劉 兵 馬珍馳 張其暉 宋秀梅 孫文淵

（棗莊市畜牧漁業(yè)事業(yè)發(fā)展中心，山東棗莊 277800）

豬偽狂犬病是由偽狂犬病病毒（porcine pseudorabies virus,PRV）引起豬的一種急性、熱性、高度接觸性傳染病，豬是偽狂犬病毒的唯一自然宿主[1]。自20世紀(jì)90年代以來(lái)國(guó)內(nèi)普遍使用基因缺失疫苗，使豬偽狂犬病得到了很好的控制[2]；但2011年以后，一種由偽狂犬病毒變異毒株引起的豬偽狂犬病在我國(guó)廣泛流行[3]，給我國(guó)養(yǎng)豬業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。該病毒感染育肥豬后，引起豬呼吸困難和生長(zhǎng)緩慢[4]，感染豬出現(xiàn)高熱、打噴嚏、咳嗽等呼吸道癥狀和厭食，但死亡率很低，耐過(guò)后會(huì)長(zhǎng)期帶毒和排毒，成為該病重要的傳染源[5]。為了解山東省棗莊地區(qū)養(yǎng)殖場(chǎng)戶PRV野毒感染情況，本研究根據(jù)該地區(qū)生豬養(yǎng)殖實(shí)際情況，2015—2020年對(duì)175家規(guī)模豬場(chǎng)與散養(yǎng)戶的存欄生豬采集血清樣品3 634份，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）進(jìn)行了PRV野毒感染抗體（PRV gE抗體）檢測(cè)，為防控該病提供數(shù)據(jù)支撐。

1 材料與方法

1.1 血清樣品

棗莊地區(qū)下轄5區(qū)1市共6個(gè)縣級(jí)區(qū)域，用區(qū)域1至區(qū)域6表示。2015年4月至2020年11月共采集棗莊地區(qū)6個(gè)縣級(jí)區(qū)域175家養(yǎng)殖場(chǎng)（戶）的生豬血清樣品3 634份（表1）。血清樣品均來(lái)源于使用豬偽狂犬病gE基因缺失疫苗或未免疫過(guò)豬偽狂犬病疫苗的養(yǎng)殖場(chǎng)（戶）。

表1 2015—2020年樣品來(lái)源不同養(yǎng)殖類型及區(qū)域分布 （份/場(chǎng)）

1.2 主要儀器及檢測(cè)

1.2.1 主要儀器

Multiskan MK3型酶標(biāo)儀購(gòu)自美國(guó)熱電公司，AquaMax 2000型號(hào)洗板機(jī)購(gòu)自美國(guó)Molecular公司。

1.2.2 檢測(cè)方法與結(jié)果判定

采樣ELISA方法，購(gòu)買PRV gE蛋白抗體商品化檢測(cè)試劑盒，嚴(yán)格按照檢測(cè)試劑盒使用說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作與判定。

1.3 數(shù)據(jù)處理

本研究的相關(guān)數(shù)據(jù)均使用Excel軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)和分析。

2 結(jié)果

2.1 總體PRV gE抗體檢測(cè)結(jié)果

由表2可知，2015—2020年檢測(cè)的175家養(yǎng)殖場(chǎng)戶的豬血清樣品中，PRV gE抗體個(gè)體陽(yáng)性率為24.90%（905/3 634），群體陽(yáng)性率為41.71%（73/175）。

表2 2015—2020年棗莊市PRV gE抗體個(gè)體陽(yáng)性率與群體陽(yáng)性率統(tǒng)計(jì)表

2.2 不同養(yǎng)殖類型PRV gE抗體檢測(cè)結(jié)果

由表3可知，2015—2020年共采集83家規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)2 448份血清樣品和92家散養(yǎng)戶1 186份血清樣品，經(jīng)PRV gE抗體檢測(cè)，規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)和散養(yǎng)戶生豬的個(gè)體陽(yáng)性率分別為29.37%（719/2 448）和15.68%（186/1 186），群體陽(yáng)性率分別為54.22%（45/83）和30.43%（28/92）。

表3 2015—2020年不同養(yǎng)殖類型個(gè)體陽(yáng)性率與群體陽(yáng)性率統(tǒng)計(jì)表

2.3 不同區(qū)域PRV gE抗體檢測(cè)結(jié)果

由表4可知，2015—2020年共采集區(qū)域1養(yǎng)殖場(chǎng)戶29家584份血清樣品，區(qū)域2養(yǎng)殖場(chǎng)戶27家518份血清樣品，區(qū)域3養(yǎng)殖場(chǎng)戶32家690份血清樣品，區(qū)域4養(yǎng)殖場(chǎng)戶30家631份血清樣品，區(qū)域5養(yǎng)殖場(chǎng)戶29家630份血清樣品，區(qū)域6養(yǎng)殖場(chǎng)戶28家581份血清樣品，經(jīng)PRV gE抗體檢測(cè)，區(qū)域1至區(qū)域6的豬場(chǎng)中，PRV gE抗體個(gè)體陽(yáng)性率在10.79%～50.00%之間，群體陽(yáng)性率在24.14%～62.96%之間。

表4 2015—2020年不同區(qū)域PRV gE抗體個(gè)體陽(yáng)性率與群體陽(yáng)性率統(tǒng)計(jì)表

2.4 不同年份PRV gE抗體檢測(cè)結(jié)果

由表5可知，2015年采集28家養(yǎng)殖場(chǎng)戶585份血清樣品，2016年采集31家養(yǎng)殖場(chǎng)戶660份血清樣品，2017年采集30家養(yǎng)殖場(chǎng)戶630份血清樣品，2018年采集29家養(yǎng)殖場(chǎng)戶557份血清樣品，2019年采集28家養(yǎng)殖場(chǎng)戶582份血清樣品，2020年采集29家養(yǎng)殖場(chǎng)戶620份血清樣品，經(jīng)PRV gE抗體檢測(cè)，不同年份的PRV gE抗體個(gè)體陽(yáng)性率在12.74%～33.21%之間，群體陽(yáng)性率在20.69%～62.07%之間。

表5 2015—2020年豬偽狂犬病個(gè)體陽(yáng)性率與群體陽(yáng)性率統(tǒng)計(jì)表

3 分析與小結(jié)

通過(guò)對(duì)棗莊地區(qū)175家養(yǎng)殖場(chǎng)戶的3 634份豬血清樣品進(jìn)行PRV gE抗體檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，在73家養(yǎng)殖場(chǎng)戶的905份樣品中檢出PRV gE抗體陽(yáng)性，個(gè)體陽(yáng)性率為24.90%、場(chǎng)戶陽(yáng)性率為41.71%。楊孟鴻[6]對(duì)2014—2016年江西贛州地區(qū)規(guī)?；i場(chǎng)豬偽狂犬病野毒感染調(diào)查發(fā)現(xiàn)個(gè)體陽(yáng)性率為41.4%。李海琴等[7]對(duì)江西省2016年P(guān)RV gE抗體調(diào)查養(yǎng)殖場(chǎng)陽(yáng)性率為68.8%。研究檢測(cè)結(jié)果均表明山東棗莊地區(qū)與我國(guó)其他地區(qū)的養(yǎng)豬場(chǎng)（戶）一樣，養(yǎng)豬場(chǎng)中均存在PRV野毒感染的情況。

不同養(yǎng)殖類型間PRV gE抗體陽(yáng)性情況，個(gè)體陽(yáng)性率與群體陽(yáng)性率規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)的29.37%和54.22%明顯高于散養(yǎng)戶的15.68%和30.43%。徐小艷等[8]對(duì)2016年江蘇省PRV gE抗體調(diào)查結(jié)果表明規(guī)模場(chǎng)的個(gè)體陽(yáng)性率和群體陽(yáng)性率均高于散養(yǎng)戶，該結(jié)論與本地區(qū)的檢測(cè)結(jié)果相一致，因此做好規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)的PRV防控依然是防控該病的關(guān)鍵。

不同區(qū)域間PRV gE抗體陽(yáng)性情況，區(qū)域2中養(yǎng)殖場(chǎng)的PRV gE抗體個(gè)體陽(yáng)性率和群體陽(yáng)性率最高，分別高達(dá)50.00%和62.96%，區(qū)域5中養(yǎng)殖場(chǎng)的PRV gE抗體個(gè)體陽(yáng)性率和群體陽(yáng)性率最低，分別為10.79%和24.14%。蘇琳琳等[9]對(duì)云南省部分地區(qū)規(guī)模豬場(chǎng)豬偽狂犬病流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果顯示在不同地區(qū)該病存在不同的流行特點(diǎn)。在實(shí)際防控豬偽狂犬病過(guò)程中，應(yīng)根據(jù)實(shí)際污染情況采取不同的防控策略。

不同年份間PRV gE抗體個(gè)體陽(yáng)性率和群體陽(yáng)性率，2018年最高達(dá)33.21%和62.07%，2020年最低為12.74%和20.69%。本研究2018年個(gè)體陽(yáng)性率與群體陽(yáng)性率均明顯低于曹明珠等[10]對(duì)2018年山東省豬偽狂犬病野毒抗體調(diào)查豬場(chǎng)PRV gE抗體陽(yáng)性率為82.83%，樣本血清gE抗體陽(yáng)性率為61.74%。2015—2018年處于上升趨勢(shì)，與高許雷等[11]對(duì)2012—2017年間抗體陽(yáng)性率總體呈上升趨勢(shì)一致。2018—2020年處于下降趨勢(shì)，由2018年的高點(diǎn)下降到2020年的12.74%和20.69%，表明該病在部分養(yǎng)殖場(chǎng)戶中逐漸得到有效防控，這可能與近年來(lái)養(yǎng)殖場(chǎng)戶加強(qiáng)了生物安全綜合防控措施有關(guān)。

4 小結(jié)

本研究發(fā)現(xiàn)PRV野毒感染在棗莊地區(qū)部分場(chǎng)戶中仍然存在，各養(yǎng)殖場(chǎng)戶應(yīng)結(jié)合自身實(shí)際，制定科學(xué)的疫苗免疫方案，及時(shí)跟蹤監(jiān)測(cè)免疫效果和野毒感染抗體，對(duì)感染抗體陽(yáng)性豬進(jìn)行剔除和淘汰，同時(shí)采取更加嚴(yán)格的生物安全綜合防控措施，通過(guò)不間斷淘汰陽(yáng)性豬實(shí)現(xiàn)該病的凈化。