王樹艷，沈前程

（1.廣西農(nóng)業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院，廣西 南寧 530007；2.廣西金陵農(nóng)牧集團(tuán)有限公司，廣西 南寧 530049）

蒲公英作為傳統(tǒng)的中藥，又名婆婆丁，可全草藥入味苦，性寒，具有清熱解毒、健胃消炎、消腫的功效，臨床上主要用于治療咽痛、疔瘡腫毒、濕熱黃疸和熱淋澀痛等癥狀。廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)臨床。蒲公英有效成分主要有黃酮類、酚酸類、萜類、甾醇類、多糖，具有抗癌、抗氧化、抗菌、消炎、解毒及免疫促進(jìn)作用。目前蒲公英提取物在動(dòng)物上的應(yīng)用顯示其具有體外抑制細(xì)菌和免疫作用，但未見通過飲水中添加蒲公英提取物對(duì)三黃雞的免疫效果等方面的研究。本文通過在飲水中添加蒲公英提取物觀察其對(duì)三黃雞的免疫作用研究，為臨床蒲公英在畜禽業(yè)應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 試驗(yàn)方法

1.1 主要試劑

蒲公英購(gòu)自河北蓮花池藥業(yè)有限公司，健康1日齡三黃雞購(gòu)自廣西金陵農(nóng)牧集團(tuán)有限公司。重組禽流感病毒（H5+H7）三價(jià)滅活疫苗（H5N1 Re-11株+Re-12株，H7N9 H7-Re2株，購(gòu)自青島易邦生物工程有限公司。

1.2 試驗(yàn)分組

蒲公英提取物，本實(shí)驗(yàn)室經(jīng)過水煮法加工處理后分別將其制成含量20%、10%、5%含量。試驗(yàn)選取168只健康1日齡三黃雞，隨機(jī)分為1～4組，每組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)14只。飼養(yǎng)至15日齡時(shí)，在飲水中添加不同濃度的蒲公英提取物，其中1組20%，2組10%，3組5%，4組正常飲水，并進(jìn)行首次免疫禽流感疫苗，于免疫后的30d、50d采血進(jìn)行抗體檢測(cè)和解剖分離胸腺、脾臟、法氏囊，用天平稱重，計(jì)算其免疫器官指數(shù)。

1.3 試驗(yàn)指標(biāo)的測(cè)定

剔除脾、胸腺、法氏囊周圍脂肪，用濾紙輕輕吸干血水迅速稱其鮮重。免疫器官指數(shù)(g/kg)=器官濕重(g)/胴體重(kg)，抗體測(cè)定：采用血凝和血凝 抑制試驗(yàn)（HA-HI）檢測(cè)新城疫抗體效價(jià)。

1.4 數(shù)據(jù)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用spss 20.0軟件進(jìn)行組間單因素方差分析，數(shù)據(jù)用平均值±標(biāo) 準(zhǔn)差（mean±SD）表示，以P＜0.05為差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 飲水中添加蒲公英提取物對(duì)三黃雞免疫器官指數(shù)的影響

由表1可知：免疫30d后，胸腺指數(shù)、法氏囊指數(shù)和脾臟指數(shù)，試驗(yàn)3組與對(duì)照組比較均差異不顯著（P＞0.05），胸腺指數(shù)試驗(yàn)組均略高于對(duì)照組，法氏囊指數(shù)和脾臟指數(shù)低于對(duì)照組。免疫50d后，胸腺指數(shù)1組、2組與對(duì)照組比較差異顯著（P＜0.05），法氏囊指數(shù)和胸腺指數(shù)：試驗(yàn)組與對(duì)照組比較均差異不顯著，且法氏囊指數(shù)高于對(duì)照組。

表1 蒲公英提取物對(duì)三黃雞免疫器官指數(shù)的影響

2.2 飲水中添加蒲公英提取物對(duì)抗體水平的影響

蒲公英提取物對(duì)三黃雞禽流感抗體水平的影響詳見表2，由表中可見：免疫后30d，試驗(yàn)組均比對(duì)照組抗體水平高，差異顯著(p<0.05)，抗體水平提高1個(gè)滴度以上。且試驗(yàn)1組與2組差異顯著p<0.05。免疫后50d，試驗(yàn)組與對(duì)照組比較，差異不顯著(p>0.05)。

表2 蒲公英提取物對(duì)禽流感抗體水平影響

3 討論與結(jié)論

3.1 飲水中添加蒲公英提取物對(duì)三黃雞免疫器官指數(shù)的影響

免疫器官的發(fā)育會(huì)影響動(dòng)物機(jī)體的免疫能力，有研究顯示：健康的動(dòng)物，隨著其生長(zhǎng)發(fā)育，免疫器官指數(shù)提高，其免疫能力也會(huì)提高。本試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，飲用蒲公英提取物對(duì)胸腺發(fā)育有一定的促進(jìn)作用，在免疫后30d，試驗(yàn)組均高于對(duì)照組，免疫后50d，飲用20%，10%的蒲公英提取物具有顯著促進(jìn)胸腺的發(fā)育作用，這與李玉杰等在研究蒲公英水提物對(duì)烏骨雞的免疫力的結(jié)果相一致。雖飲用蒲公英提取物對(duì)法氏囊和脾臟促影響不明顯，但從數(shù)據(jù)上來(lái)看，隨著飲用日齡的增加，具有一定的促進(jìn)優(yōu)勢(shì)存在。

3.2 飲水中添加蒲公英提取物對(duì)抗體水平的影響

動(dòng)物注射疫苗后，能在機(jī)體產(chǎn)生體液免疫應(yīng)答，進(jìn)而產(chǎn)生抗體，抗體水平的高低與動(dòng)物免疫能力和抗病能力相關(guān)，抗體的效價(jià)越高，動(dòng)物的抗病力越強(qiáng)，蒲公英水提物中含有多糖成份，而多糖具有增強(qiáng)機(jī)體免疫能力，從而提高機(jī)體抗病力的作用。本試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)：在飲水添加蒲公英提取物能夠明顯提高禽流感抗體水平，尤其是免疫后30d時(shí)，試驗(yàn)組3抗體效價(jià)可提高1個(gè)滴度，這說(shuō)明蒲公英提取物利于三黃雞的免疫功能，提高其抗體水平，但隨著免疫日齡的增長(zhǎng)，抗體水平呈現(xiàn)先增高后減低的趨勢(shì)。

飲水中添加蒲公英提取物，可以促進(jìn)三黃雞的免疫功能發(fā)育，提高其禽流感抗體水平，最佳效果可提高1個(gè)滴度，對(duì)于肉雞臨床的三黃雞雞群免疫等具有一定的應(yīng)用前景。