王樹艷，沈前程

（1.廣西農(nóng)業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院，廣西 南寧 530007；2.廣西金陵農(nóng)牧集團(tuán)有限公司，廣西 南寧 530049）

蒲公英作為傳統(tǒng)的中藥，又名婆婆丁，可全草藥入味苦，性寒，具有清熱解毒、健胃消炎、消腫的功效，臨床上主要用于治療咽痛、疔瘡腫毒、濕熱黃疸和熱淋澀痛等癥狀。廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)臨床。蒲公英有效成分主要有黃酮類、酚酸類、萜類、甾醇類、多糖，具有抗癌、抗氧化、抗菌、消炎、解毒及免疫促進(jìn)作用。目前蒲公英提取物在動物上的應(yīng)用顯示其具有體外抑制細(xì)菌和免疫作用，但未見通過飲水中添加蒲公英提取物對三黃雞的免疫效果等方面的研究。本文通過在飲水中添加蒲公英提取物觀察其對三黃雞的免疫作用研究，為臨床蒲公英在畜禽業(yè)應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 試驗(yàn)方法

1.1 主要試劑

蒲公英購自河北蓮花池藥業(yè)有限公司，健康1日齡三黃雞購自廣西金陵農(nóng)牧集團(tuán)有限公司。重組禽流感病毒（H5+H7）三價滅活疫苗（H5N1 Re-11株+Re-12株，H7N9 H7-Re2株，購自青島易邦生物工程有限公司。

1.2 試驗(yàn)分組

蒲公英提取物，本實(shí)驗(yàn)室經(jīng)過水煮法加工處理后分別將其制成含量20%、10%、5%含量。試驗(yàn)選取168只健康1日齡三黃雞，隨機(jī)分為1～4組，每組3個重復(fù)，每個重復(fù)14只。飼養(yǎng)至15日齡時，在飲水中添加不同濃度的蒲公英提取物，其中1組20%，2組10%，3組5%，4組正常飲水，并進(jìn)行首次免疫禽流感疫苗，于免疫后的30d、50d采血進(jìn)行抗體檢測和解剖分離胸腺、脾臟、法氏囊，用天平稱重，計算其免疫器官指數(shù)。

1.3 試驗(yàn)指標(biāo)的測定

剔除脾、胸腺、法氏囊周圍脂肪，用濾紙輕輕吸干血水迅速稱其鮮重。免疫器官指數(shù)(g/kg)=器官濕重(g)/胴體重(kg)，抗體測定：采用血凝和血凝 抑制試驗(yàn)（HA-HI）檢測新城疫抗體效價。

1.4 數(shù)據(jù)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用spss 20.0軟件進(jìn)行組間單因素方差分析，數(shù)據(jù)用平均值±標(biāo) 準(zhǔn)差（mean±SD）表示，以P＜0.05為差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 飲水中添加蒲公英提取物對三黃雞免疫器官指數(shù)的影響

由表1可知：免疫30d后，胸腺指數(shù)、法氏囊指數(shù)和脾臟指數(shù)，試驗(yàn)3組與對照組比較均差異不顯著（P＞0.05），胸腺指數(shù)試驗(yàn)組均略高于對照組，法氏囊指數(shù)和脾臟指數(shù)低于對照組。免疫50d后，胸腺指數(shù)1組、2組與對照組比較差異顯著（P＜0.05），法氏囊指數(shù)和胸腺指數(shù)：試驗(yàn)組與對照組比較均差異不顯著，且法氏囊指數(shù)高于對照組。

表1 蒲公英提取物對三黃雞免疫器官指數(shù)的影響

2.2 飲水中添加蒲公英提取物對抗體水平的影響

蒲公英提取物對三黃雞禽流感抗體水平的影響詳見表2，由表中可見：免疫后30d，試驗(yàn)組均比對照組抗體水平高，差異顯著(p<0.05)，抗體水平提高1個滴度以上。且試驗(yàn)1組與2組差異顯著p<0.05。免疫后50d，試驗(yàn)組與對照組比較，差異不顯著(p>0.05)。

表2 蒲公英提取物對禽流感抗體水平影響

3 討論與結(jié)論

3.1 飲水中添加蒲公英提取物對三黃雞免疫器官指數(shù)的影響

免疫器官的發(fā)育會影響動物機(jī)體的免疫能力，有研究顯示：健康的動物，隨著其生長發(fā)育，免疫器官指數(shù)提高，其免疫能力也會提高。本試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，飲用蒲公英提取物對胸腺發(fā)育有一定的促進(jìn)作用，在免疫后30d，試驗(yàn)組均高于對照組，免疫后50d，飲用20%，10%的蒲公英提取物具有顯著促進(jìn)胸腺的發(fā)育作用，這與李玉杰等在研究蒲公英水提物對烏骨雞的免疫力的結(jié)果相一致。雖飲用蒲公英提取物對法氏囊和脾臟促影響不明顯，但從數(shù)據(jù)上來看，隨著飲用日齡的增加，具有一定的促進(jìn)優(yōu)勢存在。

3.2 飲水中添加蒲公英提取物對抗體水平的影響

動物注射疫苗后，能在機(jī)體產(chǎn)生體液免疫應(yīng)答，進(jìn)而產(chǎn)生抗體，抗體水平的高低與動物免疫能力和抗病能力相關(guān)，抗體的效價越高，動物的抗病力越強(qiáng)，蒲公英水提物中含有多糖成份，而多糖具有增強(qiáng)機(jī)體免疫能力，從而提高機(jī)體抗病力的作用。本試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)：在飲水添加蒲公英提取物能夠明顯提高禽流感抗體水平，尤其是免疫后30d時，試驗(yàn)組3抗體效價可提高1個滴度，這說明蒲公英提取物利于三黃雞的免疫功能，提高其抗體水平，但隨著免疫日齡的增長，抗體水平呈現(xiàn)先增高后減低的趨勢。

飲水中添加蒲公英提取物，可以促進(jìn)三黃雞的免疫功能發(fā)育，提高其禽流感抗體水平，最佳效果可提高1個滴度，對于肉雞臨床的三黃雞雞群免疫等具有一定的應(yīng)用前景。