鄧麗玲，陳 莎，李雨芮，汪波瀚，程先武，熊恒慶，吳 磊，郭玉琦

（武漢市動物園管理處，湖北 武漢 43000）

古巴火烈鳥（Phoenicopterus rubber）屬于鳥綱（Aves）、紅鸛科（Phoenicopteridae），紅鸛屬（Phoenicopterus），分布于地中海沿岸，棲息于溫熱帶鹽湖水濱，淺灘，以小魚、小蝦、昆蟲、藻類等為食，性格溫和，機警，善游泳，是動物園中最受歡迎的野生鳥類之一，也是動物園獸醫(yī)護理的重要組成部分。

生理生化活動是生命體的基本過程，動物血液學和臨床生物化學參數(shù)是動物的基本資料，在疾病診斷和治療過程中具有相當大的潛在價值，特別是鳥類。目前，國內(nèi)學者對古巴火烈鳥的研究主要在人工育雛、人工飼養(yǎng)管理、臨床病例分析，但對古巴火烈鳥的血液生理生化的研究暫未見報道。國外學者V.I.Peinado等對不同品種的火烈鳥部分生理生化值進行了研究，HAWKEY等對不同年齡段的火烈鳥的部分生理生化值進行了分析，PUERTA,M.L等報道了智利火烈鳥部分血液生理生化值。本研究以武漢動物園圈養(yǎng)的42只古巴火烈鳥為研究對象，測定了26項生理生化指標并進行了分析，為古巴火烈鳥的飼養(yǎng)管理、疾病防治等研究提供基礎性數(shù)據(jù)。

1 材料與方法

1.1 研究對象

所有研究對象均為成年古巴火烈鳥，年齡在15歲左右，無疾病臨床癥狀。體重1.47～3.1kg。

1.2 飼養(yǎng)條件

飼養(yǎng)古巴火烈鳥的小島為開放系統(tǒng)，籠舍由內(nèi)室和室外運動場構成，自然光照，自由飲水，定時定量飼喂。動物飼料為特定的古巴火烈鳥飼料，由玉米、黃豆、麩皮、胡蘿卜，番茄，洋蔥，蝦皮，雞蛋，肉雞商品料，小黃魚構成。

1.3 試驗器材及試劑

萊卡光學顯微鏡、watson 177-112C細胞計數(shù)板、diff-quick染液，0.01%甲苯胺藍，瑞氏染色液，病理級載玻片、目鏡測微尺、毛細管離心機，xk-2型血紅蛋白儀、天津微納芯PointcareV全自動生化儀及配套生化試劑盤。

1.4 樣品采集

2019年4月、2019年10月、2020年10月，動物進食前，人工保定，在同一時間（9～11時）從跖骨中靜脈采血2～3mL，分別用EDTA管和肝素管保存血樣。EDTA管血樣用于血常規(guī)檢測，肝素管血樣用于生化指標檢測。血涂片必須在采血現(xiàn)場制作，自然風干。

1.5 試驗方法

1.5.1 紅細胞總數(shù)

（RBC,個×1012/L）、白細胞總數(shù) 血樣稀釋后，采用watson 177-112C細胞計數(shù)板計數(shù)。

1.5.2 血細胞大小測量

血涂片染色后隨機選取50個細胞，用顯微測微尺進行測量。

1.5.3 血紅蛋白值（HB，G/L）測定 用xk-2型血紅蛋白儀進行測定。

1.5.4 紅細胞壓積（PCV）測定

75mm毛細管，注入40μL血液，以口腔紅蠟封口，放入毛細離心機，封口的一頭朝外，1500R/min，離心2min。紅細胞比容=血細胞高度/（紅細胞+血漿高度）×100%。

1.5.5 白細胞分類計數(shù)

血涂片染色后高倍鏡下連續(xù)隨機觀察100個白細胞，進行分類計數(shù)。

1.5.6 生化指標的測定

樣品采集后2h內(nèi)進行生化指標（TP、ALB、GLO、A/G、GLU、UA、AST、CK、K+、Na+、Na+/K+、Cl-、CA、P）檢測，該檢測由天津微納芯PointcareV全自動生化儀及配套生化試劑盤完成。

2 數(shù)據(jù)統(tǒng)計及分析方法

測定的指標均按種屬、性別進行分組分析。試驗數(shù)據(jù)用EXCEL和SASS統(tǒng)計學軟件進行生物學統(tǒng)計，內(nèi)容包括樣本平均值X、樣本標準差SD以及獨立樣本T檢驗。樣本均值X，反映了樣本的整體情況；樣本標準差SD，反映樣本偏離平均值X的情況；X+/-SD反映樣本的取值范圍。分析比較兩個獨立樣本的差異時，利用統(tǒng)計學獨立樣本均值方程的T檢驗，測出P=sig（雙側）值，當P

3 實驗結果

3.1 古巴火烈鳥血液形態(tài)學

3.1.1 紅細胞（red blood cell）

9～15μm，具有明顯的特異性，卵圓細胞，細胞核橢圓形，胞漿染色均勻。

3.1.2 多染性紅細胞

6～10μm橢圓形，胞漿藍色，核常成塊狀，染色不均，紫藍色。

3.1.3 嗜異性粒細胞（heterophilic granulocyte）

9～15μm不規(guī)則圓形及類圓形，胞質(zhì)淡染，充滿桿狀或紡錘狀結晶顆粒，桿狀核染色不均，輪廓不清，分葉核染色較細膩，紫紅色，常分2葉。

3.1.4 淋巴細胞

5～9μm圓形或類圓形，胞質(zhì)淡藍色，細胞核圓形，與紅細胞緊密接觸后常被觀察到變形。

3.1.5 嗜酸性粒細胞（eosinophil）7～11μm圓形，胞質(zhì)藍灰色，內(nèi)含圓形嗜酸性顆粒，顆粒有折光性，胞核常分2葉，顏色紫紅帶藍。

3.1.6 單核細胞（monocyte）10～15μm，圓形細胞，胞質(zhì)豐富，稍不透明有流動感，淡灰藍色，胞核呈腎形、卵圓形、馬蹄形或不規(guī)則形。

3.1.7 嗜堿性粒細胞（basophil）7～11μm，不規(guī)則形，胞漿豐富，胞核不規(guī)則，染色較粗糙，內(nèi)有染色深的嗜堿性顆粒。

3.1.8 凝血細胞（thrombocyte）

4～7μm，橢圓形，胞漿淡藍灰色，胞核紫紅色。

3.2 古巴火烈鳥血液生理指標測定結果

42只成年古巴火烈鳥17項血液生理指標測定結果（見表1），可以看出，成年古巴火烈鳥的雌雄生理指標數(shù)值比較接近，經(jīng)統(tǒng)計檢驗，差異均不顯著（P>0.05）。

表1 圈養(yǎng)條件下古巴火烈鳥血液生理指標測定結果（X±SD）

3.3 圈養(yǎng)成年古巴火烈鳥血液生化指標測定結果

42只圈養(yǎng)成年古巴火烈鳥項血液生化指標測定結果（見表2），可以看出，成年古巴火烈鳥的雌雄生化指標數(shù)值存在一定差異，但差異不顯著，均未通過統(tǒng)計學P值檢驗（P>0.05）。

表2 成年火烈鳥血液生化指標測定結果（X±SD）

4 討論與分析

4.1 古巴火烈鳥生理指標分析

本次實驗所獲得的圈養(yǎng)條件下古巴火烈鳥的生理指標雌雄之間存在差異，但無顯著差異。紅細胞總數(shù)及血紅蛋白值雌性指標略高于雄性，白細胞總數(shù)雄性略高于雌性。與國外學者V.I.Peinado等火烈鳥的研究報道情況相比，血紅蛋白值、紅細胞壓積、紅細胞總數(shù)、異嗜性粒細胞總數(shù)、嗜酸性粒細胞偏低，白細胞總數(shù)、淋巴細胞總數(shù)、單核細胞總數(shù)及嗜堿性粒細胞總數(shù)則略高，但都在鳥類血液生理指標正常參考范圍之內(nèi)。

4.2 古巴火烈鳥生化指標分析

本次實驗所獲得的圈養(yǎng)條件下古巴火烈鳥的生化指標雌雄之間存在差異，但無顯著差異。尿酸、谷草轉(zhuǎn)氨酶雌性指標高于雄性，總蛋白、白蛋白、球蛋白雄性指標高于雌性，其余指標基本一致。

5 小結與討論

鳥類的紅細胞屬有核紅細胞，大部分的血液分析儀都無法進行分析，流式細胞儀雖然可以分析出來，但機器過于昂貴。所以盡管這項研究的大部分血液生理指標數(shù)據(jù)都是作者根據(jù)人工計數(shù)方法計算出來，但在臨床上也有一定的參考意義。本實驗所測得關于圈養(yǎng)條件下古巴火烈鳥的部分血液生理生化數(shù)值與野生古巴火烈鳥測定的情況是否一致，以及在不同時期、不同地域、不同變化規(guī)律下表現(xiàn)如何等等，均有待進一步研究。理想情況下，每個實驗室都應該根據(jù)自己的臨床需要建立一套參考范圍，尤其是當參考數(shù)據(jù)是通過不同的實驗室技術獲得的，這樣有助于解釋動物由于環(huán)境、溫度和其他因素所造成的區(qū)別。此次實驗結果僅供參考。