余祖輝

廣西壯族自治區(qū)防城港市防城區(qū)人民醫(yī)院檢驗科,廣西防城港 538021

再生障礙性貧血以骨髓造血功能障礙和全血細胞減少為主要臨床特點，病情嚴重時患者可能出現(xiàn)感染或者出血，從而導致死亡[1]。目前，導致人體全血細胞減少的疾病種類繁多，發(fā)病機制和病因各異，如何鑒別再生障礙性貧血對其臨床治療和診斷具有重要意義[2]。骨髓細胞學檢測是再生障礙性貧血診斷的“金標準”[3]。白細胞主要分為粒細胞、單核細胞和淋巴細胞，在機體免疫和抗感染過程中發(fā)揮重要作用，白細胞異常與貧血、感染和腫瘤等疾病的發(fā)生密切相關[4]。鐵蛋白是一種鐵貯存蛋白，是反映機體營養(yǎng)狀況和鐵貯存情況的重要指標，在人體造血功能及免疫功能中均起到重要作用，其水平異常與貧血和腫瘤等疾病的發(fā)生密切相關[5]。目前，骨髓細胞學檢測能夠直接對骨髓細胞的病理學改變進行檢測，而白細胞計數(shù)(WBC)和鐵蛋白檢測可以作為再生障礙性貧血潛在的輔助性檢查手段，本研究檢測再生障礙性貧血患者的WBC和血清鐵蛋白水平，并對其進行骨髓細胞學檢測，旨在探討三者對再生障礙性貧血的診斷價值。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2015年2月至2020年6月本院診治的91例再生障礙性貧血患者作為觀察組，另選擇同期在本院進行治療的91例非再生障礙性貧血患者作為對照組，并對其進行回顧性分析。觀察組中，男58例，女33例；年齡23～54歲，平均(37.85±8.75)歲；體質(zhì)量指數(shù)(BMI)為16.5～20.4 kg/m2，平均(18.21±1.12)kg/m2。納入標準：(1)符合2018年美國血液學協(xié)會制定的再生障礙性貧血診斷標準[6]；(2)入院后行骨髓細胞學檢測；(3)臨床資料完整。排除標準：(1)入院前接受過抗貧血藥物治療；(2)存在肝腎功能障礙；(3)存在全身性感染性疾??；(4)存在腫瘤；(5)妊娠期及哺乳期。對照組中，男54例，女37例；年齡20～55歲，平均(38.41±9.53)歲；BMI為16.0～21.1 kg/m2，平均(18.11±1.41)kg/m2；缺鐵性貧血36例，巨幼細胞性貧血19例，慢性病性貧血24例，溶血性貧血12例。兩組的性別比例和年齡等一般資料比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2方法

1.2.1骨髓細胞學檢查 對患者進行局部麻醉后，選擇患者的胸骨、髂前骨或髂后骨進行穿刺，在嚴格無菌操作下取出少量患者骨髓并制作成骨髓涂片，涂片經(jīng)瑞氏染色后進行分析。

1.2.2骨髓鐵染色檢測 對上述骨髓涂片進行鐵染色，使用20%的酸性亞鐵氰化鉀進行染色，染色時間為30 min，染色結束后使用流水沖洗涂片，干燥后于倒置顯微鏡下觀察。細胞內(nèi)鐵計算：觀察100個紅細胞，計算細胞質(zhì)中存在藍色鐵粒的細胞個數(shù)所占百分比。細胞外鐵評級：無藍色鐵粒則為“-”，有少量藍色鐵粒則為“+”，有較多藍色鐵粒則為“++”，有很多藍色鐵粒則為“+++”，有極多藍色鐵粒則為“++++”[7]。

1.2.3WBC及血清鐵蛋白檢測 患者入院后采集空腹靜脈血3 mL，室溫靜置30 min，5 000 r/min離心15 min。收集上清液至另一潔凈離心管中用于后續(xù)檢測。采用邁瑞全自動血液分析儀(型號：BC-6800)檢測WBC。采用全自動西門子ADVIA Centaur CP化學發(fā)光儀檢測血清鐵蛋白水平，實驗操作嚴格按照試劑盒說明書進行。

2 結 果

2.1兩組WBC、血清鐵蛋白水平比較 觀察組WBC、血清鐵蛋白水平明顯低于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 兩組WBC、血清鐵蛋白水平比較

2.2兩組患者骨髓細胞內(nèi)外鐵測定結果 觀察組細胞內(nèi)鐵明顯低于對照組，而細胞外鐵明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 兩組患者骨髓細胞內(nèi)外鐵測定結果

2.3WBC、血清鐵蛋白和細胞內(nèi)鐵單獨及聯(lián)合診斷再生障礙性貧血的結果比較 選擇WBC、血清鐵蛋白和細胞內(nèi)鐵的平均值作為臨界值，其中WBC<5.21×109/L為陽性，反之為陰性。血清鐵蛋白<65.64 μg/L為陽性，反之為陰性。細胞內(nèi)鐵<28.14%為陽性，反之為陰性。WBC、血清鐵蛋白和細胞內(nèi)鐵單獨及聯(lián)合診斷再生障礙性貧血的符合率分別為79.12%、85.71%、81.32%和93.41%，見表3。

表3 WBC、血清鐵蛋白和細胞內(nèi)鐵單獨及聯(lián)合診斷再生障礙性貧血結果比較(n)

2.4WBC、血清鐵蛋白和細胞內(nèi)鐵單獨及聯(lián)合診斷再生障礙性貧血的特異度、靈敏度、陰性預測值、陽性預測值和約登指數(shù)比較 WBC、血清鐵蛋白和細胞內(nèi)鐵聯(lián)合診斷再生障礙性貧血的特異度、靈敏度、陰性預測值、陽性預測值和約登指數(shù)均高于WBC、血清鐵蛋白和細胞內(nèi)鐵單獨檢測，見表4。

表4 WBC、血清鐵蛋白和細胞內(nèi)鐵單獨及聯(lián)合診斷再生障礙性貧血的特異度、靈敏度、陰性預測值、陽性預測值和約登指數(shù)比較

2.5WBC、血清鐵蛋白和細胞內(nèi)鐵單獨及聯(lián)合診斷再生障礙性貧血的診斷價值分析 WBC、血清鐵蛋白和細胞內(nèi)鐵單獨及聯(lián)合診斷再生障礙性貧血的ROC曲線的AUC值分別為0.785、0.820、0.902和0.977(P<0.05)，漸進95%CI分別為0.729～0.832、0.771～0.874、0.845～0.962、0.754～0.869、0.921～0.998。見圖1。

圖1 WBC、血清鐵蛋白和細胞內(nèi)鐵單獨及聯(lián)合檢測診斷再生障礙性貧血的價值分析

3 討 論

造血干細胞功能障礙、免疫功能異常及造血微環(huán)境紊亂是再生障礙性貧血的主要發(fā)病機制，有研究結果顯示，遺傳因素也與再生障礙性貧血的發(fā)病密切相關[8]。而再生障礙性貧血的治療方式包括粒細胞輸注、免疫抑制治療及促造血治療等，這些治療方式對早期再生障礙性貧血患者具有較好的臨床治療效果，而對于重型再生障礙性貧血患者的治療效果不佳[9]。因此，探究與再生障礙性貧血發(fā)病密切相關的生理生化指標，并將其應用于再生障礙性貧血的診斷和治療中具有重要意義。

再生障礙性貧血以全血細胞減少為主要臨床特征，其中造血干細胞異常是造成全血細胞減少的重要因素[10]。本研究發(fā)現(xiàn)，再生障礙性貧血患者的WBC明顯下降，表明WBC減少可能與再生障礙性貧血的發(fā)病相關，究其原因可能是由于再生障礙性貧血患者體內(nèi)的造血干細胞和WBC大量凋亡所致。已有研究報道顯示，再生障礙性貧血患者體內(nèi)的中性粒細胞及骨髓間充質(zhì)細胞的細胞周期停滯在G1期，且細胞凋亡水平增加，有部分患者出現(xiàn)造血功能異常[11]。進一步在細胞模型中的實驗結果顯示，骨髓組細胞的分化能力存在缺陷且端粒長度下降，進而導致再生障礙性貧血的發(fā)生[12]。鐵蛋白是體內(nèi)鐵元素的重要貯存方式，在貧血患者中均能夠檢測到鐵蛋白水平的下降。本研究也檢測到再生障礙性貧血患者的血清鐵蛋白水平明顯下降，與已有研究報道結果一致[13]。分析其原因可能是由于鐵元素是體內(nèi)氧氣運輸?shù)闹匾d體，鐵蛋白水平下降會導致血液系統(tǒng)功能紊亂，進而導致貧血癥狀的出現(xiàn)。細胞外鐵主要存在于機體的骨髓小粒中，而細胞內(nèi)鐵主要分布于紅細胞、晚幼紅細胞及早幼紅細胞中，兩者水平異常與貧血的發(fā)生密切相關[8]。本研究進一步發(fā)現(xiàn)，再生障礙性貧血患者的細胞內(nèi)鐵減少，而細胞外鐵增多，目前對再生障礙性貧血細胞內(nèi)外鐵變化的分子機制仍然缺乏了解，需要后續(xù)深入探究。

本研究發(fā)現(xiàn)，WBC、血清鐵蛋白和細胞內(nèi)鐵聯(lián)合診斷再生障礙性貧血的符合率、特異度、靈敏度、約登指數(shù)及AUC值均明顯高于3項單獨檢測，表明三者聯(lián)合檢測在再生障礙性貧血的臨床診斷中應用價值更高。分析其原因可能是由于單純檢測WBC值很難將再生障礙性貧血與感染性疾病和過敏性疾病區(qū)分開[14]，而單純檢測血清鐵蛋白和細胞內(nèi)鐵則很難將其與其他類型貧血疾病區(qū)分開[15]，導致單獨檢測會出現(xiàn)較大程度的誤檢率，而將三者聯(lián)合檢測能夠有效提高診斷的特異度和靈敏度，使得聯(lián)合檢測對再生障礙性貧血的診斷價值更高。

綜上所述，再生障礙性貧血患者WBC、血清鐵蛋白水平、細胞內(nèi)鐵下降，而細胞外鐵升高，WBC、血清鐵蛋白和細胞內(nèi)鐵聯(lián)合檢測對再生障礙性貧血的診斷價值明顯高于各項指標單獨檢測。