高海彥 楊海寧 張會(huì)玲 王發(fā)治

甘肅省武威市涼州醫(yī)院 733000

鼻咽癌是耳鼻喉科疾病中一種常見的惡性腫瘤，好發(fā)于鼻咽腔頂部和側(cè)壁，在東南亞、華南地區(qū)常見[1-2]。鼻咽癌的發(fā)病率在頭頸部腫瘤中居于首位[3]，嚴(yán)重危害人類身體健康。鼻咽癌患者早期癥狀不明顯，不易與其他疾病區(qū)分開，加之生理解剖位置又比較隱蔽，一般體格檢查難以發(fā)現(xiàn)，給臨床診治工作帶來不少困擾。另外，鼻咽癌的局部復(fù)發(fā)率和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移率高，而總存活率很低[4]。因此，早發(fā)現(xiàn)早治療是改善鼻咽癌預(yù)后的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，尋求有實(shí)際意義的高敏感性檢測(cè)方法對(duì)鼻咽癌患者提高生存率至關(guān)重要[5]。在本次研究中，對(duì)108例鼻咽癌患者、80例良性病變患者、80例健康體檢者進(jìn)行FH檢測(cè)以及血漿EB-DNA、CEA的檢測(cè)，為臨床醫(yī)師對(duì)鼻咽癌的早期診斷提供依據(jù)。現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 采用回顧性方法，選取本院耳鼻喉科2018年6月—2020年6月收治的鼻咽癌患者108例作為A組，良性病變組80例作為B組。所有患者均以手術(shù)后病理活檢為金標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行分組。同期選取選取體檢中心80例健康體檢者作為C組。其中A組年齡25～66歲，平均年齡(44.26±13.86歲)；B組年齡26～64歲，平均年齡(45.26±14.23歲)；C組年齡24～64歲，平均年齡(44.13±13.62歲)。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并其他惡性腫瘤、免疫系統(tǒng)或血液系統(tǒng)疾病。三組研究對(duì)象的性別、年齡等一般資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。所有入組患者均知情同意，本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)備案。

1.2 檢測(cè)方法 三組受試者禁食10h以上于第二天早晨8點(diǎn)空腹采集靜脈血各兩管：EDTA-K2抗凝2ml及無抗凝劑3ml。3 000r/min離心10min，取上清液進(jìn)行檢測(cè)。采用中山大學(xué)達(dá)安基因股份有限公司實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀檢測(cè)EB病毒DNA；采用德國(guó)貝克曼公司DXI-800全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光分析儀檢測(cè)CEA。所有檢測(cè)試劑均采用儀器配套試劑，所有檢測(cè)項(xiàng)目室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)均在控。同時(shí)，對(duì)所有入組患者采用鼻咽部黏膜滲液采樣器，從鼻咽部位緩慢插入，左右旋轉(zhuǎn)180°，按照鼻咽后壁、咽鼓管咽口及圓枕、咽隱窩的順序進(jìn)行緩慢擦拭，采集鼻咽部黏膜滲液，并充分蘸取，將取樣器放入試劑內(nèi)攪動(dòng)，使其充分混勻，靜置10min后檢驗(yàn)。

1.3 判斷標(biāo)準(zhǔn) 所有檢測(cè)項(xiàng)目的陽性標(biāo)準(zhǔn)均參考試劑盒說明書。EB病毒DNA檢測(cè)曲線呈典型的S型曲線且含量>1×103copies/ml時(shí)判定EB-DNA為陽性。CEA>5μg/L可判斷為陽性。FH檢測(cè)顯示藍(lán)色、綠色、藍(lán)綠色為陽性，不變色為陰性。聯(lián)合檢測(cè)中出現(xiàn)一項(xiàng)陽性即可判斷為陽性。

2 結(jié)果

2.1 三組患者血漿EB-DNA、CEA檢測(cè)比較 三組患者中A組患者的血漿EB-DNA、CEA檢測(cè)值顯著高于B組、C組，B組EB-DNA、CEA明顯高于C組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 三組患者的EB-DNA、CEA-檢測(cè)平均值比較

2.2 A、B組患者鼻咽部FH檢測(cè)以及血漿EB-DNA、CEA的陽性率比較 A組的鼻咽部黏膜細(xì)胞穩(wěn)定性FH檢測(cè)、EB-DNA、CEA檢測(cè)陽性率明顯高于B組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

表2 A、B組患者鼻咽部FH檢測(cè)以及血漿EB-DNA、CEA的陽性率比較(%)

2.3 鼻咽癌組患者各項(xiàng)聯(lián)合檢測(cè)的診斷效能比較 鼻咽癌組的FH檢測(cè)聯(lián)合血漿EB-DNA、CEA三項(xiàng)檢測(cè)的靈敏度、特異度、準(zhǔn)確度、陽性預(yù)測(cè)值、陰性預(yù)測(cè)值、約登指數(shù)分別為92.60%，91.25%，92.02%，93.46%，90.12%，83.85%，三項(xiàng)聯(lián)合檢測(cè)的診斷效能均有很大程度提高。見表3。

表3 鼻咽癌組的EB病毒DNA、CEA、SF各項(xiàng)聯(lián)合檢測(cè)效能的比較(%)

3 討論

鼻咽癌是頭頸部的惡性腫瘤之一，轉(zhuǎn)移性和侵襲性都比較高，我國(guó)南方地區(qū)的發(fā)病率可以達(dá)到20～30/10萬[6]。鼻咽部腫瘤多在深部位置，不易發(fā)現(xiàn)，早期可能無癥狀或癥狀不明顯，容易誤診、漏診，錯(cuò)過最佳診斷時(shí)間。手術(shù)有時(shí)無法完全切除原發(fā)病灶，因此轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)是鼻咽癌患者治療失敗最主要的原因[7]。臨床上早發(fā)現(xiàn)早治療是提高鼻咽癌患者生存率及預(yù)后的關(guān)鍵。

有研究表明[8]，EB病毒感染、食物以及遺傳是造成鼻咽癌發(fā)病地域不同的主要原因。EB病毒的檢測(cè)已經(jīng)發(fā)展成為鼻咽癌早期診斷的主要實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)之一。EB病毒是Epstein和Barr在1964年研究非洲兒童Burkitt淋巴瘤時(shí)發(fā)現(xiàn)的一種病毒，是傳染性單核細(xì)胞增多癥的病原體，與鼻咽癌密切相關(guān)。隨著分子診斷技術(shù)的飛速發(fā)展，EB-DNA已逐漸成為檢測(cè)鼻咽癌的早期診斷指標(biāo)，具有敏感性高、特異性好的優(yōu)點(diǎn)[9]。EB病毒的DNA一般采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)技術(shù)，能準(zhǔn)確測(cè)定病毒的拷貝數(shù)，真實(shí)反映機(jī)體病毒的感染情況。EB病毒具有明顯的潛在癌基因，在一定的條件刺激下可從潛在狀態(tài)轉(zhuǎn)化為增殖狀態(tài)，在鼻咽癌腫瘤細(xì)胞中高度表達(dá)，且在早期階段有一定傳染作用[10]。因此對(duì)于鼻咽癌的早期診斷作用巨大。

CEA是一種酸性糖蛋白，具有人類胚胎抗原特性，可引起患者的免疫反應(yīng)。它是一種廣譜的腫瘤標(biāo)志物，在很多腫瘤細(xì)胞中均可表達(dá)，在大腸癌、結(jié)腸癌、卵巢癌、乳腺癌等中均有表達(dá)，針對(duì)某種腫瘤單獨(dú)檢測(cè)特異度、靈敏度不高。在腫瘤的鑒別診斷中一般和其他腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測(cè)以提高靈敏度和特異度。在本研究中，CEA在鼻咽癌中也有一定程度的表達(dá)，這與何平[11]的報(bào)道一致。

鼻咽部黏膜細(xì)胞FH物質(zhì)一般是以結(jié)合的形式存在于上皮細(xì)胞蛋白中。當(dāng)一些致病因子出現(xiàn)以后會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞穩(wěn)定性失調(diào)、蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，F(xiàn)H物質(zhì)從細(xì)胞的蛋白質(zhì)中脫落下來，上皮細(xì)胞內(nèi)FH物質(zhì)含量也因此增加。基于鼻咽部黏膜細(xì)胞穩(wěn)定性FH檢測(cè)可以提示鼻咽部細(xì)胞惡變的程度，是具有臨床疾病標(biāo)志意義的亞細(xì)胞分子[12]。

臨床上針對(duì)鼻咽癌的單一檢測(cè)價(jià)值并不高，每一種腫瘤標(biāo)志物均存在不同程度的缺陷。聯(lián)合檢測(cè)對(duì)提高鼻咽癌的早期診斷水平十分重要[13]。本研究中，鼻咽部黏膜細(xì)胞FH檢測(cè)聯(lián)合血漿EB-DNA、CEA檢測(cè)在鼻咽癌的早期診斷中具有較高的診斷效能，聯(lián)合檢測(cè)的指標(biāo)可達(dá)到靈敏度92.60%、特異度91.25%、準(zhǔn)確度92.02%、陽性預(yù)測(cè)值93.46%、陰性預(yù)測(cè)值90.12%、約登指數(shù)83.85%，這與邱燁等[14]的報(bào)道一致。但本次研究樣本量較小，觀察時(shí)間較短，尚需要加大樣本量進(jìn)行更深層次研究。