張媛媛，黃 為，劉 華，馬小松，周全華△

(1.重慶市疾病預(yù)防控制中心，重慶 400042；2.重慶市預(yù)防醫(yī)學(xué)會(huì)，重慶 400042)

獲得性免疫缺陷綜合征又稱為艾滋病，是感染人類免疫缺陷病毒(HIV)而引發(fā)的獲得性免疫系統(tǒng)缺陷疾病，此病毒進(jìn)入人體后專性侵犯免疫系統(tǒng)中最重要的CD4+T淋巴細(xì)胞，破壞人體免疫系統(tǒng)，使人體失去抵抗力，易于感染各種病毒以致各種并發(fā)癥，具有傳播迅速、發(fā)病緩慢、病死率高等特點(diǎn)，至今尚無(wú)有效疫苗，是一種嚴(yán)重威脅人類健康和社會(huì)發(fā)展的重大傳染病。對(duì)人感染HIV的診斷主要依賴于實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)，其中抗體檢測(cè)常規(guī)篩查方法有快速檢測(cè)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)及其他試驗(yàn)，包括化學(xué)發(fā)光或免疫熒光試驗(yàn)。HIV檢測(cè)補(bǔ)充實(shí)驗(yàn)有抗體確證試驗(yàn)[WB(免疫印跡法)、重組免疫印跡法/線性免疫法(RIBA/LIA)]和核酸檢測(cè)。早發(fā)現(xiàn)、早診斷、早治療是防控艾滋病的關(guān)鍵。目前，重慶市對(duì)HIV檢測(cè)的流程為各個(gè)篩查實(shí)驗(yàn)室對(duì)采集的血液樣本進(jìn)行初次篩查，若有反應(yīng)則進(jìn)行雙孔/雙份或2種試劑復(fù)檢，復(fù)檢有反應(yīng)則送樣到該轄區(qū)確證實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行確證試驗(yàn)，確證實(shí)驗(yàn)室收到樣本后對(duì)其再次復(fù)核，若仍為有反應(yīng)則進(jìn)行確證試驗(yàn)。為避免給患者或疑似患者人群帶來(lái)心理恐慌，重慶市HIV檢測(cè)網(wǎng)絡(luò)系統(tǒng)通過(guò)多年的建設(shè)及完善，對(duì)樣本采集、信息填報(bào)、運(yùn)輸?shù)雀鳈z測(cè)流程嚴(yán)格把控，以確保每份樣本檢測(cè)結(jié)果分析的準(zhǔn)確性。為了解重慶市HIV感染狀況和篩查與確認(rèn)的符合情況，指導(dǎo)臨床醫(yī)師對(duì)患者感染狀況進(jìn)行預(yù)判，做好個(gè)人職業(yè)防護(hù)，本研究對(duì)2017-2019年重慶市屬各醫(yī)院、疾病預(yù)防控制(疾控)中心及性病門診檢測(cè)點(diǎn)送檢的HIV抗體篩查有反應(yīng)性血液樣本進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)分析，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1材料

1.1.1樣本來(lái)源 2020年6月收集重慶市艾滋病確證中心實(shí)驗(yàn)室轄區(qū)各篩查實(shí)驗(yàn)室2017-2019年送檢的初篩有反應(yīng)性樣本，以及非政府組織和性病門診檢測(cè)點(diǎn)采集的樣本9 010份，其中有反應(yīng)性4 754份。

1.1.2試劑及儀器 篩查試劑為BIO-RAD HIV抗原抗體診斷試劑盒(酶聯(lián)免疫法)，每盒576人份，Alere DetermineTMHIV 1+2型抗體檢測(cè)試劑盒(膠體硒法)，100個(gè)測(cè)試/包裝袋。確證試劑為新加坡MP生物醫(yī)學(xué)亞太私人有限公司生產(chǎn)的HIV BLOT2.2 HIV 1+2抗體測(cè)試試劑盒(免疫印跡法)，每盒36人份，Mikrogen GmbH德國(guó)麥克萊金公司生產(chǎn)的HIV 1+2抗體確證試劑盒(條帶免疫法)，每盒20人份。本研究所使用試劑均經(jīng)國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局注冊(cè)批準(zhǔn)，且均在有效期內(nèi)使用。檢測(cè)儀器為Autobio PHOMO酶標(biāo)儀、Autobio IWO960洗板機(jī)、TECAN ProfiBlot48全自動(dòng)蛋白印跡儀等，所有儀器均經(jīng)檢定校準(zhǔn)合格。

1.2方法

1.2.1HIV檢測(cè) 常用的HIV篩查試驗(yàn)有酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、化學(xué)發(fā)光或免疫熒光試驗(yàn)、快速檢測(cè)及其他試驗(yàn)[1]。對(duì)送檢有反應(yīng)性的樣本采用法國(guó)伯樂(lè)4代HIV抗原抗體診斷試劑盒(酶聯(lián)免疫法)和美國(guó)雅培膠體硒(硒標(biāo)法)3代抗體檢測(cè)試劑同時(shí)進(jìn)行復(fù)檢，任一樣本有反應(yīng)性均進(jìn)行確證試驗(yàn)。試劑均在有效期內(nèi)使用，試驗(yàn)步驟嚴(yán)格按試劑盒說(shuō)明書(shū)和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)操作程序操作，結(jié)果按試劑盒說(shuō)明書(shū)要求進(jìn)行判斷。

1.2.2HIV抗體確證試驗(yàn) 對(duì)2種方法復(fù)檢均有反應(yīng)和任一方法有反應(yīng)樣本進(jìn)行確證試驗(yàn)，常用的確證試驗(yàn)有WB和RIBA/LIA。所用試劑均在有效期內(nèi)，試驗(yàn)步驟嚴(yán)格按試劑盒說(shuō)明書(shū)和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)操作程序操作，結(jié)果按《全國(guó)艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范》(2015年修訂版)要求并結(jié)合試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行判斷。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用Excel2007軟件建立數(shù)據(jù)庫(kù)，應(yīng)用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)數(shù)資料以率或構(gòu)成比表示，采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1檢測(cè)結(jié)果 有反應(yīng)性4 754份樣本中無(wú)患者個(gè)人信息253份、既往感染者112份，故對(duì)4 389份樣本進(jìn)行確證，其中確證陽(yáng)性4 227份(WB：2 509份，RIBA：1 718份)，不確定87份，陰性75份。見(jiàn)表1。

表1 2017-2019年HIV復(fù)檢有反應(yīng)樣本確證試驗(yàn)結(jié)果

2.2確證陽(yáng)性樣本性別分布 4 227份樣本中男3 464例(81.95%)，女763例(18.05%)，男女比例為4.54∶1。不同性別樣本W(wǎng)B、RIBA陽(yáng)性檢出率比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)表2。

表2 確證陽(yáng)性樣本性別分布

2.3確證陽(yáng)性樣本年齡分布 4 227份樣本患者年齡主要分布在20～<30、≥60歲，分別占25.05%、23.33%。各年齡段樣本W(wǎng)B、RIBA陽(yáng)性檢出率比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=1.157，P>0.05)。見(jiàn)圖1。

圖1 HIV確證陽(yáng)性樣本年齡分布

2.4確證陽(yáng)性樣本來(lái)源分布 4 389份樣本中WB檢測(cè)2 601份，RIBA檢測(cè)1 788份；門診和住院患者、男男性行為、自愿咨詢檢測(cè)占比均較高，WB分別為40.48%、27.64%、23.88%，RIBA分別為42.23%、26.45%、25.84%；其余來(lái)源占比均較低。見(jiàn)表3。

表3 確證陽(yáng)性樣本來(lái)源分布

2.5確證陽(yáng)性樣本W(wǎng)B、RIBA各條帶陽(yáng)性率比較 WB檢測(cè)結(jié)果中g(shù)p160陽(yáng)性率最高(100.00%)，RIBA檢測(cè)結(jié)果中g(shù)p41陽(yáng)性率最高(100.00%)。見(jiàn)表4。

表4 確證陽(yáng)性樣本W(wǎng)B、RIBA各條帶陽(yáng)性率比較

2.6不確定樣本帶型分布 87份樣本中單一條帶gp160、gp41、p24陽(yáng)性率分別為28.74%、20.69%、6.90%。gp120.gp160陽(yáng)性率為3.45%，p24.gp160陽(yáng)性率為32.18%。見(jiàn)表5。

表5 不確定樣本帶型分布

2.7不確定樣本首次確證帶型轉(zhuǎn)陽(yáng)情況 87份樣本中追蹤到55份樣本轉(zhuǎn)陽(yáng)，其中第1次確證結(jié)果出現(xiàn)gp160、p24、gp41轉(zhuǎn)陽(yáng)率分別為70.91%、45.45%、20.00%。見(jiàn)表6。

表6 轉(zhuǎn)陽(yáng)樣本首次確證帶型陽(yáng)轉(zhuǎn)情況(n=55)

3 討 論

重慶市2017-2019年送檢的9 010份抗體篩查有反應(yīng)樣本經(jīng)復(fù)查有反應(yīng)率為52.76%(4 754/9 010)，陽(yáng)性率低于相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道(62.19%)[2]，與重慶市艾滋病防治工作的大力宣傳貫徹密切相關(guān)。在查重和個(gè)人自愿確證條件下對(duì)4 389份有反應(yīng)樣本進(jìn)行了確證試驗(yàn)，陽(yáng)性4 227份(96.31%)，不確定87份(1.98%)，陰性75份(1.71%)，確證陽(yáng)性率與羅小莉等[2]報(bào)道相近(92.81%)。

確證陽(yáng)性樣本中男性多于女性，男女比例(4.5∶1)高于全國(guó)平均水平(3.2∶1)[3]，可能與重慶市早期以吸毒傳播，近期以男男性行為感染者較多有關(guān)。確證陽(yáng)性樣本主要分布在20～<30歲人群中,其次大于或等于60歲人群。提示感染者以青年和老年人為主，可能與重慶市男男性行為人群規(guī)模較大、感染率較高有關(guān)，隨著社交方式的便利化，發(fā)生無(wú)保護(hù)性行為居高不下?！?0歲老年人群也占有較高的比例，說(shuō)明該人群仍有活躍的性需求。提示不僅要著重加強(qiáng)對(duì)青年人群開(kāi)展健康教育與干預(yù)，對(duì)大于或等于60歲老年群體也要進(jìn)行相應(yīng)的性安全教育宣傳、避孕套的推廣使用和采取其他相關(guān)的干預(yù)措施[4-5]。

本研究涉及的篩查實(shí)驗(yàn)室有醫(yī)療機(jī)構(gòu)、疾控中心和性病門診檢測(cè)點(diǎn)。其中門診和住院患者樣本主要來(lái)自醫(yī)療機(jī)構(gòu)，自愿咨詢檢測(cè)人群樣本主要來(lái)源于疾控中心，男男性行為樣本一般來(lái)自非政府組織和性病門診檢測(cè)點(diǎn)。本研究結(jié)果顯示，篩查有反應(yīng)性樣本主要以門診和住院患者為主，其次為男男性行為和自愿咨詢檢測(cè)人群，而性工作者和非商非固異性性行為者占比較低，可能與社會(huì)、道德等因素有關(guān)，促使性工作者和非商非固異性性行為這類比較隱蔽的人歸類于自愿咨詢檢測(cè)中[6]。

在2014年聯(lián)合國(guó)艾滋病規(guī)劃署提出的“2020年實(shí)現(xiàn)3個(gè)90%，2030年終結(jié)艾滋病的流行”[7-8]的防治目標(biāo)下，重慶市各檢測(cè)、監(jiān)測(cè)機(jī)構(gòu)加大了對(duì)各人群進(jìn)行艾滋病篩查的力度。本研究HIV感染者主要來(lái)源于醫(yī)療機(jī)構(gòu)，說(shuō)明醫(yī)療系統(tǒng)仍為重慶市最有效的檢測(cè)監(jiān)測(cè)系統(tǒng)，與相關(guān)研究結(jié)果相符[9-10]。

本研究使用了2種方法進(jìn)行確證實(shí)驗(yàn)，分別對(duì)2種方法確證陽(yáng)性樣本進(jìn)行了條帶分析。結(jié)果顯示，WB檢測(cè)結(jié)果中3組帶型以膜蛋白基因帶型檢出率最高(>98.00%)，與王萬(wàn)海等[11]研究結(jié)果一致，核衣殼蛋白基因帶型中各帶差異較大，檢出率最高的是p24，而p55、p39檢出率較低，與WANG等[12]研究結(jié)論相似。RIBA檢測(cè)結(jié)果中檢出率最高的是gp41，而p17及2型帶gp105、gp36檢出率均較低?？赡芘cHIV-2在我國(guó)未流行有關(guān)，但2017年湖南有當(dāng)?shù)豀IV-2非輸入性流行病例的報(bào)道[13]。因此，對(duì)HIV-2的檢測(cè)也應(yīng)高度重視。

在87份不確定樣本中隨訪追蹤到55份樣本轉(zhuǎn)陽(yáng)，其首次檢測(cè)結(jié)果中g(shù)p160、p24、gp41轉(zhuǎn)陽(yáng)率均較高，與謝思燕等[14]研究結(jié)果一致，說(shuō)明這些抗體在患者體內(nèi)出現(xiàn)較早，對(duì)后期防控工作具有一定的提示作用。同時(shí)也提示重慶市不確定樣本大多數(shù)是處于窗口期或晚期患者，由于窗口期和晚期患者具有較高的病毒載量，其傳播風(fēng)險(xiǎn)也較高[15]。因此，應(yīng)加大不確定樣本的隨訪和追蹤檢測(cè)。

確證陽(yáng)性結(jié)果常用于為早診斷、早治療提供依據(jù)，要求患者及時(shí)進(jìn)行抗病毒治療，以降低病毒在體內(nèi)的增長(zhǎng)，提高其生活質(zhì)量，延長(zhǎng)患者壽命，尤為重要的是對(duì)確證結(jié)果為不確定或陰性樣本的分析，需進(jìn)一步進(jìn)行核酸檢測(cè)，對(duì)HIV窗口期或晚期患者采取相應(yīng)的防治措施具有極其重要的意義。

綜上所述，艾滋病篩查機(jī)構(gòu)送檢樣本陽(yáng)性率較高，確證率高，人群分布廣泛，青壯年人群性行為活躍，應(yīng)對(duì)該人群加大行為干預(yù)和檢測(cè)力度，爭(zhēng)取做到早預(yù)防、早發(fā)現(xiàn)、早診斷、早治療。