潘文武,舒 鳴,袁莉蕓
(1.湖南婁底市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心,湖南婁底 417000;2.湖南懷化職業(yè)技術(shù)學(xué)院,湖南懷化 418000;3.湖北襄陽(yáng)職業(yè)技術(shù)學(xué)院,湖北襄陽(yáng) 441100)
我國(guó)于2020年7月1日起全面禁止在飼料中添加抗生素促生長(zhǎng)劑后,養(yǎng)殖業(yè)尤其是家禽業(yè)面臨著疾病控制及生長(zhǎng)性能低下的困擾,因此,關(guān)于開發(fā)或?qū)ふ铱梢蕴娲股氐脑匣蛱砑觿┊a(chǎn)品以維持腸道和免疫功能相關(guān)研究倍受關(guān)注。有機(jī)酸及其鹽類通常被認(rèn)為是無(wú)害的,大多數(shù)技術(shù)先進(jìn)的國(guó)家已批準(zhǔn)將其用作動(dòng)物飼料添加劑,其中包括丁酸鈉在內(nèi)的酸化劑鹽被認(rèn)為可以降低腸道黏膜pH,從而共生生物生長(zhǎng)創(chuàng)造一個(gè)酸性環(huán)境(賈鳳,2014)。此外,丁酸鈉可以抑制一些沙門氏菌的發(fā)育和增殖,同時(shí)在飼料中添加丁酸對(duì)增重、胴體性狀和腸絨毛大小均有顯著改善(周勤飛和王永才,2009)。Chamba等(2014)在肉雞中使用丁酸鈉,觀察其促進(jìn)生長(zhǎng)作用,結(jié)果發(fā)現(xiàn),飼喂添加丁酸鈉日糧的仔豬血清中IgG濃度和空腸中總IgA濃度均顯著增加,其通過(guò)誘導(dǎo)宿主防御肽對(duì)免疫刺激作用也得到加強(qiáng)。Hassan等(2010)研究表明,微囊化型的有機(jī)酸比抗生素生長(zhǎng)促進(jìn)劑(恩拉霉素)更能提高肉雞的生長(zhǎng)性能,因?yàn)槲⒛一∷猁}在消化時(shí)釋放緩慢,使部分丁酸鹽在腸道遠(yuǎn)端游離,調(diào)節(jié)腸道黏膜,進(jìn)而導(dǎo)致更好的生長(zhǎng)性能,更低的菌落和糞便脫落率。迄今為止,關(guān)于丁酸鈉對(duì)肉雞體液和組織器官相對(duì)重量的研究數(shù)據(jù)有限,同時(shí)目前可以在飼料中添加抗菌肽,由于它具有天然抗菌、廣譜活性、作用速度快和細(xì)菌耐藥性較低的特點(diǎn)(潘行正等,2010),其作用機(jī)理和效果還有待驗(yàn)證。因此,本研究旨在評(píng)估日糧添加不同水平丁酸鈉替代抗菌肽對(duì)肉雞生長(zhǎng)性能、免疫反應(yīng)及組織器官相對(duì)重量的影響。
1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)試驗(yàn)將600只平均初始體重為(53.05±0.76)g的1日齡商品肉仔雞隨機(jī)分為4組,每組5個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)30只。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)日糧,藥物組在基礎(chǔ)日糧中添加25 mg/kg抗菌肽,其他兩組分別在基礎(chǔ)日糧中添加5和10 mg/kg丁酸鈉?;A(chǔ)日糧原料組成及營(yíng)養(yǎng)成分見表1。
表1 基礎(chǔ)日糧原料組成及營(yíng)養(yǎng)成分
1.2 數(shù)據(jù)記錄試驗(yàn)期間每周統(tǒng)計(jì)1次各重復(fù)肉雞的飼料用量,分別在試驗(yàn)第1、21和42天早上禁食4 h后按照重復(fù)對(duì)肉雞進(jìn)行稱重,試驗(yàn)結(jié)束后用記錄的數(shù)據(jù)計(jì)算平均日增重、平均日采食量和料重比。
1.3 樣品采集與分析抗體滴度水平歸因于動(dòng)物的體液免疫反應(yīng)。用血清學(xué)滴定法測(cè)定新城疫病毒和綿羊紅細(xì)胞抗原的體液免疫反應(yīng)。分別在1和7 d對(duì)所有雛雞接種新城疫疫苗,同時(shí)每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選擇4只雞通過(guò)雙邊翅膀注射5%綿羊紅細(xì)胞(SRBCs)抗原,之后參考King(1999)的方法測(cè)定抗體滴度。分別在試驗(yàn)第21和42天每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選擇3只雞進(jìn)行屠宰,分離肝臟、腎臟、脾臟、胸腺和法氏囊并稱重,以其重量與活體雞重的比值表示相對(duì)重量。
1.4 數(shù)據(jù)分析使用SPSS軟件單因素方差分析模型對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,采用Turkey法進(jìn)行多重比較,P<0.05表示差異顯著。
2.1 丁酸鈉對(duì)肉雞生長(zhǎng)性能的影響由表2可知,對(duì)照組、藥物組與丁酸鈉組對(duì)21 d肉雞體重、1~21 d和1~42 d肉雞平均日增重、1~21 d料重比及各階段平均日采食量的影響均無(wú)顯著差異(P>0.05)。與對(duì)照組相比,0.5%丁酸鈉組42 d肉雞體重和22~42 d平均日增重分別顯著提高2.80%和4.07%(P<0.05)。但0.5%丁酸鈉組22~42 d和1~42 d料重比較對(duì)照組和藥物組分別顯著降低5.78%、6.86%和3.85%、5.06%(P<0.05)。
表2 丁酸鈉替代藥物對(duì)肉雞生長(zhǎng)性能的影響
2.2 丁酸鈉對(duì)肉雞抗體滴度的影響由表3可知,日糧處理對(duì)21 d肉雞新城疫和綿羊紅細(xì)胞抗體滴度的影響無(wú)顯著差異(P>0.05),但0.5%和1.0%丁酸鈉組42 d肉雞新城疫和綿羊紅細(xì)胞抗體滴度顯著高于對(duì)照組和藥物組(P<0.05)。
表3 丁酸鈉替代藥物對(duì)肉雞抗體滴度的影響
2.3 丁酸鈉對(duì)肉雞組織器官相對(duì)重量的影響由表4可知,日糧處理對(duì)21 d肉雞肝臟、腎臟、脾臟及42 d肉雞肝臟、腎臟和法氏囊的相對(duì)重量無(wú)顯著影響(P>0.05)。0.5%和1%丁酸鈉組21 d肉雞法氏囊和胸腺相對(duì)重量及42 d肉雞脾臟和胸腺相對(duì)重量顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。
表4 丁酸鈉替代藥物對(duì)肉雞組織器官相對(duì)重量的影響 %
生長(zhǎng)性能數(shù)據(jù)顯示,與對(duì)照組相比,0.5%丁酸鈉組42 d肉雞體重和22~42 d平均日增重均顯著提高,同時(shí)該組22~42 d和1~42 d料重比較對(duì)照組和藥物組顯著降低,這與Chamba等(2014)的研究結(jié)果一致,作者推測(cè)生長(zhǎng)性能的提高可能是因?yàn)槎∷徕c攝入后在腸道中創(chuàng)造了酸性環(huán)境,反過(guò)來(lái)使病原體負(fù)荷最小化。此外,日糧中添加丁酸鈉可以提高礦物質(zhì)和蛋白質(zhì)的腔內(nèi)消化率,這可能也是導(dǎo)致日增重升高的原因(Zhang等,2011)。
細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)可能是由于延遲型超敏反應(yīng),其中綿羊紅細(xì)胞作為胸腺依賴的免疫原,用于評(píng)價(jià)雞的抗體反應(yīng)。我們觀察到0.5%和1.0%丁酸鈉組42 d肉雞新城疫和綿羊紅細(xì)胞抗體滴度顯著高于對(duì)照組和藥物組,這表明丁酸鈉可能在抗原暴露后期調(diào)節(jié)B和T細(xì)胞的功能,并能調(diào)節(jié)宿主的免疫(Ahsan等,2016)。Park等(2015)指出,包括丁酸鹽在內(nèi)的短鏈脂肪酸通常在腸道內(nèi)合成,支持Th1和Th17效應(yīng)細(xì)胞及IL-10調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的調(diào)節(jié)和生長(zhǎng),這些細(xì)胞維持著免疫系統(tǒng)的框架。Zhou等(2014)報(bào)道,丁酸鹽對(duì)巨噬細(xì)胞的影響歸因于丁酸鹽抑制一氧化氮的產(chǎn)生,并減少細(xì)胞因子的表達(dá),包括IL-6、IL-10、干擾素γ和IL-1β,這些細(xì)胞因子控制炎癥和維持免疫穩(wěn)態(tài)。與我們的發(fā)現(xiàn)類似,Eshak等(2016)報(bào)道了丁酸鹽處理的肉雞對(duì)新城疫的高抗體效價(jià),因?yàn)槎∷嵴{(diào)節(jié)腸道巨噬細(xì)胞的活動(dòng),巨噬細(xì)胞發(fā)揮腸道血腦屏障內(nèi)T細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞的功能,而后一種細(xì)胞在宿主免疫中也有作用。
在健康動(dòng)物中,免疫器官重量的增加與機(jī)體免疫反應(yīng)的改善有關(guān)。法氏囊、胸腺和脾臟是動(dòng)物免疫系統(tǒng)的關(guān)鍵器官,本研究結(jié)果表明,0.5%和1%丁酸鈉組21 d肉雞法氏囊和胸腺相對(duì)重量及42 d肉雞脾臟和胸腺相對(duì)重量顯著高于對(duì)照組,這與Eshak等(2016)的結(jié)果一致,提示丁酸鹽對(duì)肉雞全身免疫系統(tǒng)也有一定的促進(jìn)作用。
日糧添加丁酸鈉可以提高42 d肉雞新城疫和綿羊紅細(xì)胞抗體滴度,改善免疫器官相對(duì)重量,其中丁酸鈉添加水平為0.5%時(shí)可以顯著改善1~42 d肉雞的飼料效率。