何梅 李杰 葉慶生 葉廣英 劉海林 王再花

摘 ?要：為評(píng)估CO2倍增對(duì)霍山石斛光合特性和生長(zhǎng)的影響，本研究以霍山石斛幼苗為試材，比較了CO2濃度400 μmol/mol（大氣濃度，對(duì)照組）和800 μmol/mol（處理組）栽培180 d對(duì)霍山石斛光合特性、生長(zhǎng)和有效成分的影響。結(jié)果表明，CO2倍增處理顯著提高了霍山石斛的凈光合速率（Pn）、氣孔導(dǎo)度（Gs）、蒸騰速率（Tr）和水分利用率（WUE），但霍山石斛未出現(xiàn)“光合適應(yīng)”現(xiàn)象。栽培30 d后，處理組的存活率、著根率和新芽數(shù)始終顯著高于對(duì)照組，而60 d后，處理組的葉片可溶性蛋白含量顯著低于對(duì)照組。栽培180 d后，CO2倍增處理組顯著提高了霍山石斛的莖鮮重、莖干重、莖長(zhǎng)、單株葉片數(shù)和葉片厚度，而對(duì)莖粗和單葉面積無(wú)顯著影響。同時(shí)，處理組也顯著提高了莖的多糖含量，比對(duì)照組提高94%，但生物堿含量則顯著下降。莖的總氨基酸含量與總黃酮含量在兩組間無(wú)顯著差異。綜上，CO2倍增處理能顯著促進(jìn)霍山石斛的生長(zhǎng)，提高成活率及其主要藥用部位莖的產(chǎn)量和多糖含量。

關(guān)鍵詞：霍山石斛;CO2;光合特性;生長(zhǎng);產(chǎn)量;有效成分

中圖分類號(hào)：S682.31 ? ? ?文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

Abstract： In order to investigate the effects of doubled atmospheric CO2 concentration on the photosynthetic characte-ristics and growth of Dendrobium huoshanense， the photosynthetic characteristics， vegetative growth and contents of effective constituents of D. huoshanense were evaluated using the seedlings after doubled atmospheric CO2 concentra-tion treatment （800 μmol/mol， 400 μmol/mol as control） for 180 days. The results showed that the net photosynthetic rate， stomatal conductance， transpiration rate and instantaneous water use efficiency significantly increased in leaves compared with the control. There was not photosynthetic acclimation during the experiment. After cultivation for 30 days， the survival rate， rooting rate and number of new buds of the treatment group were always significantly higher than that of the control group， while the soluble protein content in leaves of the treatment group was significantly lower than that of the control group after 60 days. Stem fresh weight， stem dry weight， stem height， leaf number per plant and leaf thickness also significantly increased in the treatment group， but there was no significant effect on stem thickness and leaf area. Moreover， the polysaccharide content of stems significantly increased in the treatment group， with 94% higher than that in the control group， while the alkaloid content significantly decreased， and there was no significant difference in the contents of total amino acid content and total flavonoids between the two groups. In conclusion， doubled carbon dioxide concentration treatment could significantly promote the growth， increase the survival rate， stem yield and stem polysaccharide content.

Keywords： Dendrobium huoshanense; CO2; photosynthetic characteristics; vegetative growth; yield; effective compo-nents

DOI： 10.3969/j.issn.1000-2561.2021.05.019

近年來(lái)，隨著設(shè)施栽培產(chǎn)業(yè)的快速發(fā)展，設(shè)施內(nèi)CO2施肥作為一項(xiàng)作物高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)、抗病的技術(shù)手段越來(lái)越受到人們的關(guān)注?；羯绞―endrobium huoshanense）為我國(guó)珍貴的石斛中藥材，主要分布于安徽霍山縣大別山、金寨、岳西以及河南[1]，具有抗腫瘤、調(diào)節(jié)免疫力、抗氧化、治療白內(nèi)障、降血糖等作用[2-4]?；羯绞鷮儆陉幧虬腙幧参铮斯ぴ耘嗟闹仓旯怙柡忘c(diǎn)和光補(bǔ)償點(diǎn)較低[5]，適合林下和設(shè)施栽培。目前，大量研究表明，提高CO2濃度能顯著提升葡萄、大豆、水稻、小麥等經(jīng)濟(jì)作物的生物量和產(chǎn)量[6-8]，促進(jìn)番茄、黃瓜和歐芹等蔬菜營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的積累[9-11]。也有研究發(fā)現(xiàn)，提高CO2濃度還能顯著提升朱頂紅、非洲菊、蝴蝶蘭等花卉的開花質(zhì)量[12-14]。然而，有關(guān)CO2處理對(duì)霍山石斛的影響還未見報(bào)道。由于該石斛地域適應(yīng)性較強(qiáng)，抗熱性較差，在廣東地區(qū)種植較為困難。為了進(jìn)一步提高霍山石斛在廣東設(shè)施種植的存活率和品質(zhì)，本研究參考前人在鼓槌石斛[15]、蝴蝶蘭[14]和非洲菊[13]等植物上報(bào)道的CO2濃度（800 μmol/mol），通過(guò)CO2倍增處理霍山石斛幼苗，觀察其生長(zhǎng)、萌芽、存活的情況，以及其光合特性與有效成分的變化，為霍山石斛設(shè)施栽培下CO2施肥技術(shù)的應(yīng)用提供參考。

1 ?材料與方法

1.1 ?材料

以霍山石斛種子為外植體，通過(guò)組織培養(yǎng)至株高為2～3 cm，單株葉片數(shù)為4～5片，長(zhǎng)勢(shì)良好的幼苗，大棚環(huán)境馴化2～3周后出瓶，栽培于木頭上，玻璃溫室環(huán)境中培養(yǎng)1個(gè)月。

1.2 ?方法

1.2.1 ?CO2倍增處理 ?試驗(yàn)在廣州華南師范大學(xué)蘭花研究中心進(jìn)行，玻璃溫室頂端覆蓋遮陽(yáng)網(wǎng)（遮陽(yáng)率為75%），環(huán)境溫度為（24±1）℃，相對(duì)濕度為80%左右，環(huán)境因子由浙江求是公司記錄儀實(shí)時(shí)監(jiān)控并記錄（每0.5 h記錄1次）。溫室內(nèi)CO2由鋼瓶供給（純度95%，廣州氣體廠提供）。參考前人報(bào)道的CO2處理濃度[13-15]，CO2處理組為大氣倍增的CO2濃度，即（800 ± 50）μmol/mol，處理時(shí)間為2016年5月1日至10月25日的7：00— 17：00;對(duì)照組的CO2濃度為大氣濃度，即（400 ± 50）μmol/mol。整個(gè)試驗(yàn)共處理180 d，分別于0、10、20、30、60、90、120、150、180 d隨機(jī)取長(zhǎng)勢(shì)健康的第4片（從植株頂端往下數(shù)）完全展開的功能葉進(jìn)行光合、形態(tài)及各項(xiàng)生理生長(zhǎng)指標(biāo)的測(cè)定。每個(gè)處理50叢，每叢10株，3次重復(fù)。正常肥水管理，每周施肥1次（質(zhì)量濃度為0.5 g/L的德國(guó)進(jìn)口COMPO肥，N∶P2O5∶K2O = 30∶10∶10），每2 d澆1次水。

1.2.2 ?葉片光合指標(biāo)測(cè)定 ?在上午9：30—11：00使用LI-6400便攜式光合測(cè)定儀測(cè)定處理0、10、20、30、60、90、120、150、180 d的霍山石斛功能葉的凈光合速率（Pn）、氣孔導(dǎo)度（Gs）、蒸騰速率（Tr）和水分利用效率（WUE）。

1.2.3 ?生長(zhǎng)相關(guān)參數(shù)測(cè)定 ?從處理的30 d起，每隔30 d測(cè)定50叢（每10株為1叢，每10叢為1組，5次重復(fù)）霍山石斛對(duì)照組和處理組的存活率、著根率和新芽的生長(zhǎng)情況。處理180 d后隨機(jī)選取對(duì)照組和處理組植株各50株（每10株為一組，共5組），分別測(cè)定單株苗的莖鮮重、莖干重、莖長(zhǎng)、莖粗、單株葉片數(shù)、單葉面積、比葉面積和葉片厚度（石蠟切片觀測(cè)，金華科迪KD-2260石蠟切片機(jī)）

1.2.4 ?葉片可溶性蛋白含量測(cè)定 ?參考Bradford的方法略加改進(jìn)[16]。稱取0.1 g新鮮葉片剪碎于冷凍過(guò)的研缽中，加1 mL磷酸緩沖液（pH 7.8）和少量石英砂，在冰浴中快速研磨成勻漿，勻漿倒入離心管中;再用4 mL的磷酸緩沖液將研缽中的勻漿洗入離心管中。在4 ℃條件下，5000 r/min離心10 min，取上清液倒入10 mL的容量瓶中，殘?jiān)尤? mL磷酸緩沖液懸浮再離心，將上清液倒入上述容量瓶中，定容至10 mL待測(cè)。取0.3 mL樣品提取液，加入0.7 mL磷酸緩沖液（pH 7.8），再加5 mL考馬斯亮藍(lán)G-250試劑顯色，搖勻，放置2 min，利用UV-2550分光光度計(jì)測(cè)定595 nm吸光值。以牛血清蛋白為標(biāo)準(zhǔn)品繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1.2.5 ?莖有效成分含量測(cè)定 ?多糖含量參考《中華人民共和國(guó)藥典》2020版中的苯酚-硫酸法測(cè)定[17];總生物堿含量參考章金輝等[18]的方法;總黃酮含量測(cè)定參考Amri等[19]的方法，并以蘆丁為標(biāo)準(zhǔn)品繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

總氨基酸含量測(cè)定參考魯芹飛[20]的方法稍作改進(jìn)。取0.3 g干燥的鐵皮石斛莖段粉末，置于具塞試管中，加入6 mol/L鹽酸10 mL，110 ℃烘箱中水解24 h，冷卻過(guò)濾，濾液至25 mL容量瓶，加水定容，量取10 mL，用30% NaOH調(diào)至中性，溶液至25 mL容量瓶中，加水定容至刻度。取樣液2.0 mL置于25 mL試管中，加入1.0 mL磷酸鹽緩沖液，1.0 mL 2%茚三酮，搖勻，沸水浴30 min，冷卻加水定容至25 mL，利用UV-2550分光光度計(jì)測(cè)定570 nm吸光值。以天冬氨酸為標(biāo)準(zhǔn)品繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1.3 ?數(shù)據(jù)處理

所有數(shù)據(jù)由平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，使用Excel 2010進(jìn)行作圖，并利用SPSS軟件進(jìn)行差異顯著性分析。

2 ?結(jié)果與分析

2.1 ?CO2倍增對(duì)霍山石斛光合特性的影響

由圖1A可以看出，CO2倍增處理組的Pn在各觀測(cè)的時(shí)間段均顯著高于對(duì)照組。在處理20 d后，對(duì)照組的Pn趨向相對(duì)穩(wěn)定的水平，而處理組在前90 d呈現(xiàn)一個(gè)快速增加的趨勢(shì)，并在第90 d出現(xiàn)了最大值，比同期對(duì)照組顯著增加了51%。90 d之后，處理組的Pn也趨向于相對(duì)穩(wěn)定的水平，由此可知，霍山石斛在CO2倍增條件下處理180 d沒(méi)有出現(xiàn)“光合適應(yīng)”現(xiàn)象。

CO2倍增對(duì)霍山石斛氣孔運(yùn)動(dòng)也有顯著影響，處理組的Gs始終高于同期的對(duì)照組，增加的幅度在9%～50%（圖1B）。試驗(yàn)期內(nèi)，處理組霍山石斛的Tr始終顯著高于對(duì)照組。前30 d對(duì)照組與處理組的Tr均出現(xiàn)增高的趨勢(shì)，處理組的Tr最大值出現(xiàn)在第90 d，比同期的對(duì)照組顯著增加49%（圖1C）。試驗(yàn)的0～30 d，處理組的WUE與對(duì)照組無(wú)顯著差異，后期處理組的WUE得到有效提高，并在第60、150、180 d顯著高于對(duì)照組（圖1D）。

2.2 ?CO2倍增對(duì)葉片可溶性蛋白的影響

由圖2可知，處理30 d時(shí)，處理組和對(duì)照組的單位葉片可溶性蛋白含量均隨霍山石斛的生長(zhǎng)而增加，但兩組之間無(wú)顯著差異。在試驗(yàn)的60～ 180 d，對(duì)照組的單位葉片可溶性蛋白含量基本維持相對(duì)穩(wěn)定的水平，而處理組則呈下降趨勢(shì)，其顯著低于同期的對(duì)照組，且在120 d時(shí)，出現(xiàn)了兩組之間的最大差異值，也是處理組的最小值，比同期對(duì)照組下降了29%。

2.3 ?CO2倍增對(duì)霍山石斛生長(zhǎng)的影響

CO2倍增處理能顯著提高霍山石斛幼苗的存活率（表1、圖3）。處理組在30 d時(shí)，霍山石斛幼苗的存活率達(dá)91.4%，顯著高于對(duì)照組（66.2%）。隨著栽培時(shí)間的延長(zhǎng)，處理組和對(duì)照組的存活率均有所下降，而處理180 d后，處理組的存活率高達(dá)85.6%，仍然顯著高于對(duì)照組（56.2%）。誘導(dǎo)霍山石斛幼苗根的生長(zhǎng)，使其根系能快速地深入栽培基質(zhì)是提高霍山石斛幼苗存活率的重要途徑之一。處理組在30 d時(shí)的著根率為22%，顯著高于對(duì)照組的4.3%，而處理180 d后，著根率高達(dá)97%，是對(duì)照組的2.53倍，同時(shí)，處理組霍山石斛幼苗不管是根長(zhǎng)、根粗還是扎根情況，其根系長(zhǎng)勢(shì)比對(duì)照組更加旺盛。

隨著栽培時(shí)間的推移，霍山石斛分蘗產(chǎn)生的新芽數(shù)逐漸增加，從30 d開始，CO2倍增處理組的霍山石斛幼苗分蘗產(chǎn)生的新芽數(shù)一直顯著高于對(duì)照組，直至處理180 d后，處理組的新芽數(shù)為8.0株/叢，而對(duì)照組的新芽數(shù)僅為3.8株/叢，并且處理組的新芽不僅數(shù)量上明顯高于對(duì)照組，而且在長(zhǎng)勢(shì)上也優(yōu)于對(duì)照組（圖3）。

同時(shí)，霍山石斛處理組的干重和鮮重均顯著高于對(duì)照組，比對(duì)照組分別增加23.5%和18.6%。CO2倍增對(duì)霍山石斛的莖粗和單葉面積無(wú)顯著影響，但顯著增加了霍山石斛的莖高、單株葉片數(shù)和葉片厚度（表2、圖4），而處理組的比葉面積則顯著下降了12%。

2.4 ?CO2倍增對(duì)霍山石斛有效成分的影響

由表3可知，CO2倍增處理能夠影響霍山石斛有效成分。CO2倍增處理顯著提高了霍山石斛莖的多糖含量，相比對(duì)照組提高了94%，而處理組生物堿含量則顯著下降。同時(shí)，莖的總氨基酸含量、總黃酮含量在兩組之間無(wú)顯著差異。

3 ?討論

大氣CO2濃度的提高直接影響植物多種生理代謝，包括提高凈光合速率、降低氣孔導(dǎo)度、進(jìn)而提高水分利用率、生長(zhǎng)速率和產(chǎn)量等[21]。前人對(duì)紅掌[22]、金釵石斛[23]、非洲菊[13]等植物的研究發(fā)現(xiàn)，CO2倍增顯著提高了植物的凈光合速率。本研究中CO2倍增同樣顯著提高了霍山石斛的凈光合速率，在90 d達(dá)到最大值，比同期的對(duì)照組增加了51%，整個(gè)180 d試驗(yàn)期間平均增幅達(dá)27%。不少研究者還發(fā)現(xiàn)，長(zhǎng)期提高栽培環(huán)境中的CO2濃度會(huì)導(dǎo)致植物的光合能力降低，即“光合適應(yīng)”或“光合下調(diào)”，可能的原因是長(zhǎng)期的高CO2濃度降低Rubisco的含量和色素對(duì)光的捕捉能力，進(jìn)而減弱植物的光合能力[24]。在本研究中，霍山石斛在CO2倍增處理180 d后并沒(méi)有出現(xiàn)光合適應(yīng)現(xiàn)象，這與在鐵皮石斛上的結(jié)果一致[25]，但霍山石斛增加處理天數(shù)后的變化則需要進(jìn)一步研究。

氣孔的關(guān)閉受到多種因素的影響，如水分、光照、溫度、CO2濃度等。為了更有效地利用CO2，植物減少了Gs，減少了水分蒸發(fā)。Gs對(duì)大氣CO2濃度增加的響應(yīng)本質(zhì)上是植物對(duì)水資源利用的調(diào)節(jié)，也是植物水分生理的調(diào)節(jié)過(guò)程[13]。Ruhil等[26]發(fā)現(xiàn)高CO2濃度下芥菜的凈光合速率平均提高了48%;氣孔導(dǎo)度平均下降了23%，蒸騰速率下降了39.3%，在非洲菊[13]、大麥[27]上也得到相似的結(jié)果。但在本研究中，CO2倍增提高了霍山石斛氣孔導(dǎo)度和蒸騰速率，鐵皮石斛上也觀察到了類似的情況[25]，這可能的原因是環(huán)境相對(duì)濕度較高，霍山石斛通過(guò)增強(qiáng)氣孔導(dǎo)度以獲取更多的CO2來(lái)進(jìn)行光合作用。雖然處理組的蒸騰速率顯著提高，但隨著處理時(shí)間延長(zhǎng)，還是有效地提高了霍山石斛的水分利用率。

增加CO2濃度能夠提高植物的光合能力，促進(jìn)植物生長(zhǎng)，進(jìn)而增加植物的生物量、產(chǎn)量和干物質(zhì)的積累，但這種作用會(huì)隨著物種、生長(zhǎng)季節(jié)的不同而有所不同[28]。CO2處理能使C3作物增產(chǎn)10%～20%，C4作物增產(chǎn)0%～10%[29-30]。筆者前期發(fā)現(xiàn)CO2倍增能顯著提高鐵皮石斛的鮮重、干重和莖長(zhǎng)，但對(duì)莖粗無(wú)顯著影響[25]。本研究結(jié)果與鐵皮石斛類似，霍山石斛莖的干重和鮮重分別提高了24%和18%，莖長(zhǎng)也顯著提高了21%。同時(shí)，前人發(fā)現(xiàn)高濃度CO2都能促進(jìn)擬南芥根的生長(zhǎng)[31]，而根系的發(fā)達(dá)有利于植物在高濃度CO2下對(duì)水分和氮的獲取和利用[32]。本研究中CO2倍增處理則顯著提高了霍山石斛幼苗的著根率和存活率，并使其根系生長(zhǎng)旺盛，從而有利于植物更好地吸收水分和無(wú)機(jī)鹽，促進(jìn)了新芽的分蘗和生長(zhǎng)，新芽的快速生長(zhǎng)又可以提高霍山石斛的光合能力，增加霍山石斛的物質(zhì)積累，反過(guò)來(lái)促進(jìn)根系的生長(zhǎng)。此外，大部分植物在長(zhǎng)期高CO2濃度條件下都會(huì)出現(xiàn)葉片可溶性蛋白質(zhì)含量下降的現(xiàn)象。對(duì)蝴蝶蘭[33]、芥菜[26]研究發(fā)現(xiàn)，CO2加富均降低了植物葉片的可溶性蛋白質(zhì)含量，而鐵皮石斛在CO2倍增處理120 d時(shí)才出現(xiàn)顯著下降的情況[25]。本研究中霍山石斛在CO2倍增處理60 d時(shí)，單位葉片中可溶性蛋白質(zhì)含量就出現(xiàn)顯著下降的情況，且在120 d時(shí)處理組和對(duì)照組的差異達(dá)到最大值。這可能與CO2濃度升高使Rubisco含量的下降有關(guān)[34]，而Moore等[24]也發(fā)現(xiàn)長(zhǎng)期CO2加富會(huì)導(dǎo)致Rubisco蛋白基因表達(dá)下調(diào)，編碼Rubisco蛋白的小亞基轉(zhuǎn)錄水平也出現(xiàn)下調(diào)。

增加CO2濃度還會(huì)誘導(dǎo)植物的營(yíng)養(yǎng)組分發(fā)生變化，進(jìn)而改變作物的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。Mamatha等[10]發(fā)現(xiàn)CO2施肥能顯著增加了番茄的氨基酸含量，約為16.13%，但處理組的總酚、總黃酮、抗氧化物質(zhì)、類胡蘿卜素和番茄紅素含量均出現(xiàn)了下降。筆者前期發(fā)現(xiàn)CO2倍增處理鐵皮石斛180 d后，其莖中的多糖、生物堿、總氨基酸和總黃酮含量均與對(duì)照無(wú)顯著差異[25]。本研究中，CO2倍增對(duì)霍山石斛莖的有效成分的影響是不同的，其中多糖含量顯著增加了94%，而生物堿含量顯著降低了20%，總黃酮和總氨基酸含量則變化不顯著?！吨腥A人民共和國(guó)藥典》2020版規(guī)定霍山石斛的多糖含量不得少于17%（以干燥品計(jì)）[17]，而隨著栽培時(shí)間的延長(zhǎng)，霍山石斛多糖含量也會(huì)不斷積累，其中以兩年生霍山石斛莖中多糖積累量最高[35]。筆者對(duì)霍山石斛僅栽培了180 d，尚未完全成熟，但兩組之間的顯著差異說(shuō)明CO2倍增有利于霍山石斛莖中多糖的積累。

參考文獻(xiàn)

[1] 王德群. 安徽省特有植物的分類、分布和藥用類群[J]. 中國(guó)中藥雜志， 1999， 24（8）： 451-454.

[2] Zha X Q， Zhao H W， Bansal V， et al. Immunoregulatory activities of Dendrobium huoshanense polysaccharides in mouse intestine， spleen and liver[J]. International Journal of Biological Macromolecules， 2014（64）： 377-382.

[3] Wang S， Wei F J， Cai Y P， et al. Anti-oxidation activity in vitro of polysaccharides of Dendrobium Huoshanese and Dendrobium moniliforme[J]. Journal of Agricultural Science and Technology， 2009， 10（6）： 121-124.

[4] Li X L， Xiao J J， Zha X Q， et al. Structural identification and sulfated modification of anantiglycation Dendrobium huoshanense polysaccharide[J]. Carbohydrate Polymers， 2014（106）： 247-254.

[5] 徐云昌， 于力文， 吳慶生， 等. 霍山石斛的光合特性研究. 應(yīng)用生態(tài)學(xué)報(bào)[J]. 1993（1）： 18-21.

[6] Bindi M， Fibbi L， Miglietta F. Free air CO2 enrich-ment（FACE）of grapevine （Vitis vinifera L.）： II. growth and quality of grape and wine in response to elevated CO2 con-centrations[J]. European Journal of Agronomy， 2001， 14（2）， 145-155.

[7] Tausz M， Tausz-posch S， Norton R M， et al. Understanding crop physiology to select breeding targets and improve crop management under increasing atmospheric CO2 concentra-tions[J]. Environmental and Experimental Botany. 2013， 88（4）： 71-80.

[8] Ma H L， Zhu Z B， Gang L， et al. Responses of rice and winter wheat to free-air CO2 enrichment （China FACE） at rice/ wheat rotation system[J]. Plant Soil， 2007， 294（1-2）： 137-146.

[9] Xia Y H， Cui S M， Liu J C， et al. The effects of elevated CO2 on the content of carbohydrate and starch to high tem-perature in cucumber[J]. Journal of Inner Mongolia Agriculture. University， 2013， 34（4）： 16-20.

[10] Mamatha H， Rao N K S， Laxman R H， et al. Impact of ele-vated CO2 on growth， physiology， yield and quality of tomato （Lycopersicon esculentum Mill） cv. Arka Ashish[J]. Photosynthetica， 2014， 52（4）： 519-528.

[11] Saleh A M， Selim S， ?Jaounie S A， et al. CO2 enrichment can enhance the nutritional and health bene?ts of parsley （Petroselinum crispum L.） and dill （Anethum graveolens L.） [J]. Food Chemistry， 2018（269）： 519-526.

[12] Silberbush M， Ephrath J E， Alekperov C， et al. Nitrogen and potassium fertilization interactionswith carbon dioxide enrichment in Hippeastrum bulb growth[J]. Science Horti-culturae， 2003， 98（1）： 85-90.

[13] Xu S P， Zhu X S， Li C， et al. Effects of CO2 enrichment on photosynthesis and growth in Gerbera jamesonii[J]. Science Horticulturae， 2014（177）： 77-84.

[14] Cho A R， Song S J， Chung S W， et al. CO2 enrichment with higher light level improves flowering quality of Phalaenop-sis Queen Beer ‘Mantefon[J]. Science Horticulturae， 2019（247）： 356-361.

[15] 劉漢峰， 王 ?雁， 沈應(yīng)柏. CO2倍增對(duì)鼓槌石斛光合作用特性的影響[J]. 廣東農(nóng)業(yè)科學(xué)， 2012， 39（7）： 6-9.

[16] Bradford M M. A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding[J]. Analytical Biochemistry， 1976， 72（1-2）： 248-254.

[17] 國(guó)家藥典委員會(huì). 中華人民共和國(guó)藥典[M]. 北京： 中國(guó)醫(yī)藥科技出版社， 2020.

[18] 章金輝， 王再花， 李 ?杰， 等. 大苞鞘石斛與鐵皮石斛主要活性成分比較分析[J]. 熱帶作物學(xué)報(bào)， 2015， 36（12）： 2192-2197.

[19] Amri Z， Zaouay F， Lazreg-aref H. et al. Phytochemical content， fatty acids composition and antioxidant potential of different pomegranate parts： comparison between edible and non edible varieties grown in Tunisia[J]. International Journal of Biological Macromolecules， 2017（104）： 274-280.

[20] 魯芹飛. 鐵皮石斛質(zhì)量評(píng)價(jià)及干燥工藝研究[D]. 廣州： 廣州中醫(yī)藥大學(xué)， 2014.

[21] Kooi C J V D， Reich M， L?w M， et al. Growth and yield stimulation under elevated CO2 and drought： A meta-analysis on crops[J]. Environmental and Experimental Botany， 2016（122）： 150–157.

[22] 吉 ?燕. CO2加富對(duì)紅掌（Anthurium andraeanum Lind）光合速率和生長(zhǎng)發(fā)育的影響[D]. 廣州： 華南師范大學(xué)， 2010.

[23] 閔倫仔. CO2加富對(duì)金釵石斛光合速率和生長(zhǎng)的影響[D]. 廣州： 華南師范大學(xué)， 2013.

[24] Moore B D， Cheng S H， Rice J， et al. Sucrose cycling， Ru-bisco expression， and prediction of photosynthetic acclima-tion to elevated atmospheric CO2[J]. Plant Cell and Envi-ronment， 1998， 21（8）： 905-915.

[25] 何 ?梅， 章金輝， 王再花， 等. CO2倍增對(duì)鐵皮石斛光合特性和生長(zhǎng)的影響[J]. 廣東農(nóng)業(yè)科學(xué)， 2020， 47（2）： 17-23.

[26] Ruhil K， Sheeba， Ahmad A， et al.， Photosynthesis and growth responses of mustard （Brassica juncea L. cv Pusa Bold） plants to free air carbon dioxide enrichment （FACE）[J]. Protoplasma， 2015， 252（4）： 935-946.

[27] Schmid I， Franzaring J， Müller M， et al. Effects of CO2 enrichment and drought on photosynthesis， growth and yield of an old and a modern barley cultivar[J]. Journal of Agronomy And Crop Science， 2015， 202（2）： 81-95.

[28] Ziska L H， Morris C F， Goins E W. Quantitative and qualitative evaluation of selected wheat varieties released since 1903 to increasing atmospheric carbon dioxide： can yield sensitivity to carbon dioxide be a factor in wheat performance？[J]. Global Change Biology， 2004， 10（1）： 1810-1819.

[29] Gifford R M. The CO2 fertilising effect–does it occur in the real world[J]. New Phytologist， 2004， 163（2）： 221-225.

[30] Long S P， Aisworth E A， Roger A， et al. Rising atmospheric carbon dioxide： plants FACE the future[J]. Annual Review of Plant Biology， 2004（55）： 591-628.

[31] Takushi H， Daisuke S， Mikiko K， et al. High CO2 triggers preferential root growth of Arabidopsis thaliana via two distinct systems under low pH and low N stresses[J]. Plant and Cell Physiology， 2014， 55（2）： 269-280.

[32] Gray S， Toal T， Brady S. The effects of elevated at-mospheric CO2 on root and shoot gene expression and metabolite profiles of Solanum lycopersicum and Solanum pennellii[J]. Plant and Animal Genome XXIV Conference， 2016， 10（7）： 8-13.

[33] 李華云. CO2加富對(duì)蝴蝶蘭（Phalaenopsis）生長(zhǎng)發(fā)育的影響[D]. 廣州： 華南師范大學(xué)， 2007.

[34] Long S， Baker N R， Raines C A. Analysing the responses of photosynthetic CO2 assimilation to long-term elevation of atmospheric CO2 concentration[J]. Plant Ecology， 1992， 104（1）： 33-45.

[35] 陳乃東， 陳乃富， 王陶陶， 等. 組培霍山石斛、野生霍山石斛及河南石斛多糖及乙醇溶出物動(dòng)態(tài)積累規(guī)律研究[J]. 天然產(chǎn)物研究與開發(fā)， 2015， 27（12）： 2090-2094.

責(zé)任編輯：白 ?凈