孫清超，宗 亮，張海平，張力為

（新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院胸外科，新疆 烏魯木齊 830054）

調(diào)查顯示，我國(guó)哈薩克族食管鱗癌的發(fā)病率高達(dá)155.9/10 萬(wàn)，比其他民族高2.3 倍[1]。食管鱗癌患者的病情十分隱匿，多數(shù)患者的病情都是在進(jìn)入中期、晚期后才得到明確診斷，故此病患者的5 年生存率僅為14.6%～26.3%。盡早對(duì)食管鱗癌患者的病情進(jìn)行準(zhǔn)確的診斷并及時(shí)對(duì)其進(jìn)行有針對(duì)性的治療對(duì)降低其死亡率具有十分重要的意義。有研究表明，LncRNA H19 在多類(lèi)腫瘤的發(fā)生、發(fā)展中起到十分關(guān)鍵的作用[2]。在本文中，筆者主要是研究哈薩克族食管鱗癌患者癌組織中LncRNA H19 的表達(dá)情況及相關(guān)臨床意義。

1 對(duì)象和方法

1.1 研究對(duì)象

回顧分析2014 年7 月至2015 年12 月在新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院接受手術(shù)治療的80 例哈薩克族食管鱗癌患者的臨床資料。在這80 例患者中，有男51 例，女29 例；其年齡為35 ～78 歲，平均年齡（51.6±4.1）歲；其中發(fā)病部位為胸上段食管的患者有10 例，為胸中段食管的患者有24 例，為胸下段食管的患者有46 例；其中低分化食管鱗癌患者、中分化食管鱗癌患者、高分化食管鱗癌患者分別有18 例、36 例、26 例；其中Ⅰ期食管鱗癌患者、Ⅱ期食管鱗癌患者、Ⅲ期食管鱗癌患者、Ⅳ期食管鱗癌患者分別有17例、29 例、25 例、9 例。

1.2 研究對(duì)象的納入及排除標(biāo)準(zhǔn)

納入標(biāo)準(zhǔn)：1）經(jīng)病理檢查被確診患有食管鱗癌；2）民族為哈薩克族；3）未接受過(guò)抗腫瘤治療；4）其本人及其家屬均同意參與本研究，并簽署相關(guān)書(shū)面協(xié)議。排除標(biāo)準(zhǔn)：1）病歷資料不完整；2）發(fā)生腫瘤遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移；3）無(wú)法正常接受隨訪(fǎng)。

1.3 方法

1.3.1 LncRNA H19 檢測(cè) 對(duì)這80 例患者進(jìn)行LncRNA H19 檢測(cè)的方法是：對(duì)患者的瘤體組織進(jìn)行切除。同時(shí)，切取腫瘤周?chē)恼＝M織（切緣距離腫瘤的距離應(yīng)＞5 cm）。于十分嚴(yán)格的無(wú)菌環(huán)境中，用配套試劑盒提取上述組織的總RNA，檢測(cè)其總RNA 溶液的吸光度。再以L(fǎng)ncRNA H19 作引物和總RNA 逆轉(zhuǎn)錄的cDNA 作模板進(jìn)行PCR 反應(yīng)，將miRNA U6 的Ct值作為內(nèi)參照，計(jì)算得出LncRNA H19 的相對(duì)表達(dá)量。1.3.2 隨訪(fǎng) 對(duì)這80 例患者進(jìn)行為期5 年的隨訪(fǎng)，采用門(mén)診復(fù)查、電話(huà)回訪(fǎng)等方式了解并記錄其5 年生存率和中位生存期。

1.3.3 資料分析 收集這些患者的年齡、腫瘤所在位置、病情惡化與否等資料，分析其各項(xiàng)指標(biāo)與LncRNA H19 表達(dá)水平的關(guān)系。觀(guān)察其中位生存期，并分析影響其中位生存期的因素。根據(jù)癌組織中LncRNA H19 表達(dá)水平的高低將其分為L(zhǎng)ncRNA H19 高表達(dá)組〔45 例，LncRNA H19 的相對(duì)表達(dá)量＞（7.57±0.14）〕與LncRNA H19 低表達(dá)組〔35例，LncRNA H19 的相對(duì)表達(dá)量≤（7.57±0.14）〕，并對(duì)比兩組患者的各項(xiàng)臨床指標(biāo)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

對(duì)本研究所得數(shù)據(jù)均采用SPSS 22.0 軟件進(jìn)行處理，計(jì)量資料用均數(shù)± 標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料用百分比（%）表示，采用χ2檢驗(yàn)或F 檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 這些患者癌組織與癌旁組織中LncRNAH19 的表達(dá)水平

這些患者癌組織中LncRNA H19 的相對(duì)表達(dá)量〔（7.57±0.14）〕高于其癌旁組織中LncRNA H19 的相對(duì)表達(dá)量〔（1.37±0.08）〕，P＜0.05。

2.2 LncRNAH19 高表達(dá)組患者與LncRNAH19 低表達(dá)組患者臨床資料的比較

LncRNA H19 高表達(dá)組患者中腫瘤臨床分期為Ⅰ～Ⅳ期患者的例數(shù)分別為8 例、12 例、18 例、7 例，其中腫瘤處于進(jìn)展期的患者有19 例。LncRNA H19 低表達(dá)組患者中腫瘤臨床分期為Ⅰ～Ⅳ期患者的例數(shù)分別為9 例、17 例、7 例、2 例，其中腫瘤處于進(jìn)展期的患者有5 例。兩組患者的腫瘤臨床分期相比，P＜0.05。兩組患者的年齡（＞60 歲、≤60歲）、性別（男、女）、腫瘤所在部位（胸上段食管、胸中段食管、胸下段食管）、腫瘤分化程度（低、中、高分化）相比，P＞0.05。

2.3 這些患者癌組織中LncRNAH19 表達(dá)水平與其生存率的關(guān)系

這80 例患者的隨訪(fǎng)時(shí)間為5 ～60 個(gè)月，平均隨訪(fǎng)時(shí)間（37.4±4.2）個(gè)月。LncRNA H19 高表達(dá)組患者的5 年生存率（20.7%）低于LncRNA H19 低表達(dá)組患者的5 年生存率（38.6%），χ2=4.715，P=0.005。詳見(jiàn)圖1。

圖1 這些患者LncRNA H19 表達(dá)水平與其生存率的關(guān)系

2.4 對(duì)這些患者的臨床資料進(jìn)行單因素分析的結(jié)果

這些患者中各個(gè)腫瘤臨床分期患者的中位生存期相比，P＜0.05。這些患者中腫瘤處于進(jìn)展期的患者與腫瘤未處于進(jìn)展期患者的中位生存期相比，P＜0.05。這些患者中LncRNA H19 在癌組織中呈高表達(dá)的患者與LncRNA H19 在癌組織中呈低表達(dá)患者的中位生存期相比，P＜0.05。詳見(jiàn)表1。

表1 對(duì)這些患者的臨床資料進(jìn)行單因素分析的結(jié)果

2.5 對(duì)這些患者的臨床資料進(jìn)行多因素logistic 回歸分析的結(jié)果

進(jìn)行多因素Logistic 回歸分析的結(jié)果顯示，腫瘤的臨床分期、腫瘤是否處于進(jìn)展期、癌組織中LncRNA H19 的表達(dá)水平是這些患者中位生存期的影響因素，P＜0.05。詳見(jiàn)表2。

表2 對(duì)這些患者的臨床資料進(jìn)行多因素logistic 回歸分析的結(jié)果

3 討論

在食管鱗癌的發(fā)生發(fā)展中，遺傳因素是十分重要的影響因素。其中，抑癌基因失活、原癌基因被激活是誘發(fā)食管鱗癌的主要因素[3]。LncRNA H19 位于人染色體11p15.5，全長(zhǎng)2.7 kb, 是一個(gè)母系表達(dá)父系印記的基因，在多種腫瘤的發(fā)生發(fā)展中起著重要的作用。以往有研究發(fā)現(xiàn)，LncRNA H19 在肺癌、膀胱癌等癌癥患者的癌組織中均呈高表達(dá)水平。這與本研究的結(jié)果相一致。程勇等[4]在研究中指出，LncRNA H19 可通過(guò)靶向調(diào)控miR-675/EHZ2 來(lái)影響結(jié)腸癌細(xì)胞的增殖。趙軍方等[5]在研究中指出，LncRNA H19 可通過(guò)靶向調(diào)控miR-107/CDK6 信號(hào)軸來(lái)影響口腔癌細(xì)胞的侵襲及遷移能力[5]。近年來(lái)，隨著臨床上對(duì)LncRNA H19 研究的不斷深入，其在多種腫瘤發(fā)生發(fā)展中的作用相繼被證實(shí)。有研究指出，食管鱗癌患者癌組織中LncRNA H19 的表達(dá)水平越高，其預(yù)后越差。此病患者食管壁出現(xiàn)的癌轉(zhuǎn)移及浸潤(rùn)程度的變化均與LncRNA H19 在其癌組織中的表達(dá)水平密切相關(guān)。食管鱗癌的發(fā)生機(jī)制十分復(fù)雜，LncRNA H19 并不是誘發(fā)此病的唯一基因[6]。就目前的研究結(jié)果來(lái)看，我們?nèi)孕鑼?duì)這些致病基因間的相互作用做進(jìn)一步的研究。

本研究的結(jié)果表明，哈薩克族食管鱗癌患者癌組織中LncRNA H19 的表達(dá)水平高于其癌旁組織，其癌組織中LncRNA H19 的表達(dá)水平是其預(yù)后的影響因素。