楊水仙

（眉山市農(nóng)業(yè)農(nóng)村局 620020）

氟喹諾酮類屬于含氟第三代喹諾酮類化學(xué)合成抗生素，作用機(jī)制為抑制細(xì)菌的DNA旋轉(zhuǎn)酶，阻礙DNA的正常復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、轉(zhuǎn)運(yùn)與重組，從而阻斷細(xì)菌的繁殖，起到抗菌作用。常用的沙星類藥物由于對(duì)多種革蘭氏陰性菌均具有良好的抗菌效果，且價(jià)格低廉，用藥方便，在畜禽及水產(chǎn)養(yǎng)殖中被廣泛應(yīng)用于預(yù)防和治療感染性疾病，是常用的三大獸藥之一。但是氟喹諾酮類藥物殘留嚴(yán)重，本文主要通過(guò)批量監(jiān)測(cè)不同區(qū)域、不同養(yǎng)殖規(guī)模點(diǎn)位的禽肉蛋中氟喹諾酮類獸藥殘留情況、為禽肉蛋中氟喹諾酮類獸藥殘留研究提供數(shù)據(jù)支撐。

1 材料與方法

1.1 樣品來(lái)源和采集

抽檢眉山市轄區(qū)范圍內(nèi)規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)、養(yǎng)殖大戶禽肉蛋樣品共360批次，其中無(wú)公害禽肉蛋為必抽點(diǎn)。全部樣品均實(shí)行現(xiàn)場(chǎng)抽樣、封樣，抽樣按照《動(dòng)物及動(dòng)物產(chǎn)品獸藥殘留監(jiān)控抽樣程序》（NY/T 1897-2010）執(zhí)行。

1.2 儀器

液相三重四極桿質(zhì)譜（Ultimate 3000 RSLC TSQ Quantum Ultra, Thermo Fisher scientific）、冷凍離心機(jī)（ eppendoff 5804R）、電子天平（美國(guó)奧豪斯, SE602F,d=0.01mg ），多功能混勻器（ESSENSCIEN, Vortex Mixer V7 ）、超高速勻漿機(jī)（IKA，T18 digital UliRa）、氮空吹掃濃縮儀（北京斯珀特科技有限公司，SPT-24）、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（IKA，RV10BS25）、冷卻水循環(huán)系統(tǒng)（北京長(zhǎng)流科技儀器有限公司，LX600）。

1.3 耗材、試劑及標(biāo)準(zhǔn)品

固相萃取中性交換柱（HLB、200mg/6mL，30支/盒，Agilent）、屈臣氏去離子水，甲醇、乙腈、正己烷、甲酸、乙酸均為色譜純，氫氧化鈉、磷酸二氫鉀為分析純。 標(biāo)準(zhǔn)品為氧氟沙星、培氟沙星、諾氟沙星、洛美沙星、恩諾沙星、環(huán)丙沙星、沙拉沙星、達(dá)氟沙星混合儲(chǔ)備液，內(nèi)標(biāo)為恩諾沙星 D5 ，均為農(nóng)業(yè)農(nóng)村部，濃度為 100mg/L。

1.4 檢測(cè)方法及樣品前處理

實(shí)驗(yàn)前處理均按照《動(dòng)物源性食品中14種喹諾酮藥物殘留檢測(cè)方法 液相色譜—質(zhì)譜/質(zhì)譜法》（GB21312-2007）進(jìn)行提取、凈化?；|(zhì)混標(biāo)配制梯度濃度為0ug/L、1ug/L、2ug/L、4ug/L、8ug/L、16ug/L、32ug/L、64ug/L。

1.5 檢測(cè)條件

色譜柱： Agela Bonshell C18 2.7um，2.1*100mm，cat.no:s c921002-0

流動(dòng)相： A 相 0.1%甲酸、4mmol/l 甲酸銨水溶液 ，B 相0.1%甲酸、4mmol/l 甲酸銨甲醇（金標(biāo)）溶液 流速： 0.3mL/min

柱溫：40℃ 進(jìn)樣體積： 5μL

梯度洗脫程序見(jiàn)下表 1:

時(shí)間（min） A(%) B(%)0～0.5 90 10 7.5～9.5 0 100 9.6～12 90 10

離子源及掃描方式：電噴霧離子源（ ESI+ ） , 多反應(yīng)離子監(jiān)測(cè)（ MRM ）

離子源溫度： 300℃；噴霧電壓： 3500V；碰撞器壓力mTorr： 1.5；輔助器流速mL/min：10；輔助器流速mL/min：30

1.6 樣品檢測(cè)參數(shù)及參考標(biāo)準(zhǔn)：

檢測(cè)參數(shù) 檢測(cè)方法 殘留限量（ μg/kg） 檢出限（ μg/kg）洛美沙星禽肉、蛋中不得檢出 0.5培氟沙星 禽肉、蛋中不得檢出 1.0氧氟沙星 禽肉、蛋中不得檢出 0.5諾氟沙星 禽肉、蛋中不得檢出 1.0恩諾沙星 禽蛋中不得檢出、禽肉中總量≤100 0.5環(huán)丙沙星 禽蛋中不得檢出、禽肉中總量≤100 1.2沙拉沙星 禽蛋中不得檢出、禽肉中總量≤10 1.0達(dá)氟沙星 禽蛋中不得檢出、禽肉中總量≤100 0.5 GB/T 21312-2007

2 結(jié)果與分析

2.1 總體情況

抽檢眉山市轄區(qū)范圍內(nèi)的360批次樣品（118批次雞肉、230批次雞蛋，12批次鴨蛋，見(jiàn)圖 1）共計(jì)來(lái)自88個(gè)監(jiān)測(cè)點(diǎn)，其中龍頭企業(yè)12個(gè)，專合社28個(gè)，家庭農(nóng)場(chǎng)15個(gè)，散戶33個(gè)，包括5個(gè)無(wú)公害養(yǎng)殖場(chǎng)，見(jiàn)圖 2。其中，雞蛋類數(shù)量最多，占63.89%；散戶和專合監(jiān)測(cè)點(diǎn)位數(shù)偏多，分別占比37.5%和31.8%。共計(jì)有獸藥殘留檢出4批次，均為恩諾沙星檢出。其中雞肉中檢出2批次，未超標(biāo)，見(jiàn)圖3；雞蛋中檢出2批次，均為不合格樣品，見(jiàn)圖4，樣品合格率為 99.44%。

2.2 超標(biāo)批次蛋雞獸藥衰減變化趨勢(shì)

對(duì)檢出不合格的蛋雞養(yǎng)殖場(chǎng)養(yǎng)殖戶進(jìn)行監(jiān)控，要求不合格批次的蛋雞40d不能使用獸藥，單獨(dú)進(jìn)行正常飼養(yǎng)，每隔20d抽取所監(jiān)控蛋雞產(chǎn)的雞蛋進(jìn)行檢測(cè)，超標(biāo)1組首次抽檢日期為4月21日，恩諾沙星檢測(cè)值為33.53 ug/kg ，二次抽檢樣品日期為5月11日，恩諾沙星檢測(cè)值為3.15ug/kg；三次抽檢日期為5月30日恩諾沙星檢測(cè)值為0ug/kg。超標(biāo)2組首次抽檢日期為8月7日，恩諾沙星檢測(cè)值15.32ug/kg ，二次抽檢日期為8月27日，恩諾沙星檢測(cè)值為4.09ug/kg，三次抽檢日期為9月16日，恩諾沙星檢測(cè)值0ug/kg。超標(biāo)1組20天恩諾沙星衰減率90.60%，超標(biāo)2組20天恩諾沙星衰減率73.30%.兩組恩諾沙星殘留衰減率略有差異。見(jiàn)圖5。

3 討論

3.1 眉山市禽肉蛋中獸藥殘留檢出情況與四川省除眉山以外省級(jí)例行畜禽獸藥殘留整體情況比較。

從2020年四川省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳省級(jí)例行監(jiān)測(cè)情況通報(bào)來(lái)看，全省除眉山以外其他地區(qū)累計(jì)抽檢禽肉590批次，合格率98.8%，禽肉樣品中檢出不合格參數(shù)主要為允許使用的恩諾沙星(1次)和停止使用藥物氧氟沙星（6次），眉山市各類任務(wù)抽檢的118批次雞肉樣品中，檢出恩諾沙星2次，均未超標(biāo)。全省除眉山以外省級(jí)抽檢禽蛋980批次，合格率98.9%，禽蛋樣品中檢出不合格參數(shù)均為恩諾沙星（以恩諾沙星和環(huán)丙沙星之和計(jì)），眉山抽檢的242批次禽蛋樣品中，檢出恩諾沙星2次，均超標(biāo)，合格率99.17%。其次，從全省畜產(chǎn)品獸藥殘留監(jiān)測(cè)情況及平時(shí)工作中畜產(chǎn)品監(jiān)測(cè)情況來(lái)看，豬牛羊肉中基本沒(méi)有常規(guī)獸藥殘留檢出的情況，禽肉蛋氟喹諾酮類殘留問(wèn)題更突出。

3.2 兩組超標(biāo)實(shí)驗(yàn)組恩諾沙星獸藥衰減情況比較

兩組超標(biāo)實(shí)驗(yàn)組恩諾沙星獸藥衰減率略有差異，可能跟蛋雞個(gè)體差異、季節(jié)性預(yù)防用藥量、水質(zhì)、飼料配方、飼養(yǎng)方式、環(huán)境溫度等因素有關(guān)。整體來(lái)看30天以上休藥期較為安全。