劉占剛

聊城臨清市人民醫(yī)院,山東 聊城 252600

免疫熒光技術(shù)是指應(yīng)用將抗原和抗體相結(jié)合的生物反應(yīng)與形態(tài)學(xué)相結(jié)合的原理,把血清學(xué)特異性、熒光色素的敏感性和顯微鏡檢查法融為一體。在采用這種檢測(cè)方法中有檢測(cè)速度快優(yōu)點(diǎn)，同時(shí)還有靈敏度高和特異性強(qiáng)的優(yōu)點(diǎn)，可以應(yīng)用在醫(yī)療的診斷中。特別是在目前的上呼吸道感染病毒檢測(cè)，該種感染是由多種病毒感染引起，為了幫助患者采用針對(duì)性治療方法，需要使用準(zhǔn)確的診斷手段。而采用免疫熒光法診斷，可以實(shí)現(xiàn)對(duì)多種類病毒診斷，以此來確定患者病癥感染的來源?；诖耍窘M研究上呼吸道感染患者中采用免疫熒光法檢測(cè)，觀察免疫熒光法檢測(cè)效果[1]。

1 一般資料與方法

1.1一般資料 將我院在2019年1月--2019年12月收治的220例上呼吸道感染患者作為觀察對(duì)象，患者總共病毒感染有193例，其中男性患者124例，女94例，平均年齡在49.93±7.15歲?；颊卟“Y類型中，咽部感染患者有119例，鼻部感染患者101例。

1.2研究方法

1.2.1檢測(cè)試劑 在本次檢測(cè)中總共使用了5種檢測(cè)試劑，其中有流感病毒A檢測(cè)試劑，流感病毒B檢測(cè)試劑；副流感病毒檢測(cè)試劑；還有兩種檢測(cè)試劑分別是合胞病毒檢測(cè)試劑與腺病毒檢測(cè)試劑[2]。

1.2.2檢測(cè)方法 樣本的收集和處理：

(1)用吸附劑1:10稀釋患者樣本,離心5分鐘(2000rpm，室溫)。(2)將加樣板放在泡沫板上，按順序分別滴加30μl稀釋后血清至加樣板的每一反應(yīng)區(qū)，避免產(chǎn)生氣泡。(3)將載片覆有生物薄片的一面朝下，蓋在加樣板的凹槽里，反應(yīng)立即開始。確保每一樣品均與生物薄片接觸且樣品間互不接觸。室溫(18-25°C)溫育30分鐘。(4)用燒杯盛PBS吐溫緩沖液流水沖洗載片，然后立即將其浸入裝有PBS吐溫緩沖液的洗杯中浸泡至少5分鐘。(5)滴加25μl FITC標(biāo)記的抗人球蛋白(熒光二抗)至潔凈加樣板的反應(yīng)區(qū)，完全加完所有的熒光二抗方可進(jìn)行下一步室溫(18-25°C)溫育30分鐘。(6)用燒杯盛PBS吐溫緩沖液流水沖洗載片，然后立即將其浸入裝有PBS吐溫緩沖液的洗杯中浸洗至少5分鐘。(7)將蓋玻片直接放在泡沫板的凹槽里。滴加甘油/PBS至蓋玻片：每一反應(yīng)區(qū)約10μl。從PBS吐溫緩沖液中取出一張載片，用吸水紙擦干背面和邊緣的水分，注意不要擦拭反應(yīng)區(qū)間隙。將載片覆有生物薄片的一面朝下放在已準(zhǔn)備好的蓋玻片上，立即查看并輕輕調(diào)整使蓋玻片嵌入到載片的凹槽里。

結(jié)果判讀：

顯微鏡下觀察熒光模型。觀察感染細(xì)胞用20×物鏡，觀察細(xì)胞基質(zhì)用40×物鏡。

激發(fā)濾片：488nm，分光濾鏡：510nm，阻擋濾鏡：520nm。光源：100W汞燈。

2 結(jié) 果

對(duì)220例上呼吸道患者檢查中，病毒性感染陽性患者193例，感染率為87.72%；其中流感病毒感染率最高，感染率為37.30%，其次是腺病毒，感染率為26.94%，再次是副流感病毒，感染率為21.76%，最后是合胞病毒，感染率為13.98%。

表1 對(duì)193例上呼吸道感染病毒種類統(tǒng)計(jì)

3 討 論

隨著人們的生活環(huán)境改變，容易導(dǎo)致上呼吸道感染病癥的發(fā)生。上呼吸道感染病癥發(fā)生后，如果為細(xì)菌性感染，或者是病毒性感染，這些感染都會(huì)有一定的傳播性，引起大面積群體性病癥。對(duì)于上呼吸道感染病癥傳染控制中，需要對(duì)患者病癥原因進(jìn)行診斷，并且采用針對(duì)性方法避免，以此來減少傳播性。在目前的上呼吸道感染病癥診斷中，主要使用免疫熒光檢測(cè)方法，該種方法其診斷準(zhǔn)確率高，可以實(shí)現(xiàn)對(duì)診斷后，采用不同方法治療病毒感染引起的上呼吸道病癥。而且隨著免疫熒光檢測(cè)方法的不斷應(yīng)用，臨床上檢測(cè)人員需要不斷研究該種方法，使其更好的在檢測(cè)臨床上使用，以此來提高臨床檢查效果[3]。

在本組研究中，采用免疫熒光法檢測(cè)上呼吸道病毒感染患者，對(duì)220例上呼吸道患者檢查中，病毒性感染陽性患者193例，感染率為87.72%；其中流感病毒感染率最高，感染率為37.30%，其次是腺病毒，感染率為26.94%，再次是副流感病毒，感染率為21.76%，最后是合胞病毒，感染率為13.98%。從上述的數(shù)據(jù)中分析采用免疫熒光檢測(cè)方法，可以對(duì)上呼吸道感染多種病毒進(jìn)行有效檢測(cè)，以便對(duì)病毒性感染的種類進(jìn)行區(qū)分。在采用免疫熒光檢測(cè)上呼吸道感染病癥中，不僅僅有著檢測(cè)正確率高的優(yōu)點(diǎn)。該種檢查方法還有著操作簡(jiǎn)單優(yōu)點(diǎn)，基本上可以在基層醫(yī)院開展檢查，只需要對(duì)操作人員進(jìn)行簡(jiǎn)單的培訓(xùn)，就可以開展檢測(cè)工作。同時(shí)采用免疫熒光檢測(cè)方法，還有檢測(cè)費(fèi)用低廉優(yōu)點(diǎn)，可以在臨床上普遍使用。最后是免疫熒光檢測(cè)方法的速度快，一般開展檢查工作有兩個(gè)小時(shí)能夠完成確診，減少患者等待確診時(shí)間，也減少患者對(duì)病癥的影響，提高上呼吸道感染患者治療效果。

綜上所述，在上呼吸道感染診斷中，由于免疫熒光檢測(cè)方法應(yīng)用多年，有著成熟的技術(shù)，并且在臨床上使用證明，該種檢查正確率高，操作簡(jiǎn)單和診斷速度快，可以在上呼吸道感染病癥檢測(cè)中應(yīng)用免疫熒光法，以此來提高檢測(cè)效果。