE標(biāo)記的CD8，克隆SK1；PerCP標(biāo)記的CD45，克隆2D1；APC標(biāo)記的CD4，克隆SK3，購(gòu)自于美國(guó)碧迪醫(yī)療器械有限公司。

1.3 臨床療效評(píng)價(jià)

顯效：患者治療3 d內(nèi)體溫恢復(fù)正常，其臨床癥狀及體征均得到緩解；有效：患者治療3～5 d體溫恢復(fù)正常，其他臨床癥狀及體征均緩解；無(wú)效：患者治療5 d后體溫仍超過(guò)37.5 ℃，其他臨床癥狀及體征無(wú)改善甚至加重[5]。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。正態(tài)分布的計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，組間比較采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料用頻數(shù)和百分比（%）表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.結(jié)果

2.1 兩組T淋巴細(xì)胞亞群水平比較

觀察組(急性期IM患兒)CD3+、CD8+顯著高于對(duì)照組(P＜0.05)，CD4+、CD4+/CD8+比值均高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，見(jiàn)表1。

表1 兩組T淋巴細(xì)胞亞群水平比較(±s，%)

表1 兩組T淋巴細(xì)胞亞群水平比較(±s，%)

注：與對(duì)照組比較，aP＜0.05。

組別 CD3+ CD4+ CD8+ CD4+/ CD8+比值觀察組81.36±5.48a 17.68±8.95a 60.84±12.89a 0.29±0.16a對(duì)照組65.78±6.05 32.64±6.72 23.26±4.89 1.40±0.51 t 8.746 -6.125 12.492 -9.517 P 0.000 0.000 0.000 0.000

2.2 觀察組急性期EB病毒-DNA載量與T淋巴細(xì)胞亞群之間的相關(guān)性分析

觀察組急性期EB病毒-NDA載量為(6.85±0.85)×102copies/μL，與CD3+、CD8+T細(xì)胞均呈正相關(guān)(P＜0.05)，與CD4+、CD4+/CD8+比值均呈負(fù)相關(guān)(P＜0.05)，見(jiàn)表2。

表2 觀察組急性期EB病毒-DNA載量與T淋巴細(xì)胞亞群之間的相關(guān)性分析（±s）

表2 觀察組急性期EB病毒-DNA載量與T淋巴細(xì)胞亞群之間的相關(guān)性分析（±s）

項(xiàng)目 CD3+ CD4+ CD8+ CD4+/ CD8+比值觀察組81.36±5.48 17.68±8.95 60.84±12.89 0.29±0.16 r 0.296 -0.408 0.175 -0.459 P 0.037 0.001 0.028 0.003

2.3 觀察組治療前后T淋巴細(xì)胞亞群水平變化及臨床療效T淋巴細(xì)胞亞群

治療后觀察組CD3+、CD8+低于治療前(P＜0.05)，CD4+、CD4+/CD8+比值均較顯著升高(P＜0.05)，見(jiàn)表3；臨床療效：急性期IM患兒采用更昔洛韋聯(lián)合還原型谷胱甘肽治療后，顯效43例(53.75%)，有效31例(38.75%)，無(wú)效6例(7.50%)，總有效率為92.50%。

表3 觀察組治療前后T淋巴細(xì)胞亞群水平變化比較(±s，%)

表3 觀察組治療前后T淋巴細(xì)胞亞群水平變化比較(±s，%)

注：與對(duì)照組比較，bP＜0.05。

時(shí)間 CD3+ CD4+ CD8+ CD4+/ CD8+比值治療前81.36±5.48 17.68±8.95 60.84±12.89 0.29±0.16治療后68.97±6.29b 28.83±6.54b 29.95±5.06b 0.96±0.34b t 12.547 -11.574 17.769 -14.897 P 0.000 0.000 0.000 0.000

3.討論

EB病毒是一種嗜淋巴細(xì)胞的DNA病毒，主要通過(guò)唾液接觸傳播，感染初期，病毒大量復(fù)制，促使一些細(xì)胞炎癥因子的產(chǎn)生，導(dǎo)致病毒傳播。有研究[6-7]就IM的各種臨床癥狀發(fā)生機(jī)制進(jìn)行探討，認(rèn)為EB病毒侵入人體后可激活T淋巴細(xì)胞，產(chǎn)生強(qiáng)烈的免疫應(yīng)答反應(yīng)，導(dǎo)致機(jī)體免疫功能紊亂引起。T淋巴細(xì)胞亞群較多，其中CD3+是所有T細(xì)胞的表面標(biāo)志；CD4+是輔助性T細(xì)胞的表面標(biāo)志，具有輔助細(xì)胞免疫與體液免疫的作用；CD8+則屬于細(xì)胞毒性T細(xì)胞表面標(biāo)志；CD4+/CD8+比值是重要的免疫狀態(tài)的監(jiān)測(cè)指標(biāo)，其比例的降低與免疫系統(tǒng)損傷的程度相關(guān)[8]。本研究中，與對(duì)照組比較，觀察組(急性期IM患兒)CD3+、CD8+高于對(duì)照組(P＜0.05)，CD4+、CD4+/CD8+比值均較對(duì)照組顯著下降(P＜0.05)，提示急性期IM患兒免疫功能下降。此結(jié)果與許多相關(guān)研究相一致[9]。

熒光定量PCR檢測(cè)EB病毒-DNA載量是近年來(lái)發(fā)展的新技術(shù)，可定量反映體內(nèi)EB病毒-DNA水平，并準(zhǔn)確反映EB病毒感染和復(fù)制情況，且EB病毒-DNA載量與IM臨床表現(xiàn)的嚴(yán)重程度呈正相關(guān)[10]。本研究結(jié)果顯示，觀察組急性期EB病毒-NDA載量與CD3+、CD8+T細(xì)胞均呈正相關(guān)(P＜0.05)，與CD4+、CD4+/CD8+比值均呈負(fù)相關(guān)(P＜0.05)。因此，EB病毒-DNA載量濃度越高，多系統(tǒng)損害越嚴(yán)重，從而得出患兒的免疫功能越差。為改善IM患兒免疫功能，本文采用更昔洛韋聯(lián)合還原型谷胱甘肽進(jìn)行治療，結(jié)果：IM患兒免疫功能顯著改善(P＜0.05)，總有效率為92.50%。分析原因?yàn)閇11-12]：更昔洛韋可通過(guò)抑制多聚酶的活性來(lái)阻斷病毒復(fù)制和轉(zhuǎn)錄過(guò)程，其是抗病毒藥物中病毒抑制作用活性最強(qiáng)的；還原型谷胱甘肽是肝內(nèi)主要抗氧化物，通過(guò)與自由基、過(guò)氧化物結(jié)合發(fā)揮抗氧化作用，對(duì)多種原因引起的肝損傷均有很好的治療作用。兩藥聯(lián)合應(yīng)用既保證IM患兒的治療有效性，又保證用藥的安全性。

綜上所述，IM患兒急性期存在細(xì)胞免疫及免疫功能紊亂，其免疫功能紊亂程度與EB病毒-DNA載量密切相關(guān)，為更好的治療IM患兒，采用更昔洛韋聯(lián)合還原型谷胱甘肽可促進(jìn)IM患兒機(jī)體免疫功能的恢復(fù)，加快患兒的康復(fù)。